Cтраница 2
Добавление некоторого ограниченного числа нуклеотидных единиц к концу молекулы имеющегося полирибонуклеотида не может рассматриваться как полинуклеотидный синтез. Тем не менее эта реакция близка к нему, имеет большое значение и хорошо сейчас изучена. После гидролиза диэстеразой змеиного яда был получен меченый 5 - АМФ, а после щелочного гидролиза - меченые цитидин-2 - и цитидин - З - монофосфаты. [16]
Олигодезоксинуклеотиды в таких условиях превращаются в 5 - 0-ацетаты, в олиго - и полирибонуклеотидах ацетилируются также 2 / - ОН-группы. [17]
Рандедат и Вайман [81] использовали ТСХ на PEI-целлю-лозе для доказательства образования комплексов между дезок-сирибоолигонуклеотидами и полирибонуклеотидами. Нанося образцы первых соединений на пятна полиуридиловой кислоты, помещенной на тонкие слои PEI-целлюлозы, эти авторы добились, что олигонуклеотнды оставались в исходном положении в таких условиях, при которых обычно они перемещаются по слою. [18]
Широкое применение а химии нуклеиновых кислот находит окисление унс-гликольной группы в рибонуклеозидах, олиго - и полирибонуклеотидах. Эта реакция проходит в мягких условиях под действием солей йодной кислоты с образованием ди альдегида. Такого рода ди альдегиды весьма pea кци он неспособны. [19]
Эксперименты с синтетическими дезоксирибонуклеиновыми кислотами доказывают, что затравка определяет как состав, так и последовательность оснований в синтезированном полирибонуклеотиде. Сополимер дАТ стимулирует включение АМФ лишь в присутствии УТФ, и наоборот, УМФ включается только тогда, когда в смеси имеется АТФ. В обоих случаях образуется полири-бонуклеотид, в котором чередуются остатки аденина и урацила. При использовании в качестве затравки полимера дГдЦ включаются лишь ГМФ и ЦМФ. [20]
Эти биосинтетические полимеры ведут себя по отношению к щелочам и гидролитическим ферментам таким же образом, как встречающиеся в природе полирибонуклеотиды. [21]
Образование спирального комплекса из иолирибоцитидиловой ки. [22] |
Важный вопрос, который необходимо было решить с помощью модельных полимеров, это определение структурной возможности образования двойных спиралей Крика-Уотсона из одной нити полирибонуклеотида и второй нити полидезоксирибонуклеотида. Ответ отнюдь не очевиден, так как атом кислорода в рибозе требует около 3 А лишнего места и трудно понять, возможна ли комбинированная спираль по чисто стерическим соображениям. С другой стороны, если РНК в клетке реплицируется с ДНК ядра, то образование двойных спиралей Крика-Уотсона должно происходить. [23]
Однако, теперь уже стало ясно, что не водородная связь между основаниями, как считали Уотсон и Крик, является определяющей для структуры полирибонуклеотида. [24]
Влияние полинуклеотидов [ 3 - 10 - 5 М ( Р ] на спектр поглощения акридинового оранжевого ( 3 - 10 - 5 М в 0 01 М ацетате аммония при. [25] |
Этот тип прочного связывания, в котором на 2 - 5 пар оснований приходится до одной молекулы красителя, является, вероятно, существенным при взаимодействии красителей со спиральными комплексами, образованными ферментативно синтезированными полирибонуклеотидами. [26]
Однако он может полностью разрушать молекулы ДНК бактериофага, содержащие глюкозилированный оксиметилцитозин ( стр. На полирибонуклеотиды фермент не действует. [27]
Эти полирибонуклеотиды состоят, по-видимому, из одинаковых одноцепочечных и чрезвычайно гибких молекул, легко претерпевающих деформацию. Из этого вытекают следствия, о которых мы уже говорили выше: во-первых, сильная зависимость различных оптических и гидродинамических свойств этих полирибонуклеотидов от ионной силы и от некоторых других факторов и, во-вторых, близкое сходство ряда теоретических и экспериментальных параметров с соответствующими параметрами для других полиэлектролитов. Отдельные структурные компоненты в молекуле РНК связаны между собой так же, как они связаны в ДНК; иными словами, молекула этого полирибонуклеотида представляет собой одиночную неразветвленную цепь, построенную из мономерных единиц, которые связаны между собой 3 5 -фосфодиэфирными связями. Поскольку ОН-группа в положении 2 не замещена, полирибонуклеотиды расщепляются под действием не слишком концентрированной щелочи ( что отличает их от поли-дезоксирибонуклеотидов); другие характерные для них реакции рассмотрены выше. Способность свободных аминогрупп вступать в реакции с такими соединениями, как HN02 и НСНО, у РНК выше, чем у ДНК ( но ниже, чем у свободных нуклеотидов); однако не все остатки, по-видимому, одинаково реакционноспособны. Гипохромизм у РНК выражен слабее, а интервал денатурационного перехода у них значительно шире, чем у двухцепочечных ДНК. Кривые денатурации напоминают по форме кривые, получаемые при плавлении одноцепочечных ДНК. [28]
Особая РНК-полимераза ( праймаза) синтезирует короткую цепь РНК ( примерно 10 рибонуклеотидов - праймер), комплементарную одной из цепей ДНК-матрицы. Этот фермент не нуждается в затравке для синтеза полирибонуклеотида. [29]
Полинуклеотидфосфорилаза может быть отнесена к деполиме-разам РНК. Фермент катализует обратимый процесс, в ходе которого полирибонуклеотид реагирует с неорганическим фосфатом; при этом образуется рибонуклеотиддифосфат. Более детально этот вопрос рассматривается в гл. [30]