Метода - седиментация
Cтраница 3
С помощью ультрацентрифуги возможны два вида измерений. Первое - определение седиментационпого равновесия аналогично разработанному Перреном методу седиментации под действием силы тяжести. Для достижения равновесия между диффузионными и седиментацпонными силами требуется несколько дней. Представим себе, что пробирка с поперечным сечением, равным единице, вращающаяся с угловой скоростью со радиан в секунду, содержит раствор, концентрация которого на расстоянии х от центра вращения равна с г растворенного вещества в 1 мл. [31]
Ситовый анализ дает удовлетворительные результаты лишь для фракций крупностью более 60 мкм. Для фракций менее 60 мкм гранулометрический состав определяется методами седиментации и центрифугирования. Эти методы основаны на различной скорости осаждения частиц разной крупности. Крупность самых мелких частиц ( менее 5 мкм) определяется микроскопическим методом. В этом диапазоне крупностей размер частиц иногда определяется косвенным путем - определением удельной поверхности порошка. [32]
Термин суммарная масса фракций означает общую массу всех молекул со степенью полимеризации от 0 до Р включительно. Степень полимеризации каждой фракции вычислена на основании измерений вязкости раствора методами седиментации, диффузии и светорассеяния. [34]
Седиментометрия ( гравитационная и центробежная) имеет много разновидностей. Она может осуществляться в жидкой и газовой среде; более распространены методы седиментации в жидкой среде. [35]
В первом случае тонко измельченные порошки катализатора и оптически чистого КВг предварительно просеянного через сито 250 - 300 меш и высушенного при 120 - 130 С в течение 48 ч прессуются под большим давлением ( до 10 t / oir) в прозрачные диски. Для одной пластинки диаметром 20 мм необходимо ориентировочно 150 - 300 мт КЗг и 1 - 5 мг катализатора. Последний мсжет быть приготовлен по методу седиментации. [36]
Механический состав пород определяют ситовым и седимента-ционным анализом. Ситовой анализ сыпучих горных пород применяется для рассева фракций песка размером от 0 05 мм и более. Содержание частиц меньшего размера определяется методами седиментации. В лабораторных условиях обычно пользуются набором проволочных или шелковых сит с размерами отверстий ( размер стороны квадратного отверстия) 0 053; 0 074; 0 105; 0 149; 0 210; 0 227; 0 42; 0 59; 0 84; 1 69 и 3 36 мм. Существуют и другие системы сит и всевозможных механических приспособлений для рассева. Сита располагают при рассеве таким образом, чтобы вверху было сито с наиболее крупными размерами отверстий. В него насыпают 50 г породы и просеивают ее в течение 15 мин. После этого оставшуюся на каждом сите породу взвешивают и результаты записывают в таблицу. [37]
Существует косвенный метод подсчета вирусных частиц в образце, который позволяет определить массу каждой частицы. Этот подход особенно полезен в том случае, когда нет строгого соответствия между числом частиц и их способностью образовывать бляшки. Молекулярный вес вирусных частиц определяют методами седиментации - диффузии и светорассеяния. Умножив его на процентное содержание ДНК в вирусной частице, получают молекулярный вес ДНК. [38]
Механический состав пород определяют ситовым и седимен-тационным анализами. Ситовый анализ сыпучих горных пород применяется для разделения песка на фракции от 0 05 мм и более. Содержание частиц меньшей крупности определяется методами седиментации. В лабораторных условиях обычно пользуются набором штампованных проволочных или шелковых сит. Штампованные сита, применяемые в СССР, имеют отверстия 10; 7; 5; 3; 2; 1; 0 5 и 0 25 мм. Существуют различные системы сит и всевозможных механических приспособлений для разделения породы на фракции. В наборе вверху располагают сито с наиболее крупными размерами отверстий. В это сито насыпают 50 г породы, которую просеивают в течение 15 мин. Затем оставшиеся на каждом сите частички породы взвешивают и результаты записывают в таблицу. [39]
Мы видим, что диффузия служит одним из определяющих факторов в седиментационных процессах. В методе, основанном на измерении скорости седиментации, необходимы прямые определения коэффициента диффузии D. Диффузия создает возможность определения М в методе седиментации в градиенте плотности. Вместе с тем изучение диффузии дает информацию о подвижности макромолекул и, тем самым, об их геометрических и гидродинамических свойствах. [40]
Вискозиметрический метод находит очень широкое применение, о чем можно судить, просматривая разного рода научные публикации, посвященные исследованию синтетических полимеров, очищенных полисахаридов, нуклеиновых кислот, белков и полипептидов. Этот метод особенно эффективен при определении мол. Решающими преимуществами вискозиметрии по сравнению с методами седиментации являются ее простота и дешевизна аппаратуры. [41]
Мы привели нарочито грубый пример с целью отчетливо показать, что неконкурентное поведение могут вызвать причины, не имеющие отношения к равновесному состоянию системы, даже если имеет место активация фермента или действует модификатор столь малого размера, как гидроний-ион. Именно потому, что на практике можно встретиться с более тонкими конформационными изменениями фермента, сначала нужно попытаться выяснить, не обусловлено ли неконкурентное поведение изменениями физических свойств белка, и лишь в случае отрицательного ответа можно приписать его наличию равновесия. Например, в упомянутом выше случае аскорбатоксидазы при анализе активирующего влияния хлорида были использованы методы седиментации, гель-фильтрации и спект-рофлуориметрии. При этом ни дезагрегации, ни конфор-мационных изменений фермента обнаружено не было, что дало основание допустить возможность приближенного равенства Кт и / G для аскорбата. [42]
Страницы: 1 2 3