На третьем этапе проводится электрофорез всех четырех проб в полиакрила-мидном геле. Для того чтобы условия ... - Большая Энциклопедия Нефти и Газа



Выдержка из книги Кнорре Д.Г. Биологическая химия


На третьем этапе проводится электрофорез всех четырех проб в полиакрила-мидном геле. Для того чтобы условия разделения были идентичными во всех четырех пробах, пробы наносят на один гель и разделяют на четырех параллельных дорожках этого геля. Разделение, как уже говорилось в § 7.1, проходит по длине, и положение каждого фрагмента, детектируемое радиоавтографически, дает его длину, а тем самым и положение соответствующего мономера в исходной цепи. Таким образом, на одной дорожке, если речь идет о ДНК-фрагменте, определяется положение всех остатков тимидина, на другой - всех остатков дезокси-цитидина, на третьей - всех остатков дезоксигуанозина и на четвертой - всех остатков дезоксиаденозина. В сумме это дает положение в исходном полинуклео-тиде всех мономеров, а это и означает, что определяется его первичная структура. Эта структура в один прием считывается с геля, причем при достаточной длине дорожки геля одновременно может быть определено расположение сотен мономерных звеньев.

(cкачать страницу)

Смотреть книгу на libgen

На третьем этапе проводится электрофорез всех четырех проб в полиакрила-мидном геле.  Для того чтобы условия разделения были идентичными во всех четырех пробах,  пробы наносят на один гель и разделяют на четырех параллельных дорожках этого геля.  Разделение,  как уже говорилось в § 7.1,  проходит по длине,  и положение каждого фрагмента,  детектируемое радиоавтографически,  дает его длину,  а тем самым и положение соответствующего мономера в исходной цепи.  Таким образом,  на одной дорожке,  если речь идет о ДНК-фрагменте,  определяется положение всех остатков тимидина,  на другой  -  всех остатков дезокси-цитидина,  на третьей  -  всех остатков дезоксигуанозина и на четвертой  -  всех остатков дезоксиаденозина.  В сумме это дает положение в исходном полинуклео-тиде всех мономеров,  а это и означает,  что определяется его первичная структура.  Эта структура в один прием считывается с геля,  причем при достаточной длине дорожки геля одновременно может быть определено расположение сотен мономерных звеньев.