Cтраница 4
Номер фракции соответствует числу нуклеотидных звеньев в олигонуклеотиде. [46]
Методом последовательной перекристаллизации в диоксане и толуоле было получено по шесть фракций кристаллического порошка для каждого растворителя. Полученный при охлаждении кипящего насыщенного раствора кристаллический продукт после отделения от маточного раствора путем фильтрации промывался в воде и высушивался на фильтре в течение 7 ч с последующим охлаждением в эксикаторе. Для каждой фракции ( номер фракции равен числу перекристаллизации) определялись следующие показатели: эпоксидное число, содержание общего хлора, температура плавления и время гелеобразования. Кроме того, были получены рентгенограммы с помощью дифрактометра УРС-50ИМ, с приставкой ГП-4 в интервале углов 20 от 8 до 50 на излучении Си Ко. [47]
Затем отбирали и анализировали полученные 10 фракций; при этом фракция 1 -верхняя, а фракция 10 -нижняя. Бинарные смеси анализировали рефрактометрическим методом; полученные данные изображали графически как зависимость показателя преломления от номера фракции. [48]
Фракции элюента после колонки собирали с помощью автоматических коллекторов фракций, определявших размер фракции по числу капель, накапливая фиксированный объем или меняя его через заданный интервал времени. Каждую фракцию анализировали химически и получали хроматограмму, нанося на график количество вещества в соответствующей фракции в зависимости от номера фракции либо среднего объема элюента в каждой фракции. Излишне говорить, что этот процесс утомителен и резко ограничивает практическую разделительную способность ионообменной хроматографии. [49]