Остановка - синтез
Cтраница 1
Остановка синтеза ДНК - это ключевой этап дидезокси-метода, но чтобы осуществить секвенирование в полном объеме, необходимо выполнить целый ряд условий. [2]
Конкретный механизм запуска и остановки синтеза металлотионеина изучен недостаточно. Эти и некоторые другие наблюдения позволяют считать, что ядерный металлотионеин играет важную регуляторную роль, контролируя вместе с апотиоиешюм транскрипцию и трансляцию данного белка в клетке. Когда в норме количество тионеина превышает таковое несвязанных ионов металлов, его дальнейший синтез прекращается. [3]
Считается, что в результате подавления синтеза предшественников происходит замедление или даже остановка синтеза ДНК. В этих условиях повышается вероятность того, что решшкац. [4]
Контроль концентраций ферментов безусловно является очень удобным способом адаптации организма к относительно долговременным изменениям условий, однако не подходит для быстрого ответа на эти изменения. Остановка синтеза фермента с периодом полужизни в несколько дней, например, не оказывает немедленного эффекта на скорость удаления его субстрата или скорость образования его продуктов. В связи с этим неудивительно, что получили развитие и другие механизмы, а именно механизмы регуляции активности определенных ферментов. [5]
ДНК, клетка реагирует на адсорбцию теней остановкой синтеза и последующим лизисом, хотя никаких вирусов при этом, очевидно, не получается. После момента инъекции первое, что синтезируется, это некоторое количество нового белка. Как мы увидим дальше, синтезу этого нового белка предшествует на несколько секунд синтез особой информационной РНК реплицирующей ДНК бактериофага. [6]
Очень часто для решения биотехнологических и некоторых других задач бывает необходимо знать полную нуклеотидную последовательность клонированного гена. Для секвенирования используют несколько методов; один из них - ди-дезокси-метод, разработанный Сангером и др. В его основе лежит остановка синтеза цепи после присоединения к ней дидезоксинуклеотида. У такого нуклеотида отсутствует З - гидроксильная группа, и дальнейший рост цепи становится невозможным. Для секвенирования в разных пробирках одновременно проводят четыре реакции синтеза ДНК, каждая - в присутствии одного из четырех дидезоксинуклеотидов. Продукты реакций разделяют с помощью гель-электрофореза, проводят радиоавтографию и считывают с радиоавтографа нуклеотидную последовательность синтезированного фрагмента ДНК. [7]
Какой именно кодон ответствен за включение той или иной аминокислоты, можно определить по таблице, в к-рой буквы А, Г, У, Ц обозначают основания, входящие в иу-клеотиды ( соотв. Прочерки в таблице означают, что три ко дона - У АА, УАГ и У ГА в нормальных условиях не кодируют к. Они являются сигналами остановки синтеза полипептидной цепи. [8]
Совсем иная ситуация возникает при изучении биохимической генетики микроорганизмов. Здесь мы имеем дело не со сложными малоопределенными морфологическими признаками, а с определенными ферментами, синтез которых управляется цистронами. Повреждение цистрона может вызвать остановку синтеза фермента, и организм становится ауксотрофом по соответствующему метаболиту. Отношения здесь очень ясные и прямые. [9]
Транскрипция экзонов и нитронов сложного эукариотического гена осуществляется в порядке их расположения друг за другом ( коллинеарная. Порядок вырезания районов нитронов необязательно соответствует последовательности их расположения в гене. Сплайсинг должен быть очень точным, в противном случае ошибка на один нуклеотид может вызвать нарушение рамки трансляции, что приводит, например, к образованию терминирующих триплетов и остановке синтеза полипептида. Однако границы экзонов и нитронов часто не удается определить с точностью до нуклеотнда, поскольку в районе сайтов сплайсинга нуклеотнды ( например, G, см. рис. 102) могут быть повторены. [10]
Транскрипция экзонов и интронов сложного эукариотического гена осуществляется в порядке их расположения друг за другом ( коллинеарнаятранскрипция, после чего вырезаются районы интронов, а экзоны сшиваются в результате сплайсинга. Порядок вырезания районов интронов необязательно соответствует последовательности их расположения в гене. Сплайсинг должен быть очень точным, в противном случае ошибка на один нуклеотид может вызвать нарушение рамкн трансляции, что приводит, например, к образованию терминирующих триплетов и остановке синтеза полипептида. Однако границы экзонов и интронов часто не удается определить с точностью до нуклеотида, поскольку в районе сайтов сплайсинга нуклеотнды ( например, G, см. рис. 102) могут быть повторены. [11]
Возбудители дифтерии паразитируют на покровных тканях, а их токсин действует особенно сильно на глубоко расположенные части тела - на клетки мышечной ткани ( скелетных мускулов, сердца, диафрагмы), в несколько меньшей степени - на клетки печени, почек и надпочечников. И пока трудно сказать, в чем заключается биологический смысл этого действия, каково его значение для микробной популяции. Тем не менее уже выяснено, что белковая молекула дифтерийного токсина состоит из двух неодинаковых частей, выполняющих различные фукции. Одна часть служит для внедрения молекулы токсина внутрь клетки. Вторая часть проникает в сердцевину клетки и прекращает происходящий там биосинтез белков, вследствие чего клетка погибает. Таким образом, весь процесс поражения клетки дифтерийным токсином состоит из двух этапов: первый сводится к поиску нужного молекулярного участка клеточной оболочки и к проникновению через нее, второй - к остановке внутриклеточного синтеза белков. Всего одной молекулы дифтерийного токсина достаточно, чтобы это сделать. [12]
Страницы: 1