Нидервизер

Cтраница 1

Нидервизер [1] обобщил работы по ТСХ аминокислот и их производных, а Патаки [2] опубликовал книгу, посвященную методике разделения аминокислот и пептидов. [1]

Основное оборудование для тонкослойной хроматографии. Цифры относятся к отдельным деталям, перечисленным в тексте. [2]

БН-камера по Бреннеру и Нидервизеру для пластинок размером 20 X X 20 см, состоящая из лотков из стали марки V2A, покровной пластинки и зажимов. [3]

Полизональной хроматографии посвящен ряд работ, в том числе обзорная статья Нидервизера [31], где термин полизональная хроматография рассматривается как эквивалентный понятию градиентной ТСХ. [4]

Хроматографичес-кая элюция материала из пятна. [5]

ТСХ модифицированных ароматическими заместителями аминокислот в последние годы предпочитают вести на пластинках с полиамидным покрытием, поэтому из обзора Нидервизера процитируем только методы фракционирования немодифицированных аминокислот. Разумеется, ни по чувствительности и воспроизводимости результатов, ни тем более по точности количественных определений ТСХ аминокислот не может конкурировать с современными аминокислотными анализаторами. Однако существует немало ситуаций, когда возможности ТСХ оказываются вполне адекватными поставленной задаче: определение аминокислотного состава, сопоставление родственных полипептидов, выявление генетических различий, проявляющихся в замене каких-либо аминокислот, клинические анализы физиологических жидкостей и др. На рис. 160 показана приведенная в цитируемом обзоре картина распределения пятен после двумерной ТСХ модельной смеси аминокислот на пластинках с си-ликагелевым покрытием. [6]

При использовании активного твердого носителя и многокомпонентного элюента последний при движении на пластинке будет разделяться на отдельные зоны по законам фронтальной хроматографии. Этот метод был назван Бреннером и Нидервизером [12, 13] полизональной ТСХ. [7]

Многокомпонентный элюент при движении по пластинке с активным сорбентом разделяется на отдельные зоны по законам фронтальной хроматографии. Такая разновидность тонкослойной хроматографии была названа Бреннером и Нидервизером [15] полизональной ТСХ. Вполне понятно, что для разделения веществ, сильно различающихся по адсорбционным характеристикам, необходимо использовать сильные градиенты и полизональную ТСХ, для разделения близких по свойствам веществ следует применять слабые градиентные поля. [8]

Для проведения проточного метода в настоящее время используют ряд простых устройств, в основном приспособленных для разделения анализируемых смесей и не предполагающих при этом одновременного детектирования. Шталем конструкция, получившая название БН-камера ( по Бриннеру и Нидервизеру), широко используется в лабораторной практике ( рис. IX.1), но не приспособлена для одновременного детектирования. [9]

Разделение с помощью проточной хроматографии в системе метилэтияке-тон - пиридин - уксусная к-та-вода ( 17. 15. 15. 2 18 аминокислот ( разделение лейцина и изолейцина. Время хроматографии 4 5 час. Нанесено 0 5 мкг каждой аминокислоты в 0 5 мкл 0 1 н. НС1. [10]

Раствор 1 представляет собой 0 2 % нингидрина в 50 мл абсолютного спирта, 10 мл ледяной уксусной кислоты и 2 мл 2 4 6-колли-дина, а раствор 2 - 1 % Cu ( N03) 2.3 H2O в абсолютном этаноле. После опрыскивания пластинку нагревают в течение 10 мин при 110 С. В табл. 6 показана, по данным Нидервизера [20], чувствительность нингидриновой реакции для 19 аминокислот. [11]

Разделение с помощью проточной хроматографии в системе метилэтияке-тон - пиридин - уксусная к-та-вода ( 17. 15. 15. 2 18 аминокислот ( разделение лейцина и изо-лейцина. Время хроматографии 4 5 час. Нанесено 0 5 мкг каждой аминокислоты в 0 5 мы 0 1 н. НС1. [12]

Раствор 1 представляет собой 0 2 % нингидрина в 50 мл абсолютного спирта, 10 мл ледяной уксусной кислоты и 2 мл 2 4 6-колли-дина, а раствор 2 - 1 % Cu ( N03) 2 - 3H20 в абсолютном этаноле. После опрыскивания пластинку нагревают в течение 10 мин при 110 С. В табл. 6 показана, по данным Нидервизера [20], чувствительность нингидриновой реакции для 19 аминокислот. [13]

Ричард [187] разработал методику двумерного разделения пептидов: в одном направлении проводится хроматографическое разделение пробы, в другом - электрофорез. Адсорбентом служит силикагель G; перед опытом предварительно выявляют лучший растворитель при разделении ферментативного гидро-лизата белков. Автор методики приводит список восьми систем растворителей. После выбора лучшего растворителя пробу подвергают хроматографическому анализу на тонкослойной пластинке размером 200X200 мм. Разделение предпочтительно вести методом восходящей хроматографии, однако при неудовлетворительном разделении можно прибегнуть и к непрерывному хро-матографированию по методике Бреннера и Нидервизера [188] либо применить усовершенствованный прибор, описанный Ричардом. [14]

В предварительно тщательно очищенную и высушенную камеру наливают 80 - 100 мл применяемого растворителя. Затем камеру устилают фильтровальной бумагой, как описано на стр. Следует обратить внимание на то, чтобы пластинки для ХТС при помещении их в камеру были равномерно погружены в растворитель. Ее следует погрузить в растворитель. Для бокового крепления пяти пластинок Бреннер и Нидервизер [6] предлагают простой держатель, который легко можно изготовить самостоятельно из стеклянной палочки, придав ей волнообразную форму. [15]

Страницы: 1 2