Cтраница 1
Определение конфигурации гликозидных связей в олигосаха-ридах является сложной задачей, общего решения которой до сих пор не предложено. [1]
Для определения конфигурации гликозидных связей в полисахаридах применяются химические, физические и ферментативные методы. [2]
Для определения конфигурации гликозидных связей в средних и высших олигосахаридах проводят их ступенчатое расщепление, а затем определяют конфигурацию гликозидных связей в отдельных звеньях, содержащих одну-две гликозидные связи. Определение конфигурации гликозидных связей может быть осуществлено также исследованием продуктов ферментативного гидролиза. Отношение данной гликозидной связи к ферменту с известной субстратной специфичностью позволяет сделать заключение о конфигурации этой связи. [3]
Для определения конфигурации гликозидных связей и величин окисных циклов Сахаров в исследуемых соединениях мы сравнили величины их молекулярных вращений с таковыми различных фе-нолпроизводных L-рамно - и D-глюкопираноз и фураноз. В результате установлено, что рамноза в мирицетинрамнозиде связана а-гли-козидной связью и имеет наиболее вероятный фуранозный окисньщ Цикл, а глюкоза с кверЦетином соединена Р - ГЛИКОЗИДНОЙ связью и имеет пиранозную форму. [4]
Для определения конфигурации гликозидных связей обычно пользуются двумя методами: 1) расчетом удельного вращения и 2) ферментативным гидролизом. [5]
Весьма ценный метод определения конфигурации гликозидных связей заключается в исследовании отношения гликозидов к гликозидазам - ферментам, расщепляющим гликозидные связи ( см. гл. Поскольку действие всех известных гликозидаз стереоспецифично, способность определенного фермента катализировать гидролиз исследуемого гликозида позволяет установить конфигурацию гликозидной связи последнего. Однако гликозидазы специфичны не только к конфигурации гликозидной связи, но и к стереохимии глико-зильного остатка, и, кроме того, чувствительны к природе агликона. Поэтому неспособность данного соединения к гидролизу под влиянием того или иного фермента не может служить окончательным доказательством конфигурации его гликозидной связи. С другой стороны, при работе с гликозидазами необходимо постоянно считаться с возможным присутствием примесей других ферментов ( например, примесь ( 3-глюкоз ид азы в а-глюкозидазе), способных исказить результаты гидролиза ( см. также стр. [6]
Совсем по-другому выглядит задача определения конфигурации гликозидных связей в олигосахаридах, особенно в низших олигосахаридах, получаемых при тех или иных способах фрагментации полисахаридных цепей. Дело в том, что при малом количестве гликозидных связей ( в дисахаридах, например, такая связь только одна) удельное вращение уже позволяет с гораздо большей определенностью судить о конфигурации этих связей. [7]
По-видимому, универсальный ( гипотетический) метод определения конфигурации гликозидных связей в полисахаридах можно представить себе следующим образом. Это должен быть такой метод расщепления гликозидных связей, который приводил бы количественно к производным моносахаридов подобно кислотному гидролизу. Но с той, однако, разницей, что структура этих производных должна зависеть от конфигурации расщепляемой глико-зидной связи исходного остатка. [8]
Гликозидазы широко применяются при химических исследованиях, главным образом для определения конфигурации гликозидных связей в природных олигосахаридах и для их специфического гидролиза. [9]
Помимо общеупотребительных методов определения общих размеров статистического клубка, которые обычно применяют для исследования растворов полимеров, существуют специальные методы определения локальных конфигураций гликозидных связей угле-водных цепей. [10]
Для определения конфигурации гликозидных связей в средних и высших олигосахаридах проводят их ступенчатое расщепление, а затем определяют конфигурацию гликозидных связей в отдельных звеньях, содержащих одну-две гликозидные связи. Определение конфигурации гликозидных связей может быть осуществлено также исследованием продуктов ферментативного гидролиза. Отношение данной гликозидной связи к ферменту с известной субстратной специфичностью позволяет сделать заключение о конфигурации этой связи. [11]
Хотя с момента публикации работ Энджиэла и Джеймса прошло всего несколько лет, появилось очень большое число исследований, в которых расщепление хромовым ангидридом применялось для изучения строения олиго - и полисахаридов с а - и Р - ГЛИКОЗИДНЫМИ связями. Метод исключительно ценен и для определения конфигурации гликозидных связей, и для получения олигосахаридных фрагментов, которые другим путем получить нельзя. [12]
При действии кислот олигосахариды расщепляются на моносахариды. В присутствии щелочей они легко изомеризуются, причем наиболее чувствительно восстанавливающее звено. Гликозидные связи оли-госахаридов разрываются также ферментами. Специфические гликози-дазы с высокой степенью специфичности расщепляют определенные типы связей, что широко используется для определения конфигурации гликозидной связи. Например, мальтаза расщепляет только а-глико-зидные связи мальтозы и не действует а целлобиозу. [13]
Так, содержащаяся в эмульсине горьких миндалей ( 3-гликозидаза расщепляет ( З - гликозидные связи, а находящаяся в дрожжах а-гликозидаза - а-гликозидные связи. Известные трудности применения ферментативного гидролиза связаны с тем, что в природных источниках часто содержатся одновременно как а -, так и fl - тликозидазы и необходима тщательная очистка ферментных препаратов. Приходится также считаться и с субстратной специфичностью: иногда а-гликозидаза, легко расщепляющая одинолиго-сахарид, не действует или медленно действует на другой, также содержащей а-гликозидные связи, но имеющий другое строение. При всех этих трудностях ферментативный гидролиз относится к надежным методам определения конфигурации гликозидных связей. [14]