Cтраница 1
Определения тирозина и триптофана были проведены АЪзуром и Кларком [ 442, 443] в целых обезжиренных организмах. Проведение опыта: О с Sar assum суспендируют в 500:: л 10 раствора гидроокиси бария и нагревают на паровой бп:: - 4 дня. Зарин удаляют и концентрируют раствор до 100 мл. [1]
Для определения тирозина готовят четыре пробирки и в них вносят по 2 5 мл фильтрата, по 0 5 мл фе-нольного реактива и перемешивают. [2]
Наиболее старый метод определения тирозина основан на его малой растворимости в нейтральных водных растворах. Фишер, Осборн и Абдергаль-ден пользовались в своих работах главным образом этим методом. [3]
По литературным данным, определение тирозина в продуктах гидролиза белка и других биологических материалах принято производить колориметрическим методом, основанным на применении реакции Миллона-Бернгарта. Однако в отношении пригодности данного метода определения тирозина существуют разноречивые мнения. [4]
Приведенный метод применяется для определения тирозина и его производных. [5]
В литературе описаны и другие методы определения тирозина, не дающие, однако, точных результатов при анализе малых количеств вещества. [6]
Недавно Кальво и др. [556] описали ферментные электроды для определения тирозина, фенилаланина и лизина; на магнитную ферментную мембрану этих электродов нанесена декарбоксилаза. Молекулы фермента сшиваются с инертным белком ( например, альбумином) с помощью соединения, содержащего два функциональных заместителя ( например, глутарового альдегида), а магнитные зерна феррита распределяются по всей структуре мембраны. Этот метод позволяет непосредственно фиксировать пленку на СО2 - электроде, имеющем цилиндрический магнит, без помощи удерживающего кольца. Мембрана с активной декарбоксилазой накладывается на внешнюю поверхность газопроницаемой пленки. [7]
В этом разделе обсуждаются только те методы, которые не включают одновременно определения тирозина. [8]
Существует мнение, что ионы хлора мешают осаждению триптофана сернокислой ртутью и определению тирозина Мил-лоновой реакцией. Однако опыты авторов показали, что значительные количества хлоридов ( аСП не мешают определению тирозина и триптофана по методу Миллон-Лагга. [9]
Спектро-фотометрический метод успешно также применялся для изучения а-и Ь - форм хлорофилла [280], для определения тирозина и триптофана в белках [281], для анализа смесей углеводородов, содержащих до шести компонентов [282], определения стирола и полистирола в смеси [283], анализа смесей линоленовой, линолевой и элестеариновой кислот [284], для определения витамина А в сливочном масле [285] и других целей. [10]
После опробования ряда методов было решено проверить пригодность реакции Миллона-Бернгарта к определению малых количеств тирозина и исследовать возможность применения колориметрического метода для определения тирозина с нингид-рином. [11]
По литературным данным, определение тирозина в продуктах гидролиза белка и других биологических материалах принято производить колориметрическим методом, основанным на применении реакции Миллона-Бернгарта. Однако в отношении пригодности данного метода определения тирозина существуют разноречивые мнения. [12]
Существует мнение, что ионы хлора мешают осаждению триптофана сернокислой ртутью и определению тирозина Мил-лоновой реакцией. Однако опыты авторов показали, что значительные количества хлоридов ( аСП не мешают определению тирозина и триптофана по методу Миллон-Лагга. [13]
Все же следует отметить, что субстратная специфичность некоторых декарбоксилаз не абсолютна. Так, например, L-тиро-зиндекарбоксилаза Streptococcus faecalis проявляет заметную декарбоксилазную активность в отношении L-фенилаланина [229]; суспензии этих бактерий можно использовать не только для определения тирозина, но и для определения фенилаланина. Тирозиндекарбоксилаза действует также на 3 4-диокси-фенилаланин, но не декарбоксилирует производные тирозина с замещенной фенольной группой, например О-метилтирозин. [14]
Они поглощают только ниже 300 нм, и в этой области возбуждаются также многие другие распространенные соединения, например продукты гидролиза белков. Такой способ применяется, например, для определения тирозина в плазме или ткани с использованием сравнительно простой методики, не требующей полного выделения тирозина. В биохимических исследованиях такой принцип - сдвиг параметров флуоресценции в более длинноволновую область - очень часто используется с целью избежать помех, обусловленных многими сопутствующими веществами, и обеспечить более надежную идентификацию. [15]