Cтраница 1
Серологические методы имеют большое практическое значение для выявления инвазии на ранних этапах развития, до достижения гельминтом половой зрелости и начала откладывания яиц, а также при эпидемиологическом обследовании в эндемических очагах. Ограничение в использовании серологических реакций для диагностики гельминтозов связано со сложностью получения очищенных антигенов многих гельминтов. В большинстве случаев антигены, применяемые для серологической диагностики, представляют собой неочищенные и неохарактеризованные препараты ( дезинтегрированные целые организмы или их экстракты), что обусловливает многочисленные перекрестные реакции. [1]
Для обнаружения энтеротоксина Cl, perfringens широко применяются серологические методы, основанные на взаимодействии токсина с гомологичными антителами, такие, как реакция пассивной гемагглюти-нации и реакция диффузионной преципитации и иммуноэлектрофорез. [2]
Различия в составе белков споры и вегетативной клетки выявляются серологическими методами. По антигенной структуре спорули-рующая и аспорогенная формы культур одного и того же вида различны. Не установлено существование какого-либо антигена, общего для спор бактерий разных видов. Наоборот, по антигенной структуре имеется достаточно отчетливая дифференциация между спорами разных видов. [3]
В связи с тем что трахома является локальной инфекцией, серологические методы диагностики имеют второстепенное значение. [4]
В случае летального исхода из кусочков различных органов приготовляют гомогенат, который вводят парентерально лабораторным животным для дальнейшего выделения и идентификации вируса; 2) серологические методы: реакция торможения гемагглютинации ( РТГА), реакция связывания комплемента ( РСК), РСК на холоду, реакция нейтрализации антител ( РНА), реакция гель-преципитации, реакция иммунофлюоресценции ( РИФ), реакция флюоресцирующих антител ( РФА) с парными ( повторно через 5 - 7 дней) сыворотками крови. [5]
Это далеко не всегда удается, и тогда приходится прибегать к другим диагностическим приемам, имеющим в отдельности относительную доказательную силу. Сюда относятся следующие основные приемы: 1) детальный личный и семейный анамнез, который большею частью трудно или невозможно собрать у детей; 2) применение скарификаций, накожных или внутри-кожных тестов при помощи растворимых аллергенов различной концентрации из имеющегося набора их для установления специфического аллергена; 3) в более редких случаях производится офтальмореакция с растворами аллергенов ( наподобие туберкулиновой офтальмореакции Кальметта); 4) метод Праусниц - Кюстнера, заключающийся в интрадермальном введении здоровому человеку сыворотки крови предполагаемого аллергика с последующим введением в то же место кожи предполагаемого аллергена с целью вызвать воспалительную реакцию антитело - аллерген; 5) определение изменений крови ( лейкопения, титр комплемента) и использование серологических реакций, возникших под влиянием воздействия аллергена ( серологические методы не нашли распространения в клинической практике); 6) установление местной эозинофилии в отделяемом глаза - очень важный, но не всегда имеющийся симптом; 7) установление наличия фолликулярного катара конъюнктивы, характерного для аллергических ее заболеваний; 8) диагностика ex juvantibus при лечении противоаллергическими средствами. [6]
Материалом для исследования при натуральной оспе является соскоб макул и папул, содержимое везикул и пустул, корочки оспенных пустул, слюна, смыв со слизистой оболочки носовой части глотки. Кровь исследуют вирусологическими и серологическими методами, начиная с последних дней инкубационного или продромального периодов до стадии истинных высыпаний включительно, затем проводят только серодиагностику. [7]
Кроме классического выделения культуры, можно применять укороченные методы диагностики, которые являются ориентировочными. К ним относятся: 1) исследование нативного мазка; 2) метод макроагглютинацин со специфической противохолерной О-сывороткой при доращивании нативного материала на пептонной воде; 3) иммунофлюоресцентная диагностика. Определенное значение имеют серологические методы исследования: обнаружение антител в сыворотке крови больных или носителей ( РА), выделение антигена в испражнениях методом РПГА с эритроцитарпым диагностикумом, сенсибилизированным антителами иммунной холерной сыворотки. [8]
Приобретенный иммунитет может представлять собой более сложное явление, чем первоначально предполагали; это было показано работами Бриггса [249] и Стефенса [1962], которые поставили под сомнение существование некоторых антител у насекомых. Работая с 11 видами бабочек, Бриггс использовал в качестве антигенов для инъекции или скармливания насекомым живые и ослабленные бактерии ( патогенные и непатогенные) и растворы яичного белка. Ему не удалось обнаружить природные или приобретенные иммунные свойства гемолимфы такими серологическими методами, как реакции агглютинации, преципитации и связывания комплемента. Он установил, однако, что в сыворотке вакцинированных насекомых содержится крайне термостабильное бактерицидное начало, которое можно демонстрировать in vitro. Это специфическое бактерицидное начало сохраняется - на протяжении всей жизни гусеницы, оно устойчиво к кислотам и щелочам, но переходит в форму суспензии под действием пепсина. Эта иммунологическая реакция появляется только при инъекции, но не при скармливании антигена. Термостабильность искусственно приобретенного бактерицидного начала отличает его от антител позвоночных. [9]
В стационарной фазе число микроорганизмов в культуре остается постоянным, хотя некоторые особи продолжают делиться. Наступает своеобразное равновесие между делением и отмиранием. Marchant [88] серологическими методами, она состоит из тех же фракций, что и в предыдущих фазах роста. [10]
В тех случаях, когда в анализируемом материале встречаются кристаллики белка, которые сопутствуют метаморфозу насекомых ( главным образом перед окукливанием и при окукливании), необходимо прежде всего помнить, что такие кристаллики в отличие от полиэдров находятся вне ядра клетки хозяина. Мазки и срезы, окрашенные по Гимза без предварительной обработки, сохраняют негативное отображение полиэдров в окружающей их окрашенной гемолимфе. Обработка материала 1 % - ным NaOH, 2 % - ным Na2CO3 или 1 % - ной НС1 позволит видеть в середине полиэдров мелкие тельца, которые после промывки водой окрашивают по Гимза виолет-красной. Подобные тельца ( гранулы) отсутствуют в белковых включениях, имеющих характер запасных веществ. В тени полиэдров ( под микроскопом) видна светлая зона, светящаяся так же равномерно, как и внутренняя. В связи с тем, что разница в размерах палочек разных видов вирусов незначительна, диагноз необходимо составить по всем признакам вирусных палочек, полиэдров и по наблюдениям за ходом болезни. Правило Коха о том, чтобы вид возбудителя был подтвержден восприимчивостью к нему исследуемого хозяина в случаях с полиэдрическими болезнями насекомых, может быть выполнено далеко не всегда. Пероральное заражение бывает успешным лишь для небольшого числа штаммов. Более пригодны в диагнозе серологические методы, применяемые Кривенчик и Бергольдом. [11]