Cтраница 3
Это предполагает, что фенилаланин может перейти в С6 - С2 - соединение, которое затем карбоксилируется но углеродному атому, соседнему с кольцом. Действительно, Андерхилл и Янгкен [113] показали, что меченная по карбоксильной группе фенилуксусная кислота - хороший предшественник. В карбоксильной группе метка не найдена; предполагают, что она находится в карбинольной группе. Была выдвинута следующая гипотетическая схема образования троповой кислоты: фенилуксусная кислота - фенил-ацетил - КоА - фенилмалонил - КоА - троповая кислота. Принято, что фенилаланин образует фенилацетил - КоА через фенилпируват. Все эти реакции имеют тесную биохимическую аналогию с окислением пирувата и образованием малонил - КоА при синтезе жирных кислот. Если это объяснение правильно, то радиоактивная двуокись углерода должна специфично метить карбоксильную группу. Лит и Лауден [114] вводили бикарбонат - С14 в стебли растений Datura через ватный тампон и обнаружили, что атомы углерода карбоксильной и карбинольной групп троповой кислоты метятся одинаково. Еще раньше было установлено ( Гудив и Рамшад [115]), что троповую кислоту, почти полностью меченную по карбоксильной группе, можно получить при подкормке растений [ р - С14 ] - триптофаном. При этом было постулировано образование троповой кислоты путем отщепления двух концевых углеродных атомов и элиминирования азота индола. Троповая кислота может, по-видимому - синтезироваться несколькими путями, так как иначе очень трудно объяснить все эти данные. Образование карбоксильной группы путем С6 - С2 Q не ясно. Работы Лита и Лаудена [112] и Андерхилла и Янгкена [113] исключают формиат, метальную группу метионина, формальдегид и серии как источник карбоксильной группы Q. Лит и Лауден предполагают [114], что здесь может иметь место реакция транскарбоксилирования. Действительно, меченный по карбоксильной группе фенилаланин, введенный путем подкормки в. [31]
Одновременно в пласт вводилась и оттеснялась от забоя вода, меченная окисью трития. [32]
Наблюдалось, что хлористый натрий, меченный изотопом ( Na24 ti / 2 14 8 час. После внутривенного введения уровень Na24Cl в крови становился постоянным приблизительно в 15 мин. Хевеши, Хан и Реббе нашли, что когда плазма, меченная радиоактивным хлористым натрием, инъецировалась нормальному кролику, то постоянный уровень достигался в 3 мин. Этих результатов следовало ожидать, потому что во внеклеточной жидкости натрий находится в ионной форме. [33]
Очень часто важно выяснить, синтезируются ли два вида РНК на одном и том же участке ДНК или на разных ее участках. РНК сказывается на степени гибридизации другого вида. Если оба вида РНК синтезируются на одном и том же участке ДНК, то конкурирующая РНК ( обычно не меченная) будет занимать на ДНК место, которое обычно занимает вторая ( как правило, меченая) РНК. Мы исходим здесь из того, что РНК, синтезированные на одном и том же участке ДНК, имеют одинаковую нуклеотидную последовательность. [34]
Улучшение характеристик противоточной системы с помощью принципа механического торможения изучалось автором совместно с сотрудниками не только при каскадно расположенных вставках, рассмотренных выше. Источником излучения являлась частица алюмосиликата dT 4 35 мм, меченная Со60 активностью 0 5 мг-экв. Для проверки методики вначале были проведены опыты по определению времени свободного падения одиночной меченой частицы, которое сопоставлялось с теоретически рассчитанной величиной. [35]
Сахаров, может быть успешно сделано при использовании J-маннозы, меченной только в положении Сх. Вообще много специфически меченных Сахаров теперь доступно для использования в этой методике. Раствор меченной С сйианпозы ( 30 мл) с удельной активностью 3 65 лшкюри / ммоль был облучен при мощности дозы 1 07 - 1017 эв / мл-мин до доз в интервале от 1 0 - 1020 до 7 1 - 102 эв / мл. Меченная CJ4 арабиноза была также определена, но выделенный дифе-нилгидразон оказался неактивным, что указывает на образование меченного CJ4 формальдегида и неактивной арабпнозы при разрыве связи Ct-С. Образование активных двууглеродных осколков также указывает на разрыв связи С2 - С3 с образованием эритрозы и глиоксаля. Образование меченных CJ4 двууглеродных альдегидных осколков происходит с меньшей скоростью, чем образование общего числа двууглеродных осколков из меченных обычным образом соединений. Следовательно, прямой разрыв кольца с образованием трех двууглеродных осколков происходит одновременно с разрывом связи С2 - С3, приводящим к образованию эритрозы и глиоксаля. [36]
При делении клеток генетический материал удваивается, происходит редупликация двойной спирали ДНК. В принципе возможны три механизма редупликации: консервативный с сохранением исходной двойной спирали и построением дочерней двойной спирали, тождественной исходной; полуконсервативный, при котором две дочерних двойных спирали содержат каждая по одной новой и по одной старой цепи; и, наконец, дисперсный механизм с распределением исходного материала между четырьмя цепями двух дочерних двойных спиралей. Из исходной популяции, из популяций детей и внуков извлекались молекулы ДНК и определялись их плоть ность и радиоактивность. Исходная ДНК, меченная 15N, имела наибольшую плотность, ДНК детей оказалась меченной наполовину и ее плотность равнялась среднему арифметическому плотностей 151Ч - ДНК и N-ДНК. [37]
Меченые органические соединения обычно не получают непосредственным облучением нейтронами исходных органических соединений. Действительно, ядерные реакции, приводящие к образованию органических молекул, меченных тритием или углеродом 14С, во многих случаях нельзя осуществить облучением соответствующих молекул нейтронами, так как реакции 6Li ( n, а) Т и 14N ( n, р) 14С протекают с изменением заряда облучаемых ядер. IV, § 3) ограничена возможность получения органических соединений, меченных радиоактивными изотопами серы, фосфора, галогенов посредством ядерных реакций, идущих без изменения заряда ядра. По этим причинам в качестве исходных материалов при синтезе органических соединений в атомной промышленности используют вещества сравнительно простого состава, такие, как газообразный тритий, тритиевая вода Т2О, алюмогидрид лития LiAlT4, Ва14СО3, 14CO2, K14CN, 14CNNH2, Ba14C2, элементарная сера, меченная 35S, серная кислота H235SC4 и др. Хотя в настоящее время промышленностью поставляется большое количество различных меченых органических соединений, иногда исследователю приходится самому синтезировать нужное меченое соединение. [38]
Первая часть этой задачи решается с помощью процессов гидролиза, происходящих под влиянием энзимов или сильных щелочей и кислот. Вторая часть этой задачи - анализ образующихся весьма сложных смесей аминокислот - сопряжена с более серьезными трудностями. Обычные методы анализа подобных смесей, связанные с необходимостью количественного выделения всех компонентов смеси, очень трудоемки и приводят к большим погрешностям. Этим объясняются сильные расхождения - в несколько десятков процентов, - при анализе аминокислотного состава различных белков. Метод изотопного разбавления позволяет достигать точности до нескольких десятых долей процента. В этом случае к гидролизату добавляется одна из входящих в его состав аминокислот, меченная углеродом-14. После этого из раствора осаждается некоторое количество определяемой аминокислоты и проводится тщательная очистка ее от примесей. [39]
Альдопиранозы и альдофуранозы, все гидроксильные группы которых ( за исключением группы при С-1 и С-4 или С-5, участвующих в образовании полуацетального цикла) защищены бензильными группировками, легко получить бензилированием и последующим гидролизом альдозидов. Подобные бензилированные альдозы при обработке боргидридом натрия или алю-могидридом лития гладко восстанавливаются в1 соответствующие частично бензилированные альдиты. Так, из 2 3 5-три - О-бензил-о - араби-нофуранозы образуется 2 3 5-три - О-бензил-о - арабинит, а из 2 3 4 6-тет-ра - О-бензил-а - о-глюкопиранозы - 2 3 4 6-тетра - О-бензил-о - глюцит. Если затем селективно защитить первичную гидроксильную группу, лишь вторичная гидроксильная группа останется доступной для окислителя. После проведения окисления защитные группировки удаляют и получают кетозу, у которой кетогруппа находится при атоме углерода, соответствующем С-4 или С-5 исходной альдозы. Следует отметить, что из бензилированных гексофураноз образуются 3-гексулозы. Кроме того, если восстановление проводить бортритидом натрия или алюмотрити-дом лития, образуется кетоза, меченная по терминальному углеродному атому ( см. гл. В рассмотренном ниже синтезе для защиты первичной гидроксильной группы используется тритильная группа, однако, кроме нее, могут с успехом применяться и некоторые другие группировки. Если же такая группа не затрагивается при гидрогенолизе и устойчива к действию слабых кислот, продуктом синтеза будет кетоза с заместителем при терминальном атоме углерода. [40]