Цветная проба
Cтраница 2
Метод изучения констант распределения особенно удобен для идентификации антоцианинов, различающихся по остатку сахара, и его следует предпочесть исследованию спектров поглощения или цветным пробам. Этот способ дает, например, возможность отличить хлористый 3-р-галактозидо - пеонидин от хлористого 3-р-глюкозидоцианидина [170], а также диглю-козиды от глюкозидов пентоз. [16]
В случае марганца окислительный плав имеет сине-зеленую окраску. Характерна следующая цветная проба. Нагревают раствор с концентрированной азотной кислотой, охлаждают, обрабатывают небольшим количеством периодата натрия и снова нагревают. [17]
К работам, в которых описываются цветные реакции для идентификации ускорителей, относятся работы Блумфилда [26, 27], Брока и Лауса [31], Бурмистрова [38, 39], Хюммеля [ 122, стр. Бомингер и Поултон [14] описали цветные пробы на 2-меркаптобензотиазол; Фрей [93] и Моррисон и Шефферд [170] предложили методики для обнаружения тиурамдисульфи-да. [18]
Применяют 2-фазный метод подавления метаболизма при постановке цветной пробы с медленно размножающимися вирусами, которые в простой колориметрической клеточной системе не успевают повлиять яа рН среды, так как кислые продукты в результате метаболизма клеток меняют цвет быстрее, чем наступает значительная дегенерация клеточного слоя. [19]
Однако в дальнейшем Гилман и Шульце [5], используя цветную пробу с кетоном Михлера, показали, что при реакции Бекмана в растворе образуются только следы йодистого этилкальция, а выпадающий осадок представляет собой эфират йодистого кальция. [20]
Следующим этапом в большинстве схем идентификации является получение особых сведений о присутствии или отсутствии обычно встречающихся функциональных групп. Для пробной идентификации неизвестных веществ применяют испытания на разделение, основанные на различии в растворимости, и химические цветные пробы. [21]
 |
Флегмона слезного мешка. [22] |
Кардинальным признаком дакриоцистита является выделение слезы и гноя из слезных точек при пальпаторном давлении на область слезного мешка. Если проводилось местное медикаментозное лечение дезинфицирующими каплями, этого симптома может не быть. Цветные пробы и промывание слезных путей помогают установить диагноз. Иногда дакриоцистит новорожденных протекает по типу острого флегмонозного воспаления. [23]
К И 8 г ( 0 05 моля) п-дибромбензола при 0 С прибавляют 0 05 моля w - бутиллития. Тем временем реакционную смесь охлаждают до - 20 С и вводят 19 3 г ( 0 05 моля) хлористого трифенилолова в 75 мл сухого бензола. К концу прибавления цветная проба Гилмана отрицательна. Эфирный слой отделяют, высушивают сульфатом натрия, фильтруют и перегоняют. [24]
Одноатомные фенолы вполне стабильны, а многоатомные легко окисляются, особенно когда они содержат гидроксильные группы в орто - или пара - положении по отношению друг к другу. Их Щелочные растворы поглощают кислород из воздуха и быстро темнеют. В литературе описано много цветных проб на фенолы, среди которых имеются проба с хлористым железом, реакция Либермана, реакция сочетания с диазотированной сульфо-кислотой или другими ароматическими аминами с образованием азокра-сителя. Некоторые из этих проб относительно неспецифичны, но обычно для идентификации фенольной фракции в элюатах, отобранных после хрома-тографической колонки, используют какое-либо сочетание проб. [25]
Бутенандт [ 295а, 306 ] установил, что кинуренин имеет важное значение в образовании глазного пигмента Drosophila melanogaster. Он показал, что при глазной цветной пробе кинуренин может быть заменен окситриптофаном, хотя физиологическое действие последнего несколько слабее, чем действие кинуренина. На основании приведенных данных Бутенандт и его сотрудники пришли к заключению, что окситриптофан представляет собой прокинуренин и что в этом смысле подтверждается точка зрения Котаке, согласно которой окситриптофан является промежуточным соединением в образовании кинуренина. [26]
В кроликах обращение конфигурации эстрогена при С17 происходит, невидимому, через промежуточное образование эстрона. Нет уверенности в том, что кролики выделяют эстриол после добавления им в пищу эстрадиола. Пинкус 18 представил доказательства ( основанные на проведении цветной пробы Давида с соответствующей фракцией), что такое превращение происходит у крольчих ( функционирующая матка), однако другим исследователям48 не удалось подтвердить этот результат. [27]
Для реакции применяют как перевиваемые культуры клеток ( СОЦ, Нер-2, Hela, КЭМ, FL и др.), так и первичные клетки почечного эпителия обезьян и др. Последним отдают предпочтение, так как их метаболическая активность наиболее однородна. Клетки выращивают обычным способом в матрицах объемом 1 л до образования сплошного монослоя. Срок хранения клеток определяется их видовой принадлежностью. Суспензия почечных клеток обезьян может быть применена для цветной пробы в течение трех недель хранения в холодильнике, хотя количество жизнеспособных клеток в ней падает. Клетки перевиваемых линий следует использовать в течение первой недели после снятия с матрацев. Успех цветной реакции зависит от правильного подбора оптимальной посевной дозы клеток, так как при высокой концентрации клеток в единице объема питательной среды рН быстро сдвигается в кислую сторону еще до появления цитопатогенного действия вируса, а при низкой концентрации клеток рН изменяется медленно и слабо. [28]
Многие соединения фуранового ряда могут быть открыты по характерной окраске, которую их пары придают сосновой лучинке, смоченной соляной кислотой. Соединения ряда фурана обычно окрашивают лучинку в зеленый цвет, однако это не всегда бывает так. Наличие водорода в а-положении играет некоторую, хотя и незначительную роль в окраске, появляющейся при пробе. Так как проба с л-диметиламинобензальдегидом ( Эрлих), обычно применяемая для соединений ряда пиррола, получается и с некоторыми производными фурана, то очевидно, что при оценке результатов таких цветных проб должна быть проявлена осторожность. [29]
Реакцию - прекращают нейтрализацией раствора, и смесь подвергают диализу для удаления избытка нитрита. При этих условиях аминогруппы реагируют быстро, а вторичные процессы ( образование нитрозо - и диазопроизводных фенольных групп) минимальны. Другими нежелательными реакциями, которые могут происходить при исчерпывающем дезаминировании, являются реакции, затрагивающие имидазольные, индольные, гуанидинные и дисульфидные группы белков. Они считают, что дезаминирование отличается от диазотирования в двух отношениях: первый процесс протекает гораздо быстрее и в присутствии избытка нитрита является реакцией второго ( псевдобимолекулярного) порядка, в то время как реакция с тирозином протекает по первому ( псевдомономолекулярному) порядку. Так, Сайзер [53] нашел, что инактивирование химотрипсина азотистой кислотой при рН 4 6 и 0 является реакцией первого порядка. На этом основании он пришел к выводу, согласно которому для проявления активности химотрипсина не требуются ни сульф-гидрильные, ни аминогруппы и существенное значение имеет только тирозин. Однако Френкель-Конрат и Олькотт упоминают о неопубликованных экспериментах, в которых было показано, что при обработке яичного альбумина азотистой кислотой при рН 4 окисляется большая часть - SH-групп, а фенольные и аминогруппы подвергаются лишь незначительному воздействию. В то же время в случае сывороточного альбумина было обнаружено частичное уменьшение содержания функциональных групп двух последних типов. Эти наблюдения дополнительно свидетельствуют в пользу уже подчеркивавшегося утверждения о том, что реакционная способность данной боковой цепи может быть различной в разных белках. Поэтому при интерпретации вопроса о степени участия в реакции тирозина, измеряемой с помощью цветной пробы, следует соблюдать осторожность. [30]
Страницы: 1 2