Определение - нуклеотидной состав
Cтраница 1
Определение нуклеотидного состава РНК основано обычно на количественном анализе нуклео-тидов, образующихся после расщепления полимера ( см. стр. [1]
Определению нуклеотидного состава нуклеиновой кислоты тем или иным методом должен предшествовать ее гидролиз. Ни один из этих методов не является строго количественным, поскольку в первом случае наблюдается низкий выход урацила, а во втором - разрушение части тимина. [2]
Для определения нуклеотидного состава РНК подвергают гидролитическому расщеплению. При кипячении с минеральными кислотами РНК, как и ДНК, расщепляется на составляющие компоненты - азотистые основания, рибозу и фосфор. РНК гидролизуется до нуклеотидов, в то время как ДНК щелочному гидролизу не подвергается и примесь ее может быть отделена в виде осадка. [3]
Использование обратнофазовой гидрофобной хроматографии для определения нуклеотидного состава ДНК и РНК встречается довольно редко, возможно, потому, что эта задача проще решается методом TGX. Тем не менее ЖХВД здесь может оказаться предпочтительнее в случае необходимости проведения экспресс-анализа на наномо-лярном уровне. Элюцию вели при комнатной температуре со скоростью 1 мл / мин под давлением 160 атм; концентрация метанола в элюенте увеличивалась на 1 % в минуту. [4]
Щелочной гидролиз до мононуклеотидов применяется для определения нуклеотидного состава РНК. [5]
 |
Нуклеозидный состав фенилаланиновои тРНК. [6] |
Как было показано выше, первой стадией является определение нуклеотидного состава с последующим анализом продуктов гидролиза фенилаланиновои тРНК при помощи Т1 - и панкреатической РНК-аз. [7]
Щелочной гидролиз РНК до мононуклеотидов, хотя он и является одним из самых распространенных методов определения нуклеотидного состава РНК и часто применяется при установлении нуклеотидной последовательности и определении концевых звеньев в олигонуклеотидах ( см. стр. В процессе щелочного гидролиза РНК происходит существенное дезаминирование производных цитозина78 и в еще большей степени З - М - метилцитозина, разрушение производных 5 6-дигидроурацила ( см. стр. N-метиладенина в б-э / сзо - N-метиладенины ( см. стр. Поэтому для анализа содержания этих соединений в составе РНК щелочной гидролиз непригоден. [8]
В настоящей монографии дан обзор применения при классификации бактерий в основном двух методов гено систематики: определения нуклеотидного состава ДНК и степени гомологии последовательностей нуклеотидов ДНК. [9]
Двумерная и одномерная ионообменная ТСХ на пластинках импрегнированной полиэтиленимином целлюлозы ( PEI-cellulose) и ДЭАЭ-целлюлозы нуклеозидов или нуклеотидов для определения нуклеотидного состава нуклеиновых кислот, включая идентификацию минорных нуклеозидов; элюцию ведут, как правило, солями лития или аммония, используя также вариации рН соответствующих буферов. [10]
Если определение нуклеотидного состава ведется без извлечения НК из растительной ткани, то последняя должна быть быстро зафиксирована, отмыта от кис-лоторастворимых нуклеотидов, пигментов и жиров. [11]
Настоящая книга, издаваемая в серии научных трудов ВИР, освещает методы и методики по определению содержания нуклеиновых кислот в растительных тканях и препаратах. В ней также изложены - идентификация и количественный учет свободных нук-леотидов; выделение нативных РНК и ДНК из растений; фракционирование их на колонках; определение нуклеотидного состава РНК и ДНК методами колоночной и бумажной хроматографии; изучение свойств макромолекул нуклеиновых кислот, обнаружение их в клетке, цитофотометрия, определение состояния ДНК и РНК в клетке. [12]
Пуриновые и пиримидиновые основания сильно поглощают ультрафиолетовый свет вблизи 260 ммк. Этим свойством чаще всего пользуются при анализе электрофореграмм, хотя имеются и другие возможности. Описаны методы электрофоретического определения нуклеотидного состава нуклеиновых кислот, для которых достаточно иметь десятые доли микрограмма вещества. [13]
Пуриповые и пиримидиноБые основания сильно доглищают ультрафиолетовый свет вблизи 260 ммк. Этим свойством чаще всего пользуются при анализе электрофореграмм, хотя имеются и другие возможности. Описаны методы электрофоретического определения нуклеотидного состава нуклеиновых кислот, для которых достаточно иметь десятые доли микрограмма вещества. [14]
Ширина интервала плавления для даухцепочечных синтетических полннуклеотндов, таких, как поли ( dА) - поли ( сТ), значительно уже, чем у природных ДНК, что является следствием гетерогенности последних. Температура плавления ДНК линейно возрастает с увеличением доли G-C пар. На этом основан один из методов определения нуклеотидного состава ДНК. [15]
Страницы: 1 2