Препаративная пластинка
Cтраница 1
Препаративные пластинки изготавливают с помощью устройств для нанесения, или аппликаторов, предпочтительно с устанавливаемой шириной щели. Количество наносимого сорбента от случая к случаю меняется. Для силикагеля оно составляет 20 - 25 г на пластинку с размерами 20X20 см со слоем толщиной 1 мм. Имеется опасность, что толстые слои могут растрескаться при сушке. [1]
Хроматографию на препаративных пластинках, толщина слоя которых может достигать и 5 мм, уже нельзя называть тонкослойной хроматографией. [2]
Для улучшения результатов, получаемых в ПТСХ, были разработаны две уникальные пластинки. Линейная препаративная пластинка фирмы Whatman содержит полосу предадсорбента; это должно упрощать нанесение образца вдоль нижнего края слоя силикагеля или химически связанной Cis-обращенной фазы. Конусные пластинки фирмы Analtech содержат клинообразный слой силикагеля с переменной толщиной от 30 мкм у основания до 1700 мкм у вершины с примыкающим предадсорбирующим слоем толщиной 700 мкм для нанесения образца. Как утверждают, на таких пластинках лучшее разрешение зон по сравнению с обычными пластинками для препаративной ТСХ связано с тем, что растворитель и зона мигрируют при проявлении аналогично тому, как это происходит в радиальной ( циркуляционной) ТСХ. Площадь поперечного сечения слоя при прохождении фронта растворителя увеличивается на клинообразных слоях так, что линейная скорость потока является наивысшей у основания слоя и уменьшается по направлению движения фронта растворителя. В результате тыл зоны движется быстрее, чем фронт, приводя к фокусированию или концентрированию зоны при проявлении и уменьшению размывания полосы. [3]
Пластинки с нанесенными слоями удобны в работе, и поэтому их используют в настоящее время в ПТСХ наиболее широко. Доступны препаративные пластинки различных размеров, причем наиболее популярны пластинки 10X20, 20X20 и 20X40 см. Преимуществом более широких пластинок является их большая емкость, более длинных - увеличенное расстояние проявления. Однако из-за большого времени проявления и большого размывания зон при увеличении длины пластинки обычно предпочитают многомерное проявление на 20-см пластинке. Доступны также препаративные пластинки с нанесенным слоем оксида алюминия, микрокристаллической целлюлозы, волокнистой целлюлозы и обращенной фазы GIS, однако пока наиболее широко используется силикагель. [4]
 |
Рама для приготовления препаративных слоев. [5] |
Равномерное распределение можно обеспечить, осторожно наклоняя раму с пластиной в разные стороны. Опыт авторов настоящей монографии показал, что ручной способ приготовления препаративных пластинок нисколько не уступает приготовлению пластинок с помощью аппликатора; более того, при ручном способе используется вся поверхность пластины. [6]
ПТСХ широко используется в фармацевтической промышленности. Изготовители пластинок для ТСХ информировали нас, что значительная часть препаративных пластинок поступает фармацевтическим компаниям. Использование ПТСХ в промышленности часто составляет секрет фирм, и современная литература по ПТСХ не дает представления о распространении этого метода. [7]
 |
Схематическое изображение метода концентрирования широкой стартовой зоны с получением узкой зоны. 1 - нанесенный образец.| Двумерная пипетка. [8] |
Стекла и фольга скрепляются вместе с помощью липкой ленты. Все устройство крепится на держателе. Препаративную пластинку укладывают на лабораторный подъемный столик и поднимают ее до момента касания слоем сорбента узкого зазора между пластинками по всей его длине. Это устройство пригодно и для нанесения разделяемой смеси на незакрепленные слои. [9]
 |
Камеры для проявления препаративных хроматограмм, выпускаемые. [10] |
При проведении препаративной хроматографии, особенно при разделении веществ с близкими RF, часто применяют повторное хроматографирование ( разд. В этих случаях перед каждым новым хроматографированием слой необходимо тщательно высушить. Поскольку толстый слой содержит значительное количество растворителя, сушить препаративные пластинки можно только в вытяжном шкафу. Особую осторожность следует соблюдать при работе с хроматограммами, элюированными в легко воспламеняющихся растворителях. В продаже имеются специальные сушилки, однако для обычной работы вполне достаточно проводить сушку при комнатной температуре. Такая сушка хотя и занимает много времени, однако осуществляется в мягких условиях. [11]
Слои для ПТСХ готовят в лаборатории или покупают готовые пластинки с нанесенным слоем. Для самодельных слоев обычно используют специальные сорбенты, поставляемые некоторыми фирмами для ПТСХ. Наиболее популярные пластинки для ПТСХ имеют толщину слоя 0 5 - 2 мм ( 500 - 2000 мкм) и размеры 5X20, 10X20, 20X20, 20X40 или даже 20ХЮО см. Условиями успешного разделения на препаративных пластинках являются: гомогенный слой, регулярно нанесенный образец и хорошо насыщенная камера для проявления. Последнее обстоятельство важно, поскольку вещества двигаются в слое с изменяющейся скоростью в соответствии со скоростью испарения растворителя. Они быстрее двигаются на поверхности слоя и более медленно на части слоя, находящейся ближе к пластинке. [12]
Пластинки с нанесенными слоями удобны в работе, и поэтому их используют в настоящее время в ПТСХ наиболее широко. Доступны препаративные пластинки различных размеров, причем наиболее популярны пластинки 10X20, 20X20 и 20X40 см. Преимуществом более широких пластинок является их большая емкость, более длинных - увеличенное расстояние проявления. Однако из-за большого времени проявления и большого размывания зон при увеличении длины пластинки обычно предпочитают многомерное проявление на 20-см пластинке. Доступны также препаративные пластинки с нанесенным слоем оксида алюминия, микрокристаллической целлюлозы, волокнистой целлюлозы и обращенной фазы GIS, однако пока наиболее широко используется силикагель. [13]
Наш обзор литературы по ПТСХ является скорее селективным, чем исчерпывающим. Большинство применений связано с разделением лиофильных соединений на силикагельных слоях. Информация о ПТСХ гидрофильных соединений менее обильна; встречается информация о важных примерах разделения в этой области. Так как ряд изготовителей поставляют препаративные пластинки, покрытые сорбентами, иными, чем силикагель, включая различные типы целлюлозы, то в дальнейшем, вероятно, будут разделять более гидрофильные соединения. [14]
Большинство этих реагентов можно использовать в ПТСХ следующим образом: если для детектирования необходимо использовать деструктивно или необратимо действующий реагент, то следует нанести маленькие пятна образца на внешних полях пластинки. Затем поля опрыскивают требуемым реагентом, предварительно покрывая или экранируя главную часть пластинки, на которой была нанесена полоса, стеклом, картоном или фольгой и прочерчивая между полосами и пятнами вертикальный канал. Тогда интересующие компоненты становятся видны на каждой стороне пластины, указывая, где надо провести горизонтальные линии через центр пластинки, чтобы выделить площади, содержащие интересующие соединения. Альтернативным приемом является нанесение образца поперек большей части слоя и использование затем боковых краев полосы, не закрытых экраном, для опрыскивания. Фирма Analtech продает препаративные пластинки, которые с каждой стороны имеют надрезанные полоски размером 25 мм. Полоса образца наносится на всю пластину, и после проявления боковые части отламываются. После детектирования боковые полоски кладут рядом с центральной частью и отмечают площади для извлечения нужных компонентов. Описанная процедура применима при работе с любыми пластинками, если имеется стеклорез. Следует избегать нагревания препаративных пластинок в хроматографическом процессе, чтобы получить выделенные соединения в неизмененном виде. [15]
Страницы: 1 2