Cтраница 1
Шестая пробирка, развивающая окраску, содержит 15 мл концентрированной FhSOi и 50 - 100 мг очищенного / г-оксидифе-нила. Пробирку помещают в ледяную баню при 0 на все время просасывания воздуха. [1]
К концу просасывания воздуха шестую пробирку, которая еще содержит значительное количество нерастворенного я-оксидифенила, помещают точно на 2 мин. Другой вариант метода состоит в перенесении содержимого шестой пробирки в кювету. [2]
Мутная вода без золя гидроокиси железа в шестой пробирке служит контролем. Содержимое пробирок перемешивают и оставляют стоять Некоторое время. [3]
В пять пробирок одинакового диаметра и из стекла одинакового цвета наливают эталонного раствора, содержащего в 1 мл 0 001 г препарата, в следующей последовательности; 0 2; 0 6; 1 0; 1 4; 2 0 мл, а в шестую пробирку 1 мл раствора А. Во все пробирки прибавляют по 0 5 мл 0 5 % раствора нитрита натрия и 0 2 мл 3 % раствора соляной кислоты, взбалтывают их и оставляют стоять в течение 5 минут. Затем проверяют наличие избытка нитрита натрия, используя йодкрахмальную бумагу. При положительной реакции на нитрит натрия избыток удаляют прибавлением 1 мл 40 % раствора мочевины. [4]
Затем в пробирки добавляют: в первую - 4 капли 10 % - ного ( по объему) водного раствора яичного белка, во вторую - 4 капли 0 5 % - яого водного раствора гидрата окиси калия, в третью - 4 капли 1 % - лого водного раствора мыла, в четвертую - 1 каплю 10 % - ного водного раствора углекислого натрия ив пятую-4 капли желчи. Шестую пробирку оставляют для контроля. [5]
Зная приблизительное значение рН испытуемого раствора, подбирают по таблицам индикатор, зона перехода окраски которого пригодна для данных определений, а также буферную смесь с такими пределами зоны рН, чтобы эта зона распространялась на достаточное расстояние как в сторону более кислой, так и в сторону более щелочной реакции. В шестую пробирку наливают то же количество мл исследуемого раствора. Во все эти пробирки прибавляют по 0 05 мл индикатора. Для правильности измерений необходимо, чтобы концентрация индикатора во всех пробирках была одинакова. Затем сравнивают окраску исследуемого раствора с окраской буферных растворов. Сравнение нужно производить тотчас же по прибавлении индикатора, так как при стоянии цвет многих индикаторов изменяется. [6]
К концу просасывания воздуха шестую пробирку, которая еще содержит значительное количество нерастворенного я-оксидифенила, помещают точно на 2 мин. Другой вариант метода состоит в перенесении содержимого шестой пробирки в кювету. [7]
Каждую из пробирок со смесью энергично встряхивают. При этом в первых пяти пробирках растительное масло растворяется ( в ацетоне, бензине, бензоле, хлороформе и эфире), а в шестой пробирке, содержащей воду, происходит образование эмульсии масла, которая быстро расслаивается. [8]
Пять из них закрывают цилиндрами из цветного целлофана: фиолетового, синего, зеленого, желтого и красного. Шестую пробирку оставляют в качестве контроля. Все пробирки выставляют на яркий солнечный или электрический свет. Через несколько минут регистрируют степень потемнения осадков. [9]
Помещают на короткое время все шесть пробирок в горячую водяную баню для расплавления жира. Если жир жидкий, то нагревание в бане излишне. Взбалтывают содержимое всех пробирок, ставят их по порядку в штатив и наблюдают образование в первых пяти пробирках относительно устойчивой эмульсии, а в шестой пробирке ( контроль) - расслоение неустойчивой эмульсии на жир и воду. [10]
Помещают на короткое время все шесть пробирок с содержимым в горячую водяную баню для расплавления жира. Взбалтывают содержимое всех шести пробирок, ставят их по порядку в штатив и наблюдают образование в первых пяти пробирках относительно более устойчивой эмульсии, а в шестой пробирке ( контроль) - расслоение неустойчивой эмульсии на жир и воду. [11]
Для определения по этому методу прежде всего строят калибровочную кривую: 0 25 г 2-метил - 4 6-динитрофенола растворяют в 10 % - ном растворе едкого натра и разбавляют в мерной колбе до объема 250 мл. К 25 мл полученного раствора прибавляют 10 % - ный раствор едкого натра до объема 100 мл. В пять пробирок вносят последовательно 0 5; 1 0; 2 0; 4 0; 6 0 мл этого раствора. Далее в каждую пробирку градуированной пипеткой добавляют такое количество 10 % - ного раствора едкого натра, чтобы общий объем жидкости в каждой пробирке составлял 10 мл. К полученным растворам прибавляют по 5 0 мл этилового спирта и 1 0 мл 1 % - ного водного раствора глюкозы. После этого содержимое пробирок хорошо перемешивают и выдерживают на водяной бане при 60 Св течение 20 мин. Одновременно приготовляют контрольный раствор, для чего к 10 мл 10 % - ного раствора едкого натра в шестой пробирке прибавляют 5 мл спирта и 1 мл раствора глюкозы и обрабатывают так же, как и пробы с препаратом. После охлаждения водой до комнатной температуры содержимое каждой пробирки переносят в соответствующий градуированный цилиндр и разбавляют в нем дистиллированной водой до объема 100 мл. Растворы тщательно перемешивают и измеряют поглощение света растворами ( экстинкцию) при помощи колориметра в кювете с толщиной слоя 1 см. Измерения производят относительно контрольного раствора, не содержащего 2-ме-тил - 4 6-динитрофенола. По полученным данным строят кривую зависимости интенсивности поглощения света растворами от содержания в них 2-метил - 4 6-динитрофенола. В исходных растворах соответственно содержится 0 125, 0 25, 0 5, 1 00 и 1 50 мг 2-метил - 4 6-динитрофенола. [12]