Ацетилированные аминокислота
Cтраница 1
Ацетилированные аминокислоты разделяются хроматографи-чески повторной адсорбцией на силикагеле и элюцией следующими растворителями: 1 % бутиловый спирт в СНСЬ, 3 % бутиловый спирт в СНСЬ, 17 % бутиловый спирт в СНСЬ, 5 % и 30 % пропиловый спирт в циклогексане. [1]
 |
Разделение методом распределительной хроматографии на колонке с силикагелем. [2] |
Раствор-смеси ацетилированных аминокислот А, В и В вводят в колонку сверху и элюируют потоком ( в) хлороформа. В ходе элюиро-вания компоненты смеси различным образом распределяются между текущей органической фазой и закрепленной на поверхности силикагеля водной фазой, и при этом постепенно происходит разделение смеси. Первой элюируется зона того вещества, которое в присутствии водной фазы лучше всего растворимо в хлороформе. [3]
Разделяются только ацетилированные аминокислоты, так как свободные адсорбируются кремневым гелем. Пригоден для разделения моноаминомоно-карбоновых кислот и серийных полумикроопределеннй фенил-аланина, лейцина, изолейцина, триптофана, аалина, метионнна. [4]
Когда колонка готова, смесь ацетилированных аминокислот переносят на нее, экстрагируя аминокислоты небольшими порциями в 1 мл горячей смеси растворителей. Раствор осторожно выпускается из пипетки на верхнюю поверхность колонки, причем следует стараться не нарушить структуры геля. Дают раствору впитаться в гель и тогда только добавляют следующую порцию. [5]
Метод хроматографического экстрагирования для разделения смеси ацетилированных аминокислот впервые с успехом был применен А. Вначале распределительная хроматография была предложена ими в обычном колоночном варианте, а затем в виде так называемой бумажной хроматографии. [6]
Метод хроматографического экстрагирования для разделения смеси ацетилированных аминокислот впервые с успехом был применен А. Вначале распределительная - хроматография была предложена ими в обычном колоночном варианте, а затем в виде так называемой бумажной хроматографии. [7]
Другое предположение для объяснения механизма ферментативного синтеза пептидов из анилидов и ацетилированных аминокислот основано на том, что ни одно из веществ, участвующих в этом синтезе, не может образовывать цвиттерионы. [8]
По предварительным данным, полученным в лаборатории авторов, метиловые, этиловые и я-пропиловые эфиры ацетилированных аминокислот пригодны для газохроматографического разделения в интервале температур 100 - 240 С. По этим причинам, а также из-за легкости разделения на покрытых карбоваксом хромосорбах G или W ( высококачественные), мы остановили свой выбор на ацетил-я-пропиловых эфирах ( см. разд. [9]
Распределительная хроматография впервые была с успехом применена Мартином и Синджем ( Martin, Synge, 1941) для разделения ацетилированных аминокислот. Позже Консденом и др. ( Consden, Gordon, Martin, 1944) было обнаружено, что четкие распределительные хроматограммы аминокислот получаются, если в качестве носителя использовать фильтровальную бумагу. [10]
Впервые метод колоночной распределительной хроматографии был использован Мартином и Сингом ( Martin, Synge, 1941) для разделения ацетилированных аминокислот. Носителем неподвижной фазы служил силикагель, в качестве подвижного растворителя авторы применили смесь хлороформа с возрастающей концентрацией / ( - бутанола. [11]
Распределительная хроматография впервые была с успехом применена Мартином и Синджем ( Martin, Synge, 1941) для разделения ацетилированных аминокислот. Позже Консденом и др. ( Consden, Gordon, Martin, 1944) было обнаружено, что четкие распределительные хроматограммы аминокислот получаются, если в качестве носителя использовать фильтровальную бумагу. [12]
Развитие хроматографических методов разделения и идентификации аминокислот значительно облегчило проведение исследований с аминокислотами; многие успехи, достигнутые в изучении аминокислот за последнее время, непосредственно связаны с применением хроматографии. Занимаясь разделением аминокислот, Нейбергер [154] в 1938 г. обнаружил, что у ацетил-производных разных нейтральных аминокислот коэффициенты распределения между водой и несмешивающимися с водой растворителями различны. В 1941 г. Мартин и Синг [155] осуществили разделение ацетилированных аминокислот на сили-кагеле; последний служил инертной опорой для водной фазы, через которую протекал неводный растворитель. В дальнейшем эта техника была усовершенствована. В настоящее время считают, что в процессе разделения веществ на бумаге наряду с распределением между растворяющими фазами играют роль также механизмы адсорбции и ионного обмена. [13]
NaOH и 1 мл уксусного ангидрида в течение 15 мин. Затем щелочной раствор оставляли стоять 10 мин. В таком виде смесь ацетилированных аминокислот была готова для хроматографиче-ского анализа. [14]
Страницы: 1