Метод - анализ - аминокислота
Cтраница 1
Метод анализа аминокислот с помощью ионообменной хроматографии базируется на работах Штейна и Мура [3-5], которые систематически изучали проблемы, связанные с разделением и количественным определением наиболее распространенных аминокислот. В дальнейшем эта система неоднократно модифицировалась с целью увеличения скорости и чувствительности анализа. В настоящее время предел обнаружения аминокислот составляет несколько пикомолей, а длительность анализа равна - 90 мин. Уменьшение разрешающей способности, которое является следствием увеличения скорости разделения, затрудняет или даже делает невозможным определение малораспространенных аминокислот. [1]
Вопросу разработки методов анализа аминокислот и их смесей не уделяется достаточного внимания, что весьма осложняет производство аминокислот и полимерных материалов на их основе. [2]
Газовая хроматография как метод анализа аминокислот имеет следующий недостаток: перед разделением необходимо дважды проводить дериватизацию. Как уже говорилось в предыдущих главах, некоторые методы ЖХ разработаны применительно к немодифицированным аминокислотам, тогда как другие предусматривают дериватизацию с целью упрощения обнаружения и увеличения чувствительности. [3]
 |
Пример быстрого разделения на одной колонке искусственной смеси аминокислот, входящих в состав продуктов гидролиза белков, с помощью анализатора Durrum D-500 Analyser. [4] |
Еще одно направление развития методов анализа аминокислот связано со значительным повышением чувствительности анализа. Сам этот реактив не флуоресцирует, но его аминокислотные производные интенсивно флуоресцируют при УФ-облучении. [5]
В литературе описан [527, 528] ряд методов анализа аминокислот, но большинство из них недостаточно чувствительны и быстры, чтобы их можно было рекомендовать как стандартные. [6]
Разделение с высокой степенью разрешения и почти количественным выходом растворенных веществ делает метод элюирования из ионообменных смол наиболее эффективным из доступных в настоящее время методов анализа аминокислот. Простая схема процесса элюирования двух видов катионов при помощи ионов натрия приведена на фиг. [7]
Согласно требованиям Ф-VIII нерадиоактивный метионин, а следовательно, и меченый, как всякий лекарственный препарат должен быть проверен на тождественность и доброкачественность. Литературные данные [1, 2, 3] показывают, что исследователи применяли различные вещества в качестве реагентов на аминокислоты, причем большинство методов анализа аминокислот предусматривало решение специфической задачи, касающейся в основном анализа белка. По анализу же аминокислот, меченных радиоактивными изотопами, в том числе и метионина с изотопом S35, литературные данные совсем отсутствуют. [8]
Несмотря на очевидные преимущества меченого ДНФБ как радиореагента, он не нашел широкого применения для определения аминов, что, возможно, объясняется его дороговизной по сравнению с уксусным ангидридом. Еще один недостаток ДНФБ-3Н связан с возможностью потерь радиоактивности по 3Н за счет реакции водородного обмена, когда этот реагент или его производное оказываются в сильнокислой среде. Недостатком ДНФБ как радиореагента является и заметное гасящее действие нитрогрупп, которое проявляется при измерении радиоактивности жидкостными сцинтилляционными счетчиками. Эти недостатки приводят к особенно большим затруднениям в анализах методом с двумя изотопами, как, например, метод анализа аминокислот с тритием в качестве сравнительного изотопа и с 14С в качестве индикаторного изотопа. [9]
Страницы: 1