Продолжительность - инкубация
Cтраница 2
Из данных табл. 12 и 13, следует, что общее-содержание белка в отрезках за 24 часа инкубации снижается в условиях как гипотонической, так и слабогипертонической среды. С увеличением продолжительности инкубации в условиях гипотонической среды ауксин не влияет, а в среде с манни-том тормозит снижение общего содержания белка в отрезках. [16]
Инкубацию эмбрионов осуществляют в аппаратах Вей-са при плотности 70 тыс. шт. Оптимальная температура воды - 0 5 - 0 6 С, сумма тепла - 70 - 90 градусо-дней. В этих условиях продолжительность инкубации составляет 140 - 150 дней. Массовый выклев личинок происходит во второй половине апреля при повышении температуры воды до 3 - 3 5 С. Неблагоприятно воздействуют на результаты инкубации повышение и колебания температуры воды. Выклюнувшихся личинок выдерживают 3 - 4 дня в ваннах или лотках, а затем выпускают в водоемы, не ожидая освобождения их ото льда. [17]
Освободиться от белков можно несколькими путями. Однако это ведет к усложнению методики. Другой путь - сокращение продолжительности щелочной инкубации. [18]
Теоретически можно представить, что даже очень слабое анти-холинэстеразное вещество может затормозить холинэстеразу на 100 % при достаточно продолжительном контакте. На практике такие явления чрезвычайно редки [76] из-за одновременного процесса неспецифического фосфорилирования; вследствие этого остатки аминокислот, не входящие в активный центр фермента, могут связывать ФОС. Этот параметр, а также величина р / 50 ( отрицательный десятичный логарифм / so) изменяются во времени, поэтому они могут быть определены только при условии, если продолжительность инкубации известна. Однако параметр / 50 значительно более распространен в литературе, так как его размерность ( молярная концентрация) является более наглядной и облегчает вычисления в уме, а размерность бимолекулярной константы скорости kz ( л-моль-1 - мин-1) смущает всех своей сугубой химично-стью. В общем продолжительность инкубации, описанная в литературе, не слишком сильно отличается в разных работах ( обычно эти различия лежат в пределах 1 час), так как почти всегда весь опыт - приготовление растворов, инкубация и определение активности - - занимает несколько часов. [19]
В период инкубации в аппаратах поддерживают такой водообмен, при котором не происходит вымывания икры и в то же время не образуются застойные зоны в аппаратах. При большом количестве мертвых икринок их отбирают после окончания процесса гаструляции, то есть через 13 ч после начала инкубации, отсасывая резиновым шлангом. При этом водообмен в аппаратах уменьшают наполовину. Продолжительность инкубации зависит от температуры воды, поступающей в аппараты. При оптимальной температуре в пределах 21 - 25 С она составляет 23 - 33 ч, сокращаясь до 17 - 19 ч при повышении температуры воды до 27 - 29 С. Эта зависимость относится ко всем видам растительноядных рыб. [20]
По окончании инкубации трубка служит микроинпеткоп. Продолжительность инкубации для мелнбиазы при 37 составляет 72 iiic, а для диастаза - минимум Ш8 час. При достаточно большом количестве пробы ферментативный гидролиз Сахаров проводят обычным методом инкубации их с соответствующим ферментом в буферном растворе. [21]
Теоретически можно представить, что даже очень слабое анти-холинэстеразное вещество может затормозить холинэстеразу на 100 % при достаточно продолжительном контакте. На практике такие явления чрезвычайно редки [76] из-за одновременного процесса неспецифического фосфорилирования; вследствие этого остатки аминокислот, не входящие в активный центр фермента, могут связывать ФОС. Этот параметр, а также величина р / 50 ( отрицательный десятичный логарифм / so) изменяются во времени, поэтому они могут быть определены только при условии, если продолжительность инкубации известна. Однако параметр / 50 значительно более распространен в литературе, так как его размерность ( молярная концентрация) является более наглядной и облегчает вычисления в уме, а размерность бимолекулярной константы скорости kz ( л-моль-1 - мин-1) смущает всех своей сугубой химично-стью. В общем продолжительность инкубации, описанная в литературе, не слишком сильно отличается в разных работах ( обычно эти различия лежат в пределах 1 час), так как почти всегда весь опыт - приготовление растворов, инкубация и определение активности - - занимает несколько часов. [22]
 |
Приспособление для фильтро -. вания пурпурогаллина. [23] |
В две колбы Эрленмейера емкостью 100 мл наливают по 5 мл 2 5 % - кого раствора пирогаллола, 2мл 1 % - кого раствора пероксида водорода и 18 мл воды. Затем в эти колбы добавляют пипеткой Мора по 25 мл фильтрата. После охлаждения приливают те же растворы, что и в рабочем опыте. Колбы закрывают пробками и оставляют на определенный срок, обычно на 20 ч в термостате при 25 С. Для получения сравнимых результатов продолжительность инкубации и температура должны быть постоянными. В течение указанного времени инкубации выпадает заметный бурый осадок в рабочих пробах и весьма слабый в контрольных. Жидкость в рабочих опытах имеет более интенсивную окраску, чем в контрольных. [24]
Для определения ингибиторов раствор фермента известной концентрации заданное время инкубируют с ингибитором. Затем вводят субстрат и определяют обычным путем остаточную активность. Период инкубации существенно зависит от скорости взаимодействия ингибитора с ферментом. Однако преимуществом этих реакций является то, что эти соединения весьма мало подвержены гидролизу, а также возникновению других побочных реакций. В противоположность фосфорилтиохолинам метилфторфосфорилхолины быстро реагируют с ферментом, поэтому продолжительность инкубации очень мала. [25]
В течение развития у зародыша чередуются периоды усиленного роста тканей и их дифференцировки. При этом меняется характер обмена веществ. Наиболее интенсивен обмен во время формирования органов и тканей. В этот период повышается чувствительность зародыша к внешним воздействиям ( колебания температуры, содержание кислорода и др.), что необходимо учитывать при работе с икрой. Поэтому инкубацию икры каждого вида рыб нужно проводить при определенных условиях внешней среды. Продолжительность инкубации в значительной мере зависит от температуры воды: чем она выше, тем развитие происходит быстрее. У рыб, выметывающих икру весной и летом при высоких температурах, развитие длится несколько дней; у рыб с осенне-зимним нерестом - несколько месяцев. [26]
После завершения обесклеивания икры подачу воздуха прекращают и в аппарат подают воду. Причем ток воды увеличивают постепенно. Инкубацию икры проводят при температуре. Икру от каждой самки следует загружать в отдельный аппарат. При этом время загрузки первого и последнего аппаратов, расположенных на одной рыбоводной стойке, не должно превышать 4 ч, что обеспечивает в последующем цикле единовременный переход на внешнее питание предличинок, находящихся в одном лотке. В процессе инкубации необходимо отбирать мертвую икру. Продолжительность инкубации икры зависит от температуры воды. [27]
При определении ВПК подготовленная соответствующим образом испытуемая вода разливается в несколько ( специальных) кислородных склянок с притертыми пробками. Склянки заполняются с таким расчетом, чтобы в них не было пузырьков воздуха. В одной ( или двух) из склянок определяют растворенный кислород в момент разлива проб, а в других после инкубации в течение определенного времени. ВПК определяют по разности кислорода в пробах до и после инкубации. Если пробы разбавлялись, то при расчете ВПК учитывается это разбавление. Результаты определения биохимического потребления кислорода выражают в миллиграммах на 1 л воды. Индекс у ВПК означает продолжительность инкубации. [28]
Структурное соответствие ингибитора и субстрата становится ясным из рассмотрения первой и третьей схем. Для названных ранее фосфорорганических соединений становится также понятной и связь между структурой и ингибирующим действием. Диизопроп-оксифосфорилтиохолин по сравнению с диэтоксифосфорилтиохоли-ном является более слабым ингибитором АХЭ. Так как расстояние между анионным и эстеразным участками активного центра у АХЭ равняется 4 50 нм, то слабое ингибирующее действие первого соединения легко объясняется пространственными затруднениями, вызываемыми наличием изопропоксигруппы. Взаимная подгонка, существующая между молекулами субстрата и ингибитора, с одной стороны, и фермента, с другой ( см. табл. 7), проявляется, очевидно, в специфичности действия последнего на субстрат, что может быть проиллюстрировано следующими примерами селективного ингибирования. Фосфорорганические соединения являются конкурирующими ингибиторами и, аналогично субстрату, находятся во взаимодействии по меньшей мере с одним из одинаковых участков фермента. Из этого следует, что в присутствии субстрата с увеличением его концентрации скорость реакции ингибитора с ферментом уменьшается. Следовательно, при определении ингибитора вначале необходимо фермент инкубировать с ингибитором, и после этого ввести субстрат для определения остаточной активности фермента. Следующим, также важным для аналитических методов обстоятельством является различная скорость взаимодействия фосфорорганических соединений с ферментом, что следует учитывать при установлении продолжительности инкубации. Метил-фторфосфорилхолины весьма быстро реагируют с ферментом, ме-тилалкоксифтор ( или циан -) фосфонаты ( зарин, зоман) - несколько медленнее, а фосфорилтиохолиновые соединения еще более медленно. [29]
Страницы: 1 2