Cтраница 2
Количественные изменения внутреннего трения и степени диссоциации, которые вносит температура, могут привести и к качественно отличным новым явлениям. Число ионов, участвующих в прохождении тока при высоких температурах, может стать сравнимым с общим количеством того вещества ( Na2Si03) по Вар-бургу), которое способно диссоциироваться. [16]
Количественные изменения внутреннего трения и степени диссоциации, которые вносит температура, могут привести и к качественно отличным новым явлениям. Число ионов, участвующих в прохождении тока при высоких температурах, может стать сравнимым с общим количеством того вещества ( Na2Si03, по Вар-бургу), которое способно диссоциироваться. [17]
Нортропом были выделены первые ферменты в кристаллической форме - уреаза, пепсин и трипсин, которые, как было установлено, представляли собой чистые белки. В 1930 - х годах были выделены внутриклеточные ферменты - желтый фермент Вар-бурга и алкогольдегидрогеназа, полученная в кристаллическом виде. [18]
Полоску разрезают на части равной длины. Содержание фермента в каждой части определяют по его активности. Например, распределение уреазы на бумажной хроматограмме может быть исследовано манометрически на аппарате Вар-бурга. [19]
Структура важна, но опыт биохимии дает примеры совсем иного порядка. В период, когда ученые не могли ничего сказать о путях протекания дыхательного процесса, Вар-бург с восторгом говорил о роли структуры для клеточного дыхания. [20]
На основании некоторых явлений, не находящихся в непосредственной связи с катализом, известно, что в результате связывания с белком свойства вещества могут подвергаться глубокому изменению. Наоборот, гемоглобин, образующийся в результате связывания тема с белком - глобином, является растворимым в воде веществом, образующим обратимое соединение с молекулами кислорода - оксигемоглобин, в котором железо сохраняет двухвалентное состояние. Известны и другие протеиды, содержащие связанный гем, но с другими белками, чем с глобином, например пероксидаза, каталаза, цитохром и дыхательный фермент Вар-бурга. Ни один из этих протеидов не связывается обратимо с кислородом, но некоторые из них обратимо окисляются в формы с трехвалентным железом. Естественно, что эти различия в поведении обусловлены характером соответствующих белков, так как простетическая группа - гем - одна и та же во всех случаях. [21]
Чаще всего используется в такого рода исследованиях так называемый аппарат Варбурга. Это прибор, первоначально сконструированный для измерения дыхания, был в 1919 г. приспособлен Варбургом [306] для измерения фотосинтеза. Первый, дыхательный, вариант прибора был непригоден для этих целей по ряду причин. Вар-бурга, предназначенный для изучения дыхания. Шесть или двенадцать таких сосудиков с манометрами погружают в водяную баню, в которой поддерживается постоянная температура с точностью не менее 0 02 С. При дыхании растительного материала кислород постепенно поступает в раствор, а СО. [22]
Когда внешняя концентрация COz, P, настолько велика, что видимая ассимиляция начинает лимитироваться светом или температурой, становится необходимым ввести поправку на изменение концентрации на поверхности хлоропластов ( которая также будет зависеть от Lit); однако, пока dq / dt приблизительно пропорционально Р, эта поправка, очевидно, не имеет большого значения. Михаэлиса - Ментен, предложенным для описания связи между скоростью реакции и концентрацией субстрата в системе с одним ферментом. Вар-бург [306] в 1919 г. нашел, что уравнение Михаэлиса - Ментен довольно точно описывает зависимость ассимиляции Chlorelta от концентрации СО2 при высокой интенсивности света. Однако в процессе фотосинтеза участвуют, как теперь известно, многие ферменты, и только тот факт, что какое-либо уравнение удовлетворительно подтверждается экспериментальными данными, еще не обязательно означает, что это уравнение отражает именно фундаментальный механизм рассматриваемого процесса. [23]
Позже, в 1939 году, Эмерсон и Льюис [81], применявшие тот же манометрический метод Варбурга ( гл. Проведя измерения через промежутки времени меньше одной минуты, авторы обнаружили резкое увеличение скорости изменения в начале каждого периода освещения и снижение этой скорости в начале каждого темнового периода ( фиг. Вар-бург и Негелейн измеряли давление только в те моменты времени, которые соответствуют на фиг. [24]