Cтраница 1
Изучение ауксотрофов по питательным веществам сыграло важную роль в развитии биохимии, но, сожалению, с помощью этого метода можно изучать только один ген или группу генов, участвующих в синтезе какого-либо конкретного субстрата. Было бы желательно, однако располагать методами обнаружения мутаций всего набора генов, содержащихся в клетках. Но этому препятствовало то обстоятельство, что большинство мутаций легальны, причем во многих случаях устра-нить этот эффект добавлением всевозможных субстратов не удается. [1]
Мутагенное действие НГ на Pseudomonas aeruginosa. [2] |
У стабильных ауксотрофов определены питательные потребности. [3]
Urac ( ауксотроф по урацилу) выращивается на среде, содержащей б торурацил. При этом возникают заметные изменения в белках, синтезируемых клеткой, как в аминокислотном составе белков, так и в их физико-химических и ферментативных свойствах. [4]
Часто для обозначения питательных потребностей организма пользуются терминами прототроф и ауксотроф. Прототроф не нуждается в факторах роста, ауксотроф требует добавления таких факторов в среду. Ауксотрофные формы часто являются мутантными организмами, или патогенами. Фактором роста в принципе может называться любое вещество. Например, молочнокислые бактерии нуждаются в наборе почти всех аминокислот, и в данном случае они и являются факторами роста. Обычно источником комплекса витаминов служит дрожжевой автолизат ( автолиз дрожжей проводят при температуре 50 С с небольшим количеством толуола) с добавлением витамина В) 2, так как в дрожжевом автолизате его мало. Дрожжевой автолизат - это также и источник азота в виде аминокислот и полипептидов. [5]
У ауксотрофа по пищевым потребностям имеется обычно дефектный тен, детерминирующий белок, без которого не может осуществляться биосинтез питательного компонента, необходимого данному ауксотрофу. Исходя из этого, выявляют затронутый мутацией ген, которому присваивают соответствующий генетический символ. С помощью метода реплик можно определить также и другие типы мутаций, например мутации, нарушающие подвижность или другие свойства клетки; и в этом случае мутантные гены получают - соответствующие символы. [6]
Однако при добавлении одного или нескольких специфических соединений типа аминокислот или витаминов рост мутантных бактерий обычно восстанавливается. Отбор ауксотрофов по-пищевым потребностям ( так называются эти мутанты) чаще всего осуществляют, высевая большое число облученных или химически обработанных клеток в чашки, содержащие твердую, богатую питательными веществами среду. [8]
Деферрисидерохромы в большинстве случаев были бы так же активны, как комплексы с железом, если бы не предпринимались меры для удаления загрязняющих количеств железа из среды. Большинство сидерохромных ауксотрофов обладают способностью расти в присутствии высоких концентраций неорганического железа. [9]
Ауксотрофные мутанты Pseudomonas aeruginosa, полученные при действии НГ, дефицитны по метионину ( И), гистидину ( 5), аргинину ( 4), триптофану ( 4) и другим метаболитам. Исследуемые штаммы отличаются по способности ауксотрофов к реверсии. [10]
Сидерохромную активность можно обнаружить IB почве и навозе, откуда можно заключить, что такие соединения имеют общее значение в метаболизме железа микробами. Ге-мин активен для дативных ( ауксотрофов; нет со-мнения, что такие штаммы адаптировались к использованию нескольких природных железосодерж-ащих соединений. Возможно, Fe ( II) достаточно растворимо в культурной среде анаэробных частиц для того, чтобы отпала необходимость в си-дерохромных носителях, но эта точка зрения нуждается в экспериментальной проверке. Специфические транспортные системы для ионов металлов, отличных от железа, могут и не требоваться, поскольку такие ионы обычно гораздо более растворимы, чем железо, и, кроме того, они требуются в меньших количествах. [11]
Часто для обозначения питательных потребностей организма пользуются терминами прототроф и ауксотроф. Прототроф не нуждается в факторах роста, ауксотроф требует добавления таких факторов в среду. Ауксотрофные формы часто являются мутантными организмами, или патогенами. Фактором роста в принципе может называться любое вещество. Например, молочнокислые бактерии нуждаются в наборе почти всех аминокислот, и в данном случае они и являются факторами роста. Обычно источником комплекса витаминов служит дрожжевой автолизат ( автолиз дрожжей проводят при температуре 50 С с небольшим количеством толуола) с добавлением витамина В) 2, так как в дрожжевом автолизате его мало. Дрожжевой автолизат - это также и источник азота в виде аминокислот и полипептидов. [12]
Иллюстрация феррихромного антагонизма альбомицина и метод отбора мутантов Salmonella typhimurium, не активных в феррихромном транспорте. [13] |
По-видимому, в среде с минимально низкой концентрацией этих веществ цитрат связывает железо и делает его бесполезным для клетки. Энтеро-бактин ( I) при низкой концентрации облегчает усвоение 55Fe суспензией клеток ауксотрофов S. Мутанты делятся на два класса: те, которые в процессе биосинтеза блокируют 2 3-ди-оксибензойную кислоту, и те, которые не способны соединять эту кислоту с серином. Эксперименты с трансдукцией при участии Фага Р-22 дают основание предположить, что гены для биосинтеза энтеробактина собраны в железном опероне. [14]
Бактериальные мутанты, которые не способны синтезировать Gly, Asp или Glu, обычно требуют добавки пуринов-адени-на и гуанина. Кроме того, для ауксотро-фов по Asp и Glu необходимо, чтобы в среде содержались - уридин и цитозин, а для ауксотрофов по Gly дополнительные пири-мидины не нужны. [15]