В молекулярной биологии широко используется способность денатурированных ДНК ренатурировать с восстановлением исходной двуспиральной структуры. Для ... - Большая Энциклопедия Нефти и Газа



Выдержка из книги Спирин А.С. Молекулярная биология. Структура и биосинтез нуклеиновых кислот


В молекулярной биологии широко используется способность денатурированных ДНК ренатурировать с восстановлением исходной двуспиральной структуры. Для этого денатурированную ДНК ( если изучается гибридизация двух различных нуклеиновых кислот, то одна из них несет радиоактивную метку) помещают в условия, оптимальные для образования двойных спиралей ( ионная сила раствора - около 0 2; температура - на 10 - 20 СС ниже Тт нативной ДНК) - В случае полностью комплементарных цепей ДНК со временем они целиком превратятся в дву-спиральные молекулы. Если в смеси присутствуют как комплементарные, так и некомплементарные цепи ДНК, то после ренатурации первых тем или иным способом определяют долю двуспиральных молекул. ДНК одного типа закрепляются на нитроцеллюлозных фильтрах, которые затем помещают в раствор ДНК ( или РНК) другого типа. После образования двуспиральных комплексов на фильтрах они легко могут быть отмыты от несвязавшейся ДНК - Этот же подход используется при выявлении цепей ДНК ( или РНК), комплементарных другим ДНК ( или РНК), после разделения их электрофорезом в гелях.

(cкачать страницу)

Смотреть книгу на libgen

В молекулярной биологии широко используется способность денатурированных ДНК ренатурировать с восстановлением исходной двуспиральной структуры.  Для этого денатурированную ДНК ( если изучается гибридизация двух различных нуклеиновых кислот,  то одна из них несет радиоактивную метку) помещают в условия,  оптимальные для образования двойных спиралей ( ионная сила раствора  -  около 0 2;  температура  -  на 10 - 20 СС ниже Тт нативной ДНК) - В случае полностью комплементарных цепей ДНК со временем они целиком превратятся в дву-спиральные молекулы.  Если в смеси присутствуют как комплементарные,  так и некомплементарные цепи ДНК,  то после ренатурации первых тем или иным способом определяют долю двуспиральных молекул.  ДНК одного типа закрепляются на нитроцеллюлозных фильтрах,  которые затем помещают в раствор ДНК ( или РНК) другого типа.  После образования двуспиральных комплексов на фильтрах они легко могут быть отмыты от несвязавшейся ДНК - Этот же подход используется при выявлении цепей ДНК ( или РНК),  комплементарных другим ДНК ( или РНК),  после разделения их электрофорезом в гелях.