Cтраница 1
Ацетокармин широко применяется для окраски хромосом. В делящихся клетках хромосомы обычно увеличиваются и хорошо видны в микроскоп. [1]
Заменяют ацетокармин на просветляющую и консервирующую жидкость1 Смита. Для этого с одной стороны покровного стекла наносят каплю раствора Смита, а с другой кладут фильтровальную бумагу. [2]
Раствор ацетокармина готовят следующим образом: 100 мл 45 % - ной уксусной кислоты и 4 г кармина кипятят 3 - 4 часа в колбе с обратным холодильником, охлаждают, дают отстояться в течение суток и фильтруют. [3]
Окрашивают ацетокармином или по Фельгену. [4]
Обычно применение ацетокармина дает возможность получать четко окрашенные хромосомы на фоне слабо окрашенной цитоплазмы. В том случае, если хромосомы красятся плохо, применяют протравливание в железо-аммонийных квасцах, в результате чего достигается достаточная степень контрастности в окрашивании хромосом и цитоплазмы. Для этого объект перед окрашиванием помещают на 5 - 10 минут в 2 - 4 % - ный водный раствор железоаммонийных квасцов, промывают и окрашивают, как описано выше. [5]
Благодаря тому что ацетокармин обладает не только окрашивающими, но и фиксирующими свойствами, при анализе пыльников указанным способом нередко можно получить препараты с хорошими картинами мейоза. [6]
Стерильные пыльцевые зерна с реактивом-1 ( ацетокармин) будут белого цвета, а фертильные - красного. Наличие крахмала в пыльце: синяя окраска с реактивом-2 свидетельствует о жизнеспособности пыльцы. [7]
Листочек раздавливают на предметном стекле в капле ацетокармина, накрывают покровным стеклом и нагревают на пламени до 50 - 60 С в течение 15 - 20 секунд. [8]
Петри; 5) термостат; 6) ацетокармин ( реактив - Г); 7) йод в йодистом калии ( реактив-2); 8) агар; 9) 15 % - ный раствор сахарозы; 10) пыльца различных растений, собранная в зоне сильного загрязнения воздуха и контроль - в чистой зоне. [9]
Анализ ана-телофаз производится в препаратах костного мозга, окрашенных ацетокармином. На каждый срок исследования должен браться материал не менее чем от 6 животных. С целью получения убедительных данных в материале от каждого животного должно быть просмотрено не менее 300 - 400 ана-телофаз. Для количественной оценки влияния химических соединений подсчитывается процент хромосомных перестроек и митотический индекс ( процент делящихся клеток на 1000 клеток костного мозга); статистическая обработка полученных данных проводится по методу малых выборок для оценки различий по тесту t Стъюдента. [10]
Анализ ана-телофаз производится в препаратах костного мозга, окрашенных ацетокармином. На каждый срок исследования должен браться материал не менее чем от 6 животных. С целью получения убедительных данных в материале от каждого животного должно быть просмотрено не менее 300 - 400 ана-телофаз. Для количественной оценки влияния химических соединений подсчитывается процент хромосомных перестроек и митотический индекс ( процент делящихся клеток на 1000 клеток костного мозга); статистическая обработка полученных данных проводится по методу малых выборок для оценки различий по тесту t Стъюдента. [11]
В некоторых случаях окрашивание материала осуществляют при раздавливании пыльника в ацетокармине. Для этого зафиксированный пыльник помещают на предметное стекло в каплю ацетокармина и дальше поступают так, как описано выше при окрашивании свежих пыльников. [12]
Обычно используют 2 - 4 % - ный раствор кармина в 45 % - ной уксусной кислоте ( ацетокармин), который одновременно фиксирует клетки и окрашивает в них ядра. [13]
Берут серию бутонов, начиная от самых маленьких, и последовательно анализируют состояние пыльников, пока не будет обнаружена нужная стадия. Пыльник помещают на предметное стекло в каплю ацетокармина и быстро выдавливают его содержимое скальпелем или стеклянной палочкой. [14]
Собранная пыльца хранится в холодильнике в малой стеклянной таре ( бюксы, пробирки) до анализа. Затем ее помещают на предметное стекло в каплю ацетокармина, накрывают покровным стеклом и осторожно несколько раз подогревают на спиртовке. По мере испарения красителя его следует добавлять пипеткой под покровное стекло. Когда пыльца размягчится ( при надавливании препаровальной иглой на покровное стекло начинает расплываться) нагревание прекратить. [15]