Положение - аминокислота
Cтраница 1
Положение аминокислот на проявленной хроматограмме выражается коэфициентом скорости движения R для аминокислот, разделяемых в колонке, и RF для аминокислот, разделяемых на бумаге. [1]
Сопоставляя положение аминокислот гидролизата с положением аминокислот-свидетелей, определяют аминокислотный состав гидролизата. [2]
Этот способ определения положения аминокислот и пептидов на бумаге имеет бесспорные преимущества перед способом цветных реакций, так как при этом не происходит разрушения аминокислот. Однако цветные реакции обладают большой чувствительностью. [3]
Чтобы сохранить результаты анализа, отмечают карандашом положения аминокислот. [4]
В настоящее время известно несколько десятков актиномицинов, отличающихся строением или положением аминокислот, входящих в их состав. Актиномицины очень активны в отношении многих грамположительных бактерий, но они не нашли практического применения из-за высокой токсичности; их смертельная доза для человека ( при подкожном введении) составляет всего лишь около 50 мг. [5]
 |
Представление аминокислотных последовательностей. [6] |
Вариабельность определяется числом различных аминокислот, встречающихся в данном положении, отнесенным к частоте появления обычно наблюдаемой в этом положении аминокислоты. [7]
Рас-тзорнтели, полностью смешивающиеся с водой, должны содержать строго определенный и не слишком высокий процент воды, так как скорость движения аминокислот зависит от насыщенности растворителя водой. Положение аминокислот на проявленной хроматогримме целиком зависит от растворителя. [8]
Высушенную бумажную хроматограмму опрыскивают спиртовым раствором нингидрина, а затем нагревают в сушильном шкафу. Положение аминокислот выявляется по образованию фиолетовых пятен. [9]
Информационная РНК содержит четыре типа оснований, а белок обычно содержит двадцать различных типов аминокислот. Поэтому отдельное основание не может контролировать положение определенной аминокислоты в белковой цепи, так как при этом четыре основания могли бы контролировать только четыре аминокислоты. Комбинация АЦ отличается от комбинации ЦА вследствие направленности 3 5-диэфирной связи остатка фосфорной кислоты. [10]
Важность этой реакции определяется не только тем, что она представляет собой качественную пробу, но и тем, что при этом образуется поглощающее свет вещество, которое можно определить количественно с помощью автоматического аминокислотного анализатора. Эту цветную реакцию используют также для установления присутствия и положения аминокислот после разделения их с помощью хроматографии на бумаге ( гл. [11]
Специализация белков создает предпосылки для исследований на уровне организма. Имеется много свидетельств тому, что адаптивная эволюция происходит прежде всего в результате изменений во взаимных отношениях структурных генов, а не в замещениях аминокислот в продуктах этих генов. В свете этой гипотезы увеличивается значение специализации белков для построения филогенетического дерева, поскольку предполагается, что положения аминокислот в полипептидной цепи являются признаками, не зависящими от эволюционных скачков. Таким образом, исследование специализации белка создает основу для более систематического изучения эволюции поведения и эволюции морфологии; это особенно важно для таксонов, которые бедны сведениями об ископаемых вариантах. [12]
Бумажные проводники, подводящие ток от электродной камеры, прижимают к краям носителя. Проводники, сделанные из прочной хроматографической бумаги, заворачивают в мембраны для диализа размером 20X20 мм ( тип Kalle), предохраняющие проводники от пересыщения элек-трофоретическим носителем. Проводники и носитель ( бумагу) прижимают полиэтиленовым мешком со сжатым воздухом при давлении 0 05 кГс / см2 и соединяют электроды с источником питания на 5000 В. После высушивания в токе теплого воздуха при 30 - 50 С для полного удаления кислот ( не менее чем в течение часа) большую часть катодного и анодного краев отрезают, а квадрат с образцами разрезают параллельно направлению электрофореза на 3 полоски, каждая из которых состоит из трех квадратов. Положение индикатора не идентично положению аминокислот. Примерно через 2 ч хроматографию заканчивают, бумажные цилиндры разворачивают и полоски высушивают в токе воздуха. Затем полоски протягивают через 0 2 - - 1 % - ный раствор нингидрина в ацетоне. Этот тест более чувствителен на пептиды, но дает менее стабильную окраску и может быть использован после того, как отпечатки пальцев обнаружены нингидрином. [13]
На один из углов этого листа наносят каплю анализируемого раствора смеси веществ. Затем этот лист одним краем опускают в фенол. По мере движения фенола по бумаге происходит частичное разделение веществ. Для более полного их разделения лист бумаги высушивают, затем поворачивают на 9 и уже другим краем опускают во второй растворитель ( например, коллидин), который и производит дальнейшее разделение веществ. Затем бумагу снова высушивают и положение аминокислот определяют опрыскиванием бумаги реактивом, дающим окрашенные соединения с анализируемыми веществами. Полученная таким способом хроматограмма представляет собой совокупность цветных пятен, расположенных на поверхности бумаги. [14]
На один из углов этого листа наносят каплю анализируемого раствора смеси веществ. Затем этот лист одним краем опускают в фенол. По мере движения фенола по бумаге происходит частичное разделение веществ. Для более полного их разделения лист бумаги высушивают, затем поворачивают на 90 и уже другим краем опускают во второй растворитель ( например, коллидин), который и производит дальнейшее разделение веществ. Затем бумагу снова высушивают и положение аминокислот определяют опрыскиванием бумаги реактивом, дающим окрашенные соединения с анализируемыми веществами. Полученная таким способом хроматограмма представляет собой совокупность цветных пятен, расположенных на поверхности бумаги. [15]
Страницы: 1 2