Пентануклеотида

Cтраница 1

Пентануклеотиды, содержащие только один остаток уридиловон кислоты, были расфракционированы на ДЭАЭ-целлюлозе при рН 4 0 ( фиг. [1]

Пентануклеотид состоит из натриевых солей пентозо-нуклео-тидов рибонуклеиновой кислоты дрожжей. Приготовляется гидролизом нуклеиновой кислоты дрожжей с помощью едкого натра. Применяется внутримышечно для лечения инфекционных заболеваний, сопровождаемых лейкопенией. [2]

Двумерное разделение смеси радиоактивных нуклеотидов. [3]

В колонке А находятся пентануклеотид, ундека - и тридекануклеотид, длины которых совпадают с положением А в исходном полинуклеотиде. Аналогично в колонке С длины фрагментов ( три -, гекса -, нона -, дека -, тетрадека-и пентадека -) соответствуют положению С в исходном нуклеотиде. [4]

Из второго компонента фракции 12, пентануклеотида, после расщепления Т i - РНК-азой и хроматографии продуктов гидролиза на бумаге в системе и - пропанол - аммиак-вода, были получены димер ApGp и тример. [5]

Эти низшие олигонуклеотиды ( вплоть до пентануклеотида), как было показано, являются членами гомологического ряда линейных полимеров, содержащих нуклеотиды, связанные 2 - 5 - и 3 - 5 -фосфоди-эфирными связями и оканчивающиеся 2: 3 -циклическим фосфатом. [6]

Таким образом, среди продуктов распада - шесть пиримидиннуклеотидов, один динуклеотид, один тринуклеотид и один пентануклеотид. В каждом из этих соединений имеется концевой пиримидиннуклео-тидный остаток, связанный с С-3 предшествующего пуриннуклео-тида, однако в остальном они состоят из пуриннуклеотидных остатков. [7]

Дефосфорилирование и последующий исчерпывающий гидролиз последнего панкреатической РНазой обнаруживают среди нуклеотидов один нуклеозид - уридин, который, следовательно, находится на З - конце пентануклеотида. Выбор между ними был сделан на том основании, что среди продуктов частичного гидролиза гексануклеотида панкреатической РНазой был обнаружен дииуклеотид CpUp, а это возможно лишь в том случае, если верна первая из двух структур. [8]

Наряду с гомологическим рядом циклических олигонуклеотидов, образующихся из линейных соединений фосфорилированием 5 -гидроксильной группы, находящейся на одном конце, 3 -фосфатным остатком, находящимся на другом, были получены с еще более низкими выходами линейные тимидинолигонуклеотиды ( вплоть до пентануклеотида), несущие З - фосфатные концевые группы. [9]

Фракционирование сложной смеси на колонке, заполненной целлюлозным анионообменным материалом, обнаружило присутствие двух больших серий веществ; они были идентифицированы как линейные олигодезоксинуклеотиды ( с 3 - 5 -меж-нуклеотидными связями), содержащие концевой 5 -моноэтерифици-рованный фосфатный остаток, и гомологический ряд циклических олигонуклеотидных производных, получающихся в результате фосфорилирования концевой З - гидроксильной группы 5 -фосфат-ной группой, находящейся на другом конце олигонуклеотида. Степень внутримолекулярной циклизации уменьшается с увеличением длины цепи; так, циклического пентануклеотида образуется только небольшое количество по сравнению с линейной пентатимидиловой кислотой. Члены обоих рядов вплоть до пентануклеотида были выделены в сравнительно чистом состоянии и охарактеризованы химическими и ферментативными методами. Низкие выходы оли-гонуклеотидов объясняются частично образованием неидентифицированных нуклеотидных производных; однако хроматогра-фические методы свидетельствовали о присутствии полимеров, содержащих до одиннадцати нуклеотидов. Диэстераза змеиного яда легко расщепляет линейные полимеры до тимидин-5 - фосфата, тогда как при обработке моноэстеразой предстательной железы ( для удаления концевого 5 -фосфата) и затем диэстеразой селезенки получаются тимидин-3 - фосфат и концевой тимидин. Длина цепи определялась из отношения количества общего фосфора к количеству фосфора, образующегося при обработке полимера моноэстеразой, и из относительных количеств мононуклеотида и нуклеозида, образовавшегося при гидролизе диэстеразой ( яда или селезенки) полученного олигонуклеотида, у которого предварительно был удален концевой фосфатный остаток. Однако, поскольку даже очищенная диэстераза яда может содержать пирофосфатазу [11], очень желательно безукоризненное доказательство чистоты, гомогенности и структуры высших олигонуклеотидов. [10]

Состав нуклеиновых кислот. [11]

Как видно из цифр таблицы, полученные данные не согласуются с предположением о том, что нуклеиновые кислоты являются полимерами тетра - или пентануклеотидов. Лишь некоторые из этих цифр близки к соответствующим величинам ( 0 250 - для тетрануклеотида и 0 200 -для пентануклеотида), большинство же цифр отклоняется от них весьма значительно. При ферментативном гидролизе было найдено, что пиримидино-вые основания отщепляются гораздо быстрее, чем пуриновые. [12]

Короткие тимидинполинуклеотиды, синтезированные химическим путем ( стр. Интенсивность матричной активности зависит от длины использованного полинуклеотида. Вполне измеримую активность можно обнаружить для тимидинового пентануклеотида; максимальная же активность достигается в присутствии тетраде-кануклеотида. Образующийся продукт представляет собой цепь из 50 - 100 нуклеотидов в среднем. Синтез поли-р Г происходит только в том случае, если используемый как матрица полинуклео-тид содержит более восьми дЦ - нуклеотидов. [14]

Нижнее пятно содержало смесь тринуклеотидов-типа д - ХфУфгф, полученных в результате частичного гидролиза ДНК микрококковой нукле-азой, а также пентануклеотиды типа д-ф ХфУфУ фУ ф %, полученные из ДНК путем ее гидролиза ДНК-азой I. [15]

Страницы: 1 2