Метод - гель-хроматография
Cтраница 1
Метод гель-хроматографии был предложен Флодином и Поратом в 1959 г. Разделение смесей этим методом основано на способности гелей некоторых природных веществ и гелей отдельных синтетических продуктов ( сефадексы, молсе-лекты и др.) с контролируемой пористостью сортировать и разделять вещества в соответствии с размерами и формой их молекул. При разделении веществ этим методом неподвижной фазой служит гель, состоящий из пространственной сетки, образованной мицеллами коллоида, и жидкости, которая связана с этой сеткой. [1]
 |
Схема разделения смеси двух веществ разной молекулярной массы в гель-хроматографии. [2] |
Метод гель-хроматографии выполняется в двух вариантах: колоночном и в тонком слое. [3]
Метод гель-хроматографии, описание которого будет дано ниже, также может быть использован для препаративного фракционирования, однако в этом случае необходимо наличие больших объемов растворителя. [4]
Метод гель-хроматографии действительно очень прост в осуществлении и требует незначительных затрат; однако не следует делать поспешные выводы на основании нестрого проведенного эксперимента. [5]
 |
Результаты фракционирования привитого гетерополимера II. [6] |
Методом гель-хроматографии было установлено, что время удерживания отдельных фракций привитого ге-терополимера во всех случаях превосходило время удерживания фракций линейного полимера такого же молекулярного веса. Эта особенность разветвленных привитых сополимеров была уже обсуждена ранее [6] и было показано, что время удерживания разветвленных молекул определяется гидродинамическим объемом макро молекул в растворе. Этот факт подтверждается анализом зависимости log [ r ] [ M ] от объема элюируемой фракции. Экспериментальные данные, полученные при исследовании привитых гетерополимеров методом гель-хроматографии, представленные в виде зависимости log MM ] - объем, полностью совпали с предварительно построенными соответствующими калибровочными кривыми для полимеров молекулярного веса того же порядка, что и у исследуемых сополимеров. [7]
Методом гель-хроматографии проводят два типа разделения: групповое разделение и фракционирование. [8]
Методом гель-хроматографии в принципе можно фракционировать такие олигомерные соединения, которые в силу низкой летучести не удается анализировать методом газовой хроматографии. Члены гомологических рядов олигомеров часто так незначительно различаются по химическим свойствам, что их бывает трудно разделить методом ЖЖХ. Тем не менее за последние три года интерес к гель-хроматографии олигомеров постоянно растет. [9]
Разделение методом гель-хроматографии можно проводить с помощью простых технических средств, хотя в некоторых случаях требуется более сложное оборудование. Для разделения методом гель-хроматографии, как и для разделения другими методами жидкостной колоночной хроматографии, необходимы колонка, приспособление для регулирования скорости потока и сборник фракций. Чтобы ускорить и облегчить оценку результатов разделения, применяют соответствующие контрольно-регулирующие приборы. [10]
Разделение смеси веществ методом гель-хроматографии возможно и тогда, когда молекулярные массы анализируемых веществ очень близки или даже равны. В этом случае используется взаимодействие растворенных веществ с гелем. Это взаимодействие может оказаться столь значительным, что сводит на нет различия в размерах молекул. Если природа взаимодействия с гелем для разных веществ неодинакова, это различие можно использовать для разделения интересующей смеси. [11]
Тот факт, что метод гель-хроматографии позволяет сравнительно простым путем довольно точно устанавливать молекулярный вес белков, вовсе не означает, что в будущем ультрацентрифугирование как аналитический метод потеряет свое значение. С помощью этих двух методов можно проводить независимые измерения и, сопоставляя полученные результаты, получить более полное представление о строении белка. [12]
В чем заключаются особенности метода гель-хроматографии. [13]
При фракционировании исследуемого блок-сополимера методом гель-хроматографии было установлено, что как растворение блок-сополимера, так и термообработка его растворов не вызывают изменений молекулярного веса, хотя термообработка раствора приводит к уменьшению характеристической вязкости. [14]
Однако разделение смеси веществ методом гель-хроматографии возможно и в том случае, когда молекулы компонентов разделяемой смеси обладают небольшим различием в размерах и, следовательно, в молекулярных массах. Тогда следует подбирать гель с такими размерами пор, чтобы они были доступны для всех молекул веществ смеси. Очевидно, что при прочих равных условиях разделение в этом случае становится более полным при достаточно больших длинах колонок. Можно использовать гели, поры которых не доступны молекулам лишь одного вещества, а для остальных веществ они проницаемы, но в разной степени. [15]
Страницы: 1 2 3