Cтраница 1
Метод активированных эфиров основан на предварит, образовании сложноэфирного производного карбоксильной компоненты путем введения в нее спиртового остатка, содержащего сильный электроноакцепторный заместитель. В результате образуется высокореакциоииоспо собнын эфир, легко подвергающийся аминолиэу под действием аминокомпонеиты пептидного синтеза. [1]
При циклизациях методом активированных эфиров имеется опасность аминоли-тического расщепления пептолид-эфирной связи. Как правило, применяют хлоранги-дридный метод, причем сначала незащищенный пептолид переводится обработкой пентахлоридом фосфора [504] или тионилхлоридом [505] в хлораигидрид солянокислого пептолида, а затем, при освобождении аминофункции с помощью третичного основания, проводится реакция замыкания кольца. Выходы циклических пептолидов невелики. Это объясняется конкурирующей реакцией поликонденсации, что, как и при нормальной пептидной циклизации, требует работы в разбавленных растворах. Причиной низких выходов являются также стерические препятствия в виде участвующих в реакции циклизации гидрокси - или аминокислот, а также циклоолигомериза-ция. [2]
Из наиболее употребительных методов надо назвать азидный метод, метод смешанных ангидридов карбоновых и алкилугольных кислот, метод активированных эфиров и, наконец, карбодиимидный метод, который в своей модифицированной форме ( карбодиимид с добавками) наиболее широко используется в синтезах. Именно эти методы подробно обсуждаются ниже. Будут упомянуты еще некоторые методы, имеющие теоретический интерес, а также методы, которые употребляются только в особых случаях. [3]
При проведении реакций с солями аминокислот и пептидов были использованы следующие методы: хлорангидридный, азид-ный, а также метод смешанных ангидридов; в последнее время все чаще применяют метод активированных эфиров. Приведенные ниже примеры демонстрируют ряд возможных вариантов при применении указанных методов. [4]
Полученные таким путем полимеры имеют большие молекулярные веса по сравнению с полимерами, синтезированными другими методами. Этот метод активированного эфира применяют для синтеза полипептидов, содержащих повторяющуюся последовательность аминокислот. Например, дипептид превращают в активированный эфир, который по-лимеризуется. [5]
Для защиты аминогруппы чаще всего применяли бензилоксикарбонильный и тозильный остатки. Создание пептидной связи осуществляли следующими методами: хлорангидридным [515, 634, 806, 938, 1057, 1159, 1160]; методом активированных эфиров, например с помощью цианметиловых [1099, 1246], п-нитрофениловых [265, 272, 273, 469, 891] или фениловых [2274] эфиров; методом смешанных ангидридов [80, 265, 296, 1059, 1113, 1491]; азидным [80, 296, 515, 940, 1059, 1113], тетраэтилпирофосфитным [296, 634, 803, 1802], карбодиимидным [214, 231, 274, 463, 626, 1079, 1132, 1160, 1950], фосфоразо - и изоцианатным [815] методами и, наконец, фосфор-оксихлоридным [1491] и пиразолидным [1815] методами. Основность гидразина может являться причиной элиминирования S-бензильной группы в виде бензилмеркаптана, если гидразино-лиз эфиров пептидов, содержащих остаток S-бензилцистеина, проводить при слишком высокой температуре. [6]
Как известно, большинство аминокислот растворимо в ледяной уксусной кислоте; при этом цвиттер-ионная форма аминокислот в существенной степени разрушается в результате образования комплекса с растворителем. Реакцию конденсации обычно осуществляют методом активированных эфиров с использованием главным образом тиофениловых эфиров. В качестве защитных групп применяют фталильную и карбобензоксигруппы. Реакцию проводят в ледяной уксусной кислоте при повышенной температуре, причем для ее завершения требуется несколько часов. По бочная реакция ацетилирования наблюдается особенно часто при использовании пространственно экранированных аминокислот. В случае дипептидов отмечено образование дикетопипер-азинов. На примере тиофенилового эфира N-защищенного ди-пептида исследована возможность рацемизации; в обычно применяемых условиях рецемизация не обнаружена. [7]
Как известно, большинство аминокислот растворимо в ледяной уксусной кислоте; при этом цвиттер-ионная форма аминокислот в существенной степени разрушается в результате образования комплекса с растворителем. Реакцию конденсации обычно осуществляют методом активированных эфиров с использованием главным образом тиофениловых эфиров. В качестве защитных групп применяют фталильную и карбобензоксигруппы. Реакцию проводят в ледяной уксусной кислоте при повышенной температуре, причем для ее завершения требуется несколько часов. По бочная реакция ацетилирования наблюдается особенно часто при использовании пространственно экранированных аминокислот. В случае дипептидов отмечено образование дикетопипер-азинов. На примере тиофенилового эфира N-защищенного ди-пептида исследована возможность рацемизации; в обычно применяемых условиях рецемизация не обнаружена. [8]
Известные в структурной химии белка способы ферментативного и химического расщепления пептидной цепи и разделение образующихся в результате фрагментов с помощью хроматографическои техники позволяют получать гомогенные пептидные блоки. Зашитные группы при полусинтезе выбираются таким образом, чтобы их введение сохраняло способность производных растворяться в водных и водно-органических растворах. При сборке нужной последовательности из подготовленных пептидных блоков чаще всего используются такие методы, как DCC / HOBt, DCC / HOSu, а также азидный метод и метод активированных эфиров. Особое внимание уделяется при этом проблеме рацемизации. [9]
В отличие от эфиров других аминокислот в этом случае свободный аминоэфир при обработке триэтиламином в тетрагидрофуране или диметилформ-амиде выделяется из дихлоргидрата не полностью. Для синтеза пептидов применяли азидный [201, 724, 1538, 1950, 1951, 2119], хлорангидридный [636, 1082, 1083] и карбодиимид-ный [1459, 1535, 1655, 1950] методы. Пептидный синтез методом смешанных ангидридов [1950, 1951, 2298] и методом активированных эфиров ( п-нитрофениловые [1951] и цианметиловые [1950] эфиры) осуществлялся значительно реже. Карбобензоксигруппу всегда удаляют каталитическим гидрогенолизом. [10]
В отличие от эфиров других аминокислот в этом случае свободный аминоэфир при обработке триэтиламином в тетрагидрофуране или диметилформ-амиде выделяется из дихлоргидрата не полностью. Для синтеза пептидов применяли азидный [201, 724, 1538, 1950, 1951, 2119], хлорангидридный [636, 1082, 1083] и карбодиимид-ный [1459, 1535, 1655, 1950] методы. Пептидный синтез методом смешанных ангидридов [1950, 1951, 2298] и методом активированных эфиров ( л-нитрофениловые [1951] и цианметиловые [1950] эфиры) осуществлялся значительно реже. Карбобензоксигруппу всегда удаляют каталитическим гидрогенолизом. [11]