Cтраница 2
Задачей дальнейших исследований является четкое определение группы фекальных стрептококков, которая должна учитываться в качестве санитарно-подазатель-ной. Это необходимо для получения сравнимых данных и установления количественных критериев. В унифицированных методах СЭВ важным в гигиеническом отношении считается только Str. Сланеца - Бертли по интенсивности окраски колоний, образующих форма-зан ( красные, темно-красные, бурые), в отличие от всех колоний, вырастающих на этой среде. [16]
Задачей дальнейших исследований является четкое определение группы фекальных стрептококков, которая должна учитываться в качестве санитарно-показатель-ной. Это необходимо для получения сравнимых данных и установления количественных критериев. В унифицированных методах СЭВ важным в гигиеническом отношении считается только Str. Сланеца - Бертли по интенсивности окраски колоний, образующих форма-зан ( красные, темно-красные, бурые), в отличие от всех колоний, вырастающих на этой среде. [17]
Эти выводы были затем проверены и подтверждены на естественной воде. С увеличением концентрации ТТХ возрастает интенсивность окраски колоний, поэтому, несмотря на мелкие размеры, резкая окрашенность и очерченность дают хороший контраст с фоном среды и мембранным фильтром. ТТХ агаре растут в виде красных колоний, хорошо контрастирующих с белым фоном фильтра, и имеют резко очерченные края с более темным непрозрачным центром. С помощью стереоскопического микроскопа легко отличить отдельных представителей БГКП. Окраска колоний прочно и долго удерживается на подсушенных фильтрах, что позволяет сохранять фильтры в качестве документа. [18]
Морфологию бактериальных колоний устанавливают при выращивании бактерий на твердой питательной среде. Структура колоний меняется в зависимости от субстрата и не всегда постоянна для представителей одного вида. Поэтому при диагностике видов этот признак используют как дополнительный. Колонии микроорганизмов могут быть плоскими, выпуклыми или с возвышением в Центре, иметь гладкие, волнистые или расплывчатые края. Важно учитывать и окраску колоний - прозрачная или белая, кремовая, бурая, красная или синяя. Некоторые виды бактерий выделяют в среду пигменты. [19]
Объем пробы, подлежащей фильтрованию, зависит от ожидаемого количества бактерий. Ввиду того что предвидеть количество бактерий в пробе весьма затруднительно, следует анализировать два или три объема той же пробы. Когда объем фильтруемой пробы меньше 20 мл, в воронку перед фильтрованием добавляют небольшое количество дистиллированной воды для однородного распределения бактериальной взвеси по всей поверхности фильтра. Фильтровальные блоки следует стерилизовать перед началом каждого фильтрования. Быстрая очистка блоков от загрязнения после каждого фильтрования достигается путем использования ультрафиолетового стерилизатора, кипячения или обработки паром. Сначала фильтровальный аппарат устанавливают на склянку, в которой будет создаваться разрежение. Стерильный фильтр при помощи стерильного пинцета укладывают сеткой вверх на пористой пластине аппарата, а затем закрепляют воронку, которая удерживает мембрану. Пробу пропускают через фильтр под небольшим вакуумом. В верхнюю половину чашки для культуры помещают стерильную абсорбирующую прокладку и добавляют по каплям сверху обогащающую среду в количествах, достаточных для того, чтобы пропитать прокладку. Для колиформной группы применяют среду Эндо, а для фекальных колиформ - среду M-FC. Подготовленный фильтр пинцетом вынимают из фильтровального аппарата и помещают непосредственно на прокладку в чашке. Чашка вновь закрывается фильтром, и культура подвергается инкубации в течение 24 ч при температуре 35 С. Инкубацию на фекальные колиформы проводят, помещая чашки с культурой в водонепроницаемые пластиковые мешки и погружая их в водную ванну для инкубации при температуре 44 5 С. Окраска типичных колоний колиформ колеблется от розовой до темно-красной с металлическим поверхностным блеском. Размер блестящего участка может изменяться от размера небольшой булавочной головки до полного покрытия всей поверхности колонии. Чашки, содержащие 20 - 80 колиформных колоний, считаются наиболее ценными. Плотность колиформ вычисляют в колиформах на 100 мл посредством умножения количества подсчитанных колоний на 100 и деления полученного результата на количество миллилитров фильтруемой пробы. [20]