Концентрация - буферный раствор
Cтраница 3
Это реакция первого порядка по концентрации основания, когда R-SH представляет собой НОСИ СН SH; от концентрации буферного раствора скорость реакции не зависит. Следовательно, когда концентрация аниона R - S - мала. SH выступает как нуклеофил и на реакцию не влияет кислотно-основный катализ. [31]
Это реакция первого порядка по концентрации основания, когда R-SH представляет собой НОСИ СН SH; от концентрации буферного раствора скорость реакции не зависит. Следовательно, когда концентрация аниона R - S - мала. К - SH выступает как нуклеофил и на реакцию не влияет кислотно-основный катализ. [32]
 |
Скорости элюирования в ионообменной хроматографии. [33] |
ОН - - форме используют элюенты с возрастающей концентрацией ОН - - ионов, для разделения на анионите в солевой форме - элюенты с возрастающей концентрацией других противоионов. Ионную силу можно повысить, добавляя в элюент нейтральные электролиты, чаще всего хлорид калия или натрия, при неизменной концентрации буферного раствора. [34]
Степень удерживания образца снижается с увеличением ионной силы подвижной фазы и увеличивается с увеличением ионообменной емкости сорбента. Ионная сила подвижной фазы возрастает при возрастании концентрации буфера и сохранении неизменным рН или при добавлении соли. Важна также концентрация буферных растворов, так как в растворе наблюдается конкуренция между ионами образца и буфера. Уменьшение концентрации буферного раствора увеличивает сродство смолы к образцу, что приводит к увеличению времени удерживания. Сильных буферных расторов также следует избегать из-за вероятности выпадения осадка и закупоривания колонок. Сила растворителя зависит от типа нротивоиона, причем сгепснь удерживания образца увеличивается в ряду, обратном лиотроггным сериям активности ионов, приведенным выше. [35]
Кривые элюирования, полученные на колонке такого типа, требуют тщательной расшифровки, поскольку механизм процесса, лежащего в основе такого метода, отличается от механизма распределительной и ионообменной хроматографии. В процессе адсорбционной хроматографии встречается значительное размывание вытекающих зон ( образование хвостов), за исключением тех случаев, когда состав элюирующего раствора таков, что значение Rf вымываемого вещества приближается к единице. Успех фракционирования смеси белков зависит от подбора таких концентраций буферного раствора, которые достаточно различаются по ионной силе, чтобы обеспечить четкое разделение компонентов смеси на фракции при элюировании их с колонки. Во многих случаях последовательное элюирование белков проходит без помех, но необходимо помнить, что пики, полученные из смеси неизвестных белков, могут содержать несколько белков в каждой элюируемой зоне. [36]
Лленадо и Рсчниц [22 ] использовали в своей автоматической установке для анализа глюкозы в качестве катализатора ионы мо-либдата вместо пероксидазы. Они изучали функции проточного 1 - - селективного электрода, применяя метод кинетики с фиксированным временем. Авторы исследовали и указали оптимальные значения параметров, определяющих работу системы, таких, как рН, тип и концентрация буферного раствора, время и температура выдерживания смеси в термостате для полного протекания реакции, количество фермента, которое определяет сигнал электрода. [37]
По некоторым данным, цветную реакцию дает платина ( II), а платина ( IV) сначала восстанавливается реагентом до пла-тины ( П), что является одним из факторов, определяющих скорость развития окраски. Окраска неизменна не менее 24 час. Чтобы окраска всегда развивалась одинаково, необходимо брать избыток реагента по сравнению с платиной ( в молях) и стандартизировать объем растворов, время нагревания и концентрацию буферных растворов. [38]
Как начальная, так и стационарная скорости были прямо пропорциональны концентрации каталазы, но в зависимости от концентрации перекиси изменялись сложным путем, возрастая до максимальных значений при 0 4 и 0 07 М Н2О2 соответственно, с последующим значительным уменьшением по мере дальнейшего роста концентрации перекиси. Таким образом, перекись при высокой ее концентрации сама ингибирует собственное разложение. Эти результаты были получены с каталазой из эритроцитов и из печени, а также с лизатами красных кровяных шариков, а дальнейшие опыты показали, что ни возможное присутствие ингибиторов в растворе перекиси, ни природа и концентрация буферных растворов не играют никакой роли в этой реакции. В результате нескольких опытов, в которых во время реакции добавлялся разбавленный буферный раствор или небольшие количества концентрированного раствора перекиси, было показано, что ингибирование разложения при стационарной скорости в условиях высоких концентраций перекиси является количественно обратимым. Следовательно, это ингибирование обусловлено не разрушением энзима. [39]
Степень удерживания образца снижается с увеличением ионной силы подвижной фазы и увеличивается с увеличением ионообменной емкости сорбента. Ионная сила подвижной фазы возрастает при возрастании концентрации буфера и сохранении неизменным рН или при добавлении соли. Важна также концентрация буферных растворов, так как в растворе наблюдается конкуренция между ионами образца и буфера. Уменьшение концентрации буферного раствора увеличивает сродство смолы к образцу, что приводит к увеличению времени удерживания. Сильных буферных расторов также следует избегать из-за вероятности выпадения осадка и закупоривания колонок. Сила растворителя зависит от типа нротивоиона, причем сгепснь удерживания образца увеличивается в ряду, обратном лиотроггным сериям активности ионов, приведенным выше. [40]
Na 0 35 М ( буферный раствор В, табл. 10), который используется в двух-колоночной системе аминокислотного анализатора. Типичная хроматография такого разделения представлена на фиг. Колебания рН и концентрации буферного раствора не существенны для фракционирования. Хроматографию проводят при комнатной температуре без предварительного уравновешивания. На уравновешенной пластинке ( см. буферный раствор для уравновешивания, табл. 10) это происходит за несколько минут. [41]
 |
Выходные кривые при лексообразующем вымывании. [42] |
Рассмотренные три способа не могут дать удовлетворительного результата, если ионы очень мало различаются по свойствам и поглощаются ионитом почти одинаково. В этом случае эффективного разделения можно достичь, применяя метод ионообменной хроматографии с комплексообразователем, дающим с разделяемыми ионами комплексные соединения различной прочности. Рассмотрим суть этого метода на примере разделения ионов редкоземельных элементов с применением лимонной кислоты в качестве комплексообразователя. При этом поглощаемые катионы образуют цитратные комплексные отрицательно заряженные анионы, прочность которых ( и, следовательно, вымывание из катионитовои колонки) определяется рН и концентрацией цитратного буферного раствора. Так создаются условия для дифференциального вымывания поглощенных катионов. Чем прочнее образующийся комплексный анион, тем легче вымывается катион из колонки. [43]
Для повышения производительности обычно повышают напряжение и уменьшают длину капилляра. Однако с уменьшением /, понижается сопротивление раствора, что способствует более интенсивному выделению тепла. Тепловые эффекты сводят к минимуму путем охлаждения капилляра. Объем инжектируемого раствора также стараются взять минимальным. Для лучшего разделения концентрация буферного раствора должна быть примерно в 1000 раз выше концентрации определяемых веществ. [44]
Видно, что эффективность разделения зависит от К, тогда как /, практически не влияет на нее и определяет лишь время миграции зоны в капилляре. Для повышения производительности обычно повышают напряжение и уменьшают длину капилляра. Однако с уменьшением L понижается сопротивление раствора, что способствует более интенсивному выделению тепла. Тепловые эффекты сводят к минимуму путем охлаждения капилляра. Объем инжектируемого раствора также стараются взять минимальным Для лучшего разделения концентрация буферного раствора должна быть примерно в 1000 раз выше концентрации определяемых веществ. [45]
Страницы: 1 2 3 4