Cтраница 1
Окраска бактерий является сложным физико-химическим процессом. При взаимодействии красителя с веществами клетки микроорганизма образуются соли, обеспечивающие прочность окраски. Отношение разных видов микроорганизмов к красителям называют тинкториальным свойством. [1]
Перед окраской бактерий раствор разводят в 10 раз дистиллированной водой. [2]
Классический метод окраски бактерий по Граму многоэтапен и субъективен в основной манипуляции - обесцвечивании препарата спиртом: при недостаточном или избыточном действии спирта может произойти недообесцвечивание или переобесцвечивание препарата, что искажает конечный результат. Модификация метода, предложенная Г. П. Калиной, сокращает число этапов и позволяет получить объективные результаты, поскольку продолжительность обесцвечивающего действия спирта может составлять от V2 мин до нескольких десятков минут без влияния на конечный результат. [3]
Классический метод окраски бактерий по Граму многоэтапен и субъективен в основной манипуляции - обесцвечивании препарата спиртом: при недостаточном или избыточном действии спирта может произойти недообесцвечивание или переобесцвечивание препарата, что искажает конечный результат. Модификация метода, предложенная Г. П. Калиной, сокращает число этапов и позволяет получить объективные результаты, поскольку продолжительность обесцвечивающего действия спирта может составлять от / 2 мин до нескольких десятков минут без влияния на конечный результат. [4]
Для этого агаровую пластинку заливают растворами генцианвиолета или кристаллвиолета, которые применяются для окраски бактерий по Граму. Затем этот раствор заменяют на 3 мин. Поверхность агара высушивают фильтровальной бумагой, и после этого делают отпечатки на листах фильтровальной бумаги. Зоны подавления получаются темно-фиолетовыми на бесцветном фоне. [5]
ТТХ менее токсичен, чем другие соли тетразолия, как для микобактерий, так и для грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов. Оптимальная витальная окраска бактерий достигается при дозах, составляющих 50 % от токсических доз, полностью задерживающих рост данного вида бактерий. ТТХ относится к пятичленным гетероциклическим соединениям. Бесцветный и легкорастворимый в воде порошок при восстановлении под действием редуктазы некоторых видов бактерий переходит в темно-красный, растворимый в липоидах формазан, который откладывается как внутри, так и снаружи клетки. [6]
Streptococcuspneumoniae в тушевом препарате по Бурри ( видна выраженная капсула. [7] |
При негативном способе окраски живых бактерий по этому методу бактерии остаются неокрашенными на темном фоне. В каплю туши, разведенную 1: 10 дистиллированной водой, вносят исследуемую культуру и равномерно распределяют петлей или краем предметного стекла. Вместо туши иногда используют нигрозин, конго красный и др. Сложные методы окраски предполагают использование нескольких красителей и дают возможность дифференцировать одни микробы от других, а также изучать особенности строения микробных клеток. [8]
Это ускоряет и упрощает анализ, исключает необходимость окраски бактерий. [9]