Метод - гашение - флуоресценция
Cтраница 1
Метод гашения флуоресценции основан на поглощении анализируемыми веществами внешнего излучения, что приводит к гашению флуоресценции введенного в сорбент индикатора в местах локализации определяемых соединений. [1]
Метод гашения флуоресценции, основанный на том, что анализируемые вещества препятствуют в местах их локализации возникновению флуоресценции индикатора, введенного в слой сорбента, в ряде случаев дает неудовлетворительные результаты детектирования. Флуоресцирующий слой сорбента создает дополнительные оптические помехи, что и обусловливает увеличение предела определения и уменьшение точности анализа. В этом методе интенсивность флуоресценции может сильно изменяться во времени, что требует дополнительной калибровки, которую в этом методе сложно провести. В большинстве случаев сигнал детектора, получаемый при гашении флуоресценции, является нелинейной функцией от количества вещества в зоне. Двухлучевое сканирование практически неприменимо в этом методе. [2]
 |
Хроматограмма различных фракций и подфракций загрязнений воздуха. Обозначения цветов. [3] |
Полициклические ароматические углеводороды можно отличить от азааренов, используя метод гашения флуоресценции [18, 19] ( см. разд. [4]
Что касается универсальности, то метод флуори-метрии не столь безнадежен, если учитывать флуоресцентные реагенты и метод гашения флуоресценции. [5]
Метод гашения флуоресценции позволяет определять только вещества с максимумом поглощения выше 240 нм, так как максимум возбуждения обычно используемого флуоресцентного индикатора находится около 280 нм. Сравнивая эти методы, можно сказать, что наилучшие результаты дает количественное детектирование по отражению по сравнению с пропусканием и гашением флуоресценции. Наиболее эффективным методом количественного анализа является измерение интенсивности флуоресценции веществ в слое сорбента. Это - высокоселективный, высокочувствительный ( особенно при использовании лазерных флуоресцентных детекторов) метод анализа с широким интервалом линейной зависимости количество вещества - интенсивность флуоресценции, не зависящий от формы зоны. Широкие возможности метода флуоресцентного детектирования в ТСХ связаны с возможностями дериватиза-ции веществ до или после ТСХ с превращением их в флуоресцирующие производные или инициированием флуоресценции разделенных веществ электрохимическими или химическими методами. [6]
Одним из основных параметров детектирования является предел определения, который находят как соотношение полезного сигнала детектора и помех. Однолучевое сканирование и метод гашения флуоресценции характеризуются слишком высоким пределом определения, который практически не зависит от изменения площади анализируемых зон, в связи с чем целесообразно остановиться только на двухлучевой денситометрии и флуоресцентном методе. [7]
Непосредственное количественное определение на пластинках пятен флуоресцирующих соединений может проводиться как методом измерения флуоресценции, так и методом гашения флуоресценции, основанным на гашении флуоресценции вещества, предварительно нанесенного на сорбционный слой. [8]
Принципиальным преимуществом флуоресцентных методов является низкий уровень шума. На практике большинство сорбентов флуоресцирует в той пли иной степени, однако связанные с этим помехи ниже оптического шума, возникающего при измерении величины пропускания и отражения. Это делает флуоресцентные ( все выше сказанное не распространяется на метод гашения флуоресценции) методы более перспективными, чем фотометрические, в связи с их простотой и отсутствием сложного оборудования. [9]
Для количественного детектирования применяют четыре разновидности оптического анализа. Денситометри-ческие методы измерения отраженного и прошедшего излучения оперируют с длиной волны исходного излучения. Флуоресцентные методы измеряют излучение с длиной волны, отличной от исходного излучения. Поскольку метод гашения флуоресценции не удовлетворяет многим требованиям количественного детектирования, то его целесообразно исключить из рассмотрения. [10]
Страницы: 1