Cтраница 1
Бром-циан приготовляется по мере надобности. К разбавленному раствору серной кислоты прибавляются бромные соли - смесь бром-новатокислого натрия и бромистого натрия. Раствор цианистого натрия Прибавляется к бромному раствору до тех пор, пока не прореагирует весь бром. Приготовленный запасный раствор бромистого циана анализируется прибавлением йодистого калия и титрованием свободного иода гипосульфитом. При исследовании таких растворов важно установить, не имеется ли в наличии неразложившегося бромата или свободной кислоты, которые необходимо удалить перед производством анализа. Этого достигают нейтрализацией углекислым натрием и последующим подкислением уксусной кислотой, а затем уже прибавляют йодистый калий. [1]
При взаимодействии цианидов с бромом образуется бром-циан. Избыток брома связывают фенолом. [2]
Метод основан на превращении цианистого водорода в бром-циан и взаимодействии последнего с пиридином и бензидином с образованием окрашенного в красный цвет производного глута-конового альдегида. [3]
Связывание фермента, меченного флуоресцеином, на активированных бром-цианом сефарозе или сефадексе осуществляют аналогично связыванию немеченного фермента. Меченные флуоресцеином антитела связывают на ферменте, иммобилизованном на матрице, из 0 1 М раствора бикарбоната атрия. Неразбавленную меченую антисыворотку смешивают с равным объемом суспензии фермента, связанного с нерастворимым носителем, и термостатируют 1 ч при 37 С и еще 12 ч при 4 С. После перенесения материала на стеклянный фильтр неспецифически сорбированные компоненты удаляют интенсивным промыванием 0 1 М бикарбонатом натрия. [4]
Второй метод разложения, по Брауну, состоит в действии бром-циана BrCN на циклические амины. [5]
Алкилпроизводные, нормальные алкилцианаты, образуются, по-видимому, из хлор - или бром-циана и алкоголятов натрия. [6]
Винилбензилдиметиламин ( см. ниже) в присутствии небольшого количества эфира смешивают при охлаждении с небольшим количеством бром-циана. Получают кристаллическое вещество, легко растворимое в спирте. Эфирный раствор встряхивают с разбавленной соляной кислотой для извлечения непрореагировавшего 2-винил-бензилдиметиламина и циандиметиламина, сушат хлористым кальцием, отгоняют эфир, а остаток перегоняют в вакууме. Выход 2-бромметил: т чрола составляет 50 % от теорет. [7]
Стабильность матрицы агарозы можно значительно повысить путем сшивания эп-ихлоргидрином [34, 56], 2 3-дибромпропанолом [34, 36] или дивинилсульфоном [34, 58] перед активацией бром-цианом. Устойчивость в водной среде как в кислой, так и в щелочной областях ( рН 3 - 14) растет с увеличением числа сшивок. Возможность использования хаотропных солей, главным образом для элюирования антител, обсуждается в разд. [8]
Методика аналогична описанной для метода А; для приготовления суспензии используют 0 12 р мл буферного раствора и прибавляют 0 05 мл бром-циана. [9]
В хроматографии на бумаге эта реакция была впервые применена Хюбпером, а затем Кодичком и Родди. В процессе этой реакции после присоединения бром-циана прежде всего происходит размыкание гетероциклического кольца с образованием глутаконового альдегида. Глутаконовый альдегид тотчас же реагирует с ароматическим амином. [10]
Обнаружение пиридинового компонента может быть использовано в качестве дополнительного признака для идентификации холигена и отличия его от других названных соединений, образующих формальдегид. Эта реакция основана на переводе пиридина и его замещенных ( за исключением а-замещенных) в глу-таконовый альдегид или его замещенные при применении бром-циана. Глутаконовый альдегид и его замещенные образуют с бензидином фиолетово-красные продукты ( см. обнаружение пиридина, стр. [11]
Цианиды превращают в бромциан, добавляя к анализируемому раствору бромную воду. Затем удаляют избыток брома и вводят в раствор пиридин и бензидин. Реакция между бром-цианом, пиридином и бензидином приводит к разрыву пиридинового кольца и к образованию производного глутаконового альдегида интенсивно красного цвета, содержание которого и определяют с помощью спектрофотометра или фотоколориметра по оптической плотности полученного раствора. [12]
Однако в этом случае реакция чаще всего идет сложно и в нескольких направлениях. Так, при действии бром-циана на ароматические углеводороды в присутствии А1С13 образуются главным образом цианидины, а кроме того нитрилы и бром-производные. Анизол в присутствии А1С13 дает смесь циан - и бром-анизолов. [13]
Взаимодействие диацилгидразидов с P2S5 непосредственно приводит к 2 5-дизамещенным 1 3 4-тиадиазолам. При действии НС1 или ацетилхлорида аминогуанидины ( 401) циклизуются в производные 2 5-диамино - 1 3 4-тиадиазолов. Гидразиды угольной и тиоугольной кислот ( 402; X О или S) вступают с ароил-нзотиоцианатами в реакцию присоединения - циклизации, приводящую со средними выходами к 2-ароиламидо - 5-гидрокси - 1 3 4-тиадиазолам. Аддукты гидразидов тиокарбоновых кислот и карбо-диимидов тоже превращаются в 1 3 4-тиадиазолы. Вариантом отмеченного выше синтеза 1 3 4-тиадиазолов является получение их 2-амино - 5-меркаптопроизводных при взаимодействии дитиокарбазатов с бром-цианом. Известны многие другие внутримолекулярные циклизации [158, 160], в том числе взаимодействие тиосемикарбазидов с ортоэфирами, приводящее к образованию монозамещенных продуктов. [14]
В одинаковых условиях ( рН, ионная сила, состав буферного раствора и температура) способность СН3 ( СН2) МН-сефарозы удерживать фосфорилазу b зависит от длины углеводородных цепей. При хроматографии на производных сефарозы ( я 0 или 1) фосфорилаза b выходила из колонки с фронтом растворителя; при п 2 происходила задержка фермента, а при п 3 фермент адсорбировался. Элюирование фосфорилазы b с модифицированной сефарозы ( п 3) возможно с помощью деформирующих буферных растворов, которые, как было показано, приводят к обратимым структурным изменениям фермента. Сама агароза содержит отрицательные заряды, а связывание алкил - или ариламинов на активированной бром-цианом агарозе вводит в гель положительные заряды ( разд. В связи с этим Пост и др. [28] обращали внимание на то, что на сефарозе с алкиламинами, прикрепленными после предварительной активации носителя бромцианом, связывание белков происходит большей частью при рН выше изоэлектрической точки выделяемых белков. Поэтому допускалось, что в этих случаях электростатические взаимодействия с положительно заряженной N-замещенной изомочевиной более существенны для связывания, чем гидрофобные взаимодействия с гидрофобной боковой цепью. Тем не менее гранулы агарозы не связывают фосфорилазу Ь, пока к ним не будут прикреплены алкильные боковые цепи некоторой минимальной длины. [15]