Метод - седиментация
Cтраница 1
Метод седиментации в ультрацентрифуге183 154 широко используется в настоящее время для аналитического разделения смесей полисахаридов, или для контроля их гомогенности ( см. гл. [1]
Метод седиментации используют для получения частиц твердого тела определенной дисперсии. Для этого навеску ( например, 10 г) данного вещества растирают в агатовой ступке и просеивают через сито 150 мет. Хорошие результаты дает в некоторых случаях применение ацетона вместо воды и диспергирующих веществ. [2]
Метод седиментации ( дает величину Mw), см. гл. [3]
Метод седиментации в градиенте плотности CsCl применяют, в частности, для разделения N15 - и М14 - ДНК. Метод седиментации в градиенте плотности позволяет также изучать нуклеотидный состав ДНК из разных источников, поскольку различия в нуклеотидном составе приводят к различиям в плотности. Препараты ДНК, содержащие большое количество пар гуанин - цитозин, обладают более высокой плотностью, чем препараты с высоким содержанием аденина и тимина. Эти работы будут рассмотрены более подробно в разд. Такая полоса может занять всю ячейку. Осаждение белков с помощью сульфата аммония, добавляемого в небольших количествах, позволяет заметно сузить полосы. [4]
Метод седиментации основан на том, что благодаря направленному макроскопическому движению макромолекул в кювете, помещенной в сильное центробежное поле, происходит перераспределение концентрации полимера. Граница раздела непрерывно движется в направлении х дна кюветы со скоростью, равной скорости оседания отдельных макромолекул. [5]
Метод седиментации - диффузии не получил широкого распространения, так как его применение требует специальных экспериментов для определения коэффициента диффузии. Одно время казалось, что применение этого метода целесообразно в тех случаях, когда трудно очистить препарат настолько, насколько это необходимо для равновесного ультрацентрифугирования. Однако при работе с недостаточно чистым препаратом возникает неопределенность - не ясно, какого типа средняя молекулярная масса измеряется методом седиментации - диффузии. Юлландер [5] показал, что этот метод дает значение молекулярной массы, промежуточное между М и Mw и обычно более близкое к Мю. Относительное положение значения этой молекулярной массы на соответствующем графике зависит от характера молекуляр-но-весового распределения. Описанный метод по количеству анализируемого вещества не столь экономичен, как равновесные методы. Его, однако, часто применяют для дополнительной проверки значений молекулярной массы, полученных другими способами. [6]
Методов седиментации и светорассеяния не представляется возможным. Идея нового метода основана на том экспериментальном факте, что подвижность переднего фронта зоны а-химотрипсино-гена при гельфильтрации на сефадексе G-100 по методу фронтальной хроматографии оказалась линейно зависящей от среднего молекулярного веса ассоциированного комплекса. Экстраполяция этой линейной зависимости к бесконечному разбавлению ( малой подвижности) дает возможность вычислить подвижность, а по ней и молекулярный вес мономерного компонента. [7]
Методом седиментации столь малые частицы выделить затруднительно - они испытывают механическое воздействие воды, так как вследствие влияния броуновского движения больше становится траектория падения частиц. В этих условиях для расчета скорости падения частиц формула Стокса не применима. В центрифугах же броуновское движение подавляется вектором центробежной составляющей силы, и оно не сказывается на фракционировке анализируемых частиц. [8]
Методом последовательной седиментации в сочетании с методом электронной микроскопии Хадсону и Винограду [23] удалось показать, что митохондриаль-ная ДНК из клеток HeLa содержит катенановые молекулы. Самый нижний слой в градиенте плотности хлорида цезия содержит около 10 % димеров и 90 % мономеров, тогда как промежуточный слой содержит около 60 % димеров и 40 % мономеров. Из электроно-микрограммы очевидно, что димеры в нижнем слое состоят из замкнутых в виде катенанов мономеров, тогда как димеры промежуточного слоя представляют собой двунитчатую молекулу ДНК, состоящую из одного замкнутого и одного разорванного циклов. [9]
Определен методом седиментации по Арчибальду. [10]
 |
Седиментационные характеристики целых и разрушенных клеток пекарских дрожжей ( 4 % - я суспензия. [11] |
Технологическая простота метода седиментации стимулирует поиски путей его интенсификации. [12]
Разрешающая способность метода дифференциальной седиментации [243, 244 ] столь высока, что заметно различие коэффициентов седиментации в некоторых случаях всего в 0 0005 Св. К сожалению, она достигается лишь в случаях высокомолекулярных и гомогенных биополимеров. [13]
Тонкоразмолотое стекло фракционируют методом седиментации. Отбирают частицы зернением 180 - 220 меш. Стекло размешивают с водой до получения кашицы, наносят на пластинки и дают высохнуть. При нагревании до 850 С в течение 5 мин слой слегла оплавляется и частицы сорбента связываются с поверхностью пластинки. Затем слой обезжиривают раствором детергента, тщательно промывают спиртом и водой, потом погружают в концентрированную серную кислоту и нагревают 30 мин при 100 С. [14]
 |
Типы хроматографических колонок. [15] |
Страницы: 1 2 3 4