Cтраница 1
Гелевые пластины, пропитанные соответствующей питательной средой, свежая почва, часовые стекла, палочки с оттянутым концом и трафарет, соответствующие жидкие среды, эрлеимейеровские колбочки, почва, алюминиевые ложки, реактив Несслера и цинк-йод-крахмал, 10 % - ная HaSC ( или реактив Грисса), микроскопы и все необходимое для приготовления препаратов и микроскопирования, фарфоровые пластинки с лунками, дифениламин, растворенный в крепкой серной кислоте. [1]
Нитрифицирующие бактерии выявляют на гелевых пластинах, пропитанных 5 мл питательной среды Виноградского ( стр. [2]
Аэробные целлюлозоразруишющие микроорганизмы на гелевых пластинах учитывают на 8 - 10 - й день инку бации. Кроме общего подсчета обросших комочков почвы, отдельно определяют процент комочков, обросших бактериями, актиномицетами и грибами. [3]
Азотобактер также хорошо выявляется на гелевых пластинах, пропитанных 3 - 5 мл питательной среды Виноградского ( стр. [4]
Для выявления бактерий первой фазы нитрификации и определения относительной плотности населения их в почве, используют метод Виноградского на гелевых пластинах. [5]
Чтобы установить, какие микроорганизмы в данной почве реагируют на отдельные фракции гумуса, нужно из средней пробы взять навеску почвы в 25 г и поместить на гелевые пластины, пропитанные минеральной средой Виногр адского без источников углерода и азота. Почву смачивают до полного насыщения слабым раствором Na-гумата ( или другой фракцией гумусовых веществ), содержащего примерно 0 5 мг углерода в 1 мл гумата. Часть гуматов при этом проникает в гель. [6]
Более крупные колонии микроорганизмов получают, если гуматы используют только как источник углерода. Гелевые пластины с гуматами помещают во влажную камеру и выдерживают при 25 - 28 С 40 - 50 дней и больше. [7]
После упаривания среды до исчезновения избыточной влаги на поверхности геля раскладывают ( по трафарету) 50 комочков почвы. С этой целью берут два часовых стекла, после фламбирования их в одно часовое стекло помещают исследуемую почву, а в другое - дистиллированную воду. Палочку с оттянутым концом проводят над огнем, смачивают водой и захватывают ею комочек почвы диаметром примерно 2 мм, который помещают на поверхности гелевой пластины. Элективность среды создается отсутствием связанного азота и аэробными условиями среды. [8]
У отдельных представителей миксобактерий ( Soran-gium, Polyangium) даже в световом микроскопе четко видно дифференцированное ядро. Вегетативные клетки имеют палочковидную форму с заостренными или округлыми концами. По мере старения клетки укорачиваются и переходят в микроцисты, соединяющиеся впоследствии слизью и образующие первичные и вторичные цисты, из которых в дальнейшем формируются плодовые тела. Для наблюдений за формой миксобактерий используют колонии, развившиеся вокруг комочков почвы на гелевых пластинах с клетчаткой в качестве единственного источника углерода. [9]
Авторами работы [78] предложен метод визуализации, выгодно отличающийся от друглх возможностью надежно детектировать в слое геля все компоненты комплекса. Способ основан на регистрации образующихся ВС в ходе гидролиза предварительно восстановленной боргидридом смеси це моолигосахаридов. В качестве окислителя используют трифенил н гразолий-хлорид. Образующийся при этом формазан выпадает в осадок в месте локализации активного фермента. Недостатком метода является необходимость нагревания геля и проявляющей системы на горелке для окисления ВС, что может приводить к деформации гелевых пластин, размыванию за счет диффузии продуктов реакции и снижению таким образом разрешающей способности метода. [10]
Авторами работы [78] предложен метод визуализации, выгодно отличающийся от друглх возможностью надежно детектировать в слое геля все компоненты комплекса. Способ основан на регистрации образующихся ВС в ходе гидролиза предварительно восстановленной боргидридом смеси це моолигосахаридов. В качестве окислителя используют трифенил н гразолий-хлорид. Образующийся при этом формазан выпадает в осадок в месте локализации активного фермента. Недостатком метода является необходимость нагревания геля и проявляющей системы на горелке для окисления ВС, что может приводить к деформации гелевых пластин, размыванию за счет диффузии продуктов реакции и снижению таким образом разрешающей способности метода. [11]