Cтраница 1
Нейраминидаза - мукополисахарид - М - ацетилнейраминилгидро-лаза является ферментом, избирательно отщепляющим от различных гликопротеинов, гликолипидов и олигосахаридов сиаловые кислоты ( N-ацетилнейраминовая кислота), находящиеся в терминальном положении и связанные с углеводным компонентом глюкозид-ной связью. [1]
Нейраминидаза - фермент, отщепляющий остатки сиало-вых кислот от гликопротеидов, гликолипидов и олигосахари-дов. Обычно такому воздействию подвергаются остатки сиало-вых кислот, локализованные в терминальных положениях молекул. В результате снимается сиаловое покрытие с поверхностных структур клеток хозяина. [2]
Впервые нейраминидаза обнаружена у вируса гриппа, а позднее у других миксовирусов, таких, как вирус классической чумы, кори. [3]
При изучении нейраминидазной активности источником вирусной нейраминидазы служил вирус гриппа А / штамм PR / 8 / 34, полученный с помощью дифференциального центрифугирования из аллантоисной жидкости зараженных вирусом гриппа куриных эмбрионов и очищенный в градиенте 20 - 60 % сахарозы. [4]
N-Ацетилгалактозамин может быть отщеплен от гли-шпептидов, полученных деструкцией сиаломуцинов нейраминидазой и трипсином, действием М - ацет. [5]
Ингибирование связывания ТТХ протеазой может быть ускорено при обработке мембраны сначала фосфолипазой, а затем нейраминидазой. Очевидно, ТТХ-связывающий компонент встроен в липидную мембрану и окружен углеводами. [6]
Сиало вые кислоты, входящие в состав гликопротеинов, защищают их от действия протеолитических ферментов, поэтому необходимо предварительно отщепить их нейраминидазой. После удаления сиаловых кислот гликопротеины частично расщепляются протеолитическими ферментами ( папаин, проназа) на глнкопептиды, доступные для дальнейшего исследования. Гликопептиды затем обрабатывают ферментами, отщепляющими аминокислоты ( например, карбоксипештидазой после защиты конечной аминогруппы), и превращают в олигосахариды, содержащие только одну аминокислоту. Углеводные компоненты гликопротеинов, имеющих щелочелабильную связь углевод-аминокислота, отщепляют щелочной обработкой или ферментами, разрушающими связи такого типа. Полученные таким образом тетеросахариды или гете-росахариды с одной аминокислотой очищают от примесей пептидов и аминокислот переосаждением из водноорганических смесей ( вода - спирт, вода-ацетон), экстракцией фенолом, хроматографией, электрофорезом или гель-фильтрацией. [7]
При изучении влияния гипорамина и его основных компонентов на нейраминидаз-ную активность вируса гриппа A / PR / 8 / 34 в первой серии экспериментов установлено, что гипорамин в концентрации 10 мкг / мл практически не оказывал никакого действия на активность вирусной нейраминидазы. [8]
Они обнаружены в нервных узлах ( ганглиях) человека и животных, где, возможно, входят в состав лабильных биополимеров. При действии на ганглиозид I нейраминидазы холерного вибриона отщепляется нейраминовая кислота и образуется десиалоганглиозид I. Таким образом, ганглиозид I является аналогом цереброзида, содержащим вместо одного остатка галактозы олигосахаридную цепь. [9]
Выделен из Glycine max. Оказывает митогенное действие на лимфоциты, обработанные нейраминидазой. [10]
Лектин из улиток, специфичный к остаткам N-ацетил - О-галактозамина. Связывается с Т - лимфоцитами, обработанными нейраминидазой, но не с В-клетками, обработанными таким же образом. Специфичен к человеческим эритроцитам группы А. [11]
Такие белки в составе определенных образований ( фибрилл, фимбрий и др.) или без них располагаются на поверхности возбудителя и выступают в качестве лигандов. Процесс такого лектиноподобного взаимодействия усиливается после разрушения нейраминидазой сиалового покрытия эукариотиче-ских клеток хозяина. [12]
Папаин и трипсин, а также фосфолипаза А оказывали несколько меньшее действие на процесс связывания. На основании этих данных, а также того, что нейраминидаза уменьшает сродство рецепторов к диазепаму, сделано заключение, что участки связывания препарата включают белки, фосфолипиды и N-ацетилнейраминовую кислоту. [13]
Ферментативное десиалирование таких субстратов, где сиаловые кислоты занимают терминальное положение в полимере, приводит к изменению их свойств, сопровождается нарушением основных функций. Нейраминидаза, воздействуя на эритроциты, отщепляет от поверхностно расположенных гликопротеинов от 20 до 60 % сиаловых кислот, меняется при этом скорость миграция эритроцитов. При действии нейраминидазы тканей и тканевых культур нарушается межклеточное взаимодействие. [14]
Сейчас известен целый ряд микроорганизмов, продуцирующих нейраминидазу. Этот фермент обнаружен также в тканях животных: куриных эмбрионах, почках, печени, селезенке, мозге крыс и морских свинок и в слюне человека. Богаты нейраминидазой некоторые мембраны, митохондрии и лизосомы. [15]