Cтраница 1
Гидролизованный крахмал отмывают обычно на воронке Бюх-нера 5 л дистиллированной воды, пропускают через него под вакуумом 300 - 350 мл ацетона для подсушивания и окончательно высушивают под инфракрасной лампой 3 - 4 ч, не допуская перегрева выше 60 С. После высушивания крахмал на 24 ч оставляют на воздухе. [1]
Количество гидролизованного крахмала С ( в г) определяют по формуле CQ l ( Di - D2) fDi, где 0 1 - количество крахмала, взятое для ферментативной реакции в качестве субстрата, г. Если С меньше 0 02 или больше 0 07, то испытание повторяют, приготовив новый рабочий раствор фермента, беря большее или меньшее количество исходного раствора для разбавления. [2]
Если количество гидролизованного крахмала меньше 0 02 или юльше 0 07 г, испытание повторяют, беря для разбавления соот-ютственно большее или меньшее количество основного раствора фермента. [3]
Находим количество гидролизованного крахмала: С 0 1 ( 0 725 - 0 500) / 0 7250 031 г и определяем АС исследуемого солода: АС ( 6 889 0 031 - 0 029388) 1000 / 10 18 42 ед. [4]
Находим количество гидролизованного крахмала: С 0 1 ( 0 725 - 0 500) / 0 7250 031 г и определяем АС исследуемого солода: АС ( 6 889 - 0 031 - 0 029388) 1000 / 10 18 42 ед. [5]
Находим количество гидролизованного крахмала: С 0 1 ( 0 725 - 0 500) / 0 7250 031 г и определяем АС исследуемого солода: АС ( 6 889 0 031 - 0 029388) 1000 / 10 18 42 ед. [6]
Если количество гидролизованного крахмала меньше 0 02 или больше 0 07 г, испытание повторяют, беря для разбавления соответственно большее или меньшее количество основного раствора фермента. [7]
В пробирку с гидролизованным крахмалом добавляют 4 капли раствора щелочи, 1 каплю раствора сернокислой меди, взбалтывают содержимое пробирки и нагревают до кипения. Раствор окрашивается в желтоватый цвет. [8]
В пробирку с гидролизованным крахмалом добавляют 4 капли раствора щелочи, 1 каплю раствора сульфата меди ( II), взбалтывают содержимое пробирки и нагревают до кипения. Раствор окрашивается в желтоватый цвет. [9]
Если окажется, что количество гидролизованного крахмала больше 0 07 нли меньше 0 02, анализ повторяют, готовя новый рабочий раствор соответственно из меньшего или большего количества основного раствора. Если количество превращенного в результате ферментативной реакции крахмала находится в указанных пределах, полученные данные используют для определения активности. [10]
Суспензию из 13 - 15 г гидролизованного крахмала в 100 мл буфера нагревают в 1-литровой склянке с длинным горлом над открытым пламенем горелки Бунзена. В точке образования геля ( примерно при 65) суспензия становится очень вязкой, и ее необходимо сильно размешивать во время последующего нагревания, при котором образуется более жидкий гель. Во время этой операции рекомендуется надевать асбестовую перчатку. Необходимо внимательно следить за тем, чтобы при нагревании не выпарить слишком много воды, иначе гель вновь затвердеет. Горячий гель быстро выливают в лоток, который предварительно слегка смазывают парафиновым маслом. Полосу из пластика ( поливинил-хлорида), обработанную парафиновым маслом, осторожно накладывают на поверхность геля, избегая захвата пузырьков воздуха; пока гель затвердевает, его сверху придавливают тяжелой стеклянной пластинкой. Ниже приведены испытанные до настоящего времени буферные системы. [11]
Препараты крахмала имеются в продаже ( например, гидролизованный крахмал фирмы Connaught Laboratories, Toronto), но в небольших количествах его нетрудно приготовить самим. Навеску картофельного крахмала ( 30 г) суспендируют в 60 мл смеси кислоты и ацетона ( 1 объем концентрированной соляной кислоты на 100 мл ацетона) в небольших склянках. Чтобы получить наилучшие результаты, рекомендуется использовать сорта крахмала из Дании или штата Айдехо, но английский крахмал также вполне пригоден. Суспензию нагревают на водяной бане при 37 в течение 2 5 час, причем через каждые 30 мин берут пробы. [12]
Лацко и Малек [47] для определения молекулярных весов частично гидролизованного крахмала предложили проводить обычное иодо-метрическое окисление альдегидных групп с применением различного количества окислителя. [13]
Для определения предела расщепления препаратов крахмала р-амилазой на аналитических весах отвешивали в пробирку 20 - 35 мг препаратов гидролизованного крахмала, приливали 3 мл воды, помещали на кипящую водяную баню на 1 мин. Для удобства мы отказались от пробирок, заменив их коническими колбами на 50 мл, для прогревания пользовались специально изготовленным штативом. [14]
Пулик [24] недавно опубликовал убедительные результаты фракционирования продуктов, полученных при восстановительном расщеплении а2 - макроглобулина с применением геля, приготовленного следующим образом. Гидролизованный крахмал ( 60 - 65 г) смешивали с 250 г мочевины и смесь добавляли маленькими порциями к 300 мл буфера при энергичном перемешивании. Затем вязкий раствор нагревали при 70 в течение 10 мин, удаляли пузырьки воздуха и гель выливали в лоток для электрофореза. [15]