Вариант - жидкостная хроматография
Cтраница 3
 |
Препаративное разделение смеси двух преобладающих компонентов. [31] |
Обычно длина колонок составляет 25 - 150 см, а внутренний диаметр аналитических колонок - от 1 до 8 мм. Колонки диаметром менее 8 мм трудно заполнять без достаточного опыта. Перечень сорбентов, применяемых для заполнения колонок в жидкостной хроматографии высокого давления, приведен на рис. 7.24. Типичные результаты разделения на колонке с ц-порасилом показаны на рис. 7.25. На этом рисунке следует отметить, что полное разделение трех изомеров положения достигнуто менее чем за 1 мин. Весьма полезный вариант жидкостной хроматографии высокого давления представлен на рис. 7.26. Показанный на этом рисунке сорбент для так называемой обращенно-фазовой хроматографии позволяет разделять различные соединения неполярного характера. [32]
В некоторых работах разделение на неспецифических адсорбентах с помощью полярных элюентов было названо жидкостной хроматографией с обращенными фазами. Впервые этот вид жидкостной хроматографии был использован Болдингом [25] в 1948 г. для разделения метиловых эфиров жирных кислот. В настоящее время таким способом разделяют конденсированные ароматические углеводороды [26, 27], витамины [27, 28], инсектициды [29], антибиотики [30], стероиды [26] и многие другие вещества. Этот вариант жидкостной хроматографии был также назван обращенно-фазовой хроматографией [29, 31-33] в том смысле, что в жидкостно-адсорбционной хроматографии обычно применяли специфический адсорбент и неспецифический элюент, в то время как в этом варианте - наоборот. Однако термин обращенно-фазовая хроматография имеет лишь формальный характер и этот вариант хроматографии с точки зрения теории адсорбции из растворов ни в коей мере не является необычным или обращенным. Этот неудачный термин не способствует раскрытию молекулярной основы разделения, поэтому в дальнейшем он нами не применяется. По существу же различие между обычной и обращенно-фазовой жидкостной хроматографией заключается в том, что в первом случае разделение происходит преимущественно за счет различий в специфических взаимодействиях компонентов и элюента со специфическим адсорбентом, а во втором случае - преимущественно за счет различий в неспецифических взаимодействиях молекул компонентов и элюента с адсорбентом, а также, если это имеет место, - за счет различий в специфических взаимодействиях молекул компонентов с элюентом. [33]
Изучение первых хроматографических работ Цвета позволяет достаточно четко представить себе основные этапы открытия им проявительного варианта хроматографии. Изменяя растворитель и смещая адсорбционные равновесия. Цвет последовательно переводил вновь в раствор различные пигменты смеси. Поскольку порошок надо было фильтровать, - Цвет стал помещать его в воронку с фильтром и постепенно перешел к использованию динамического режима, совместив операции фильтрования и адсорбции, и стал осуществлять разделение сначала по чисто фронтальному варианту. Поскольку в статических опытах Цвет использовал промывание растворителем фильтровальной бумаги с пигментом для отмывки от каротина, ученый после частичного разделения окрашенных слоев стал проводить промывку растворителем в динамических условиях и получил про-явительный вариант жидкостной хроматографии, сразу отметив преимущества этого варианта по четкости разделения по сравнению с фронтальным вариантом. [34]
Страницы: 1 2 3