Восходящий вариант

Cтраница 1

Осуществление восходящего варианта хроматографии не требует сложного оборудования, и исключена опасность перетекания растворителя. Как только фронт растворителя подойдет к верхнему концу бумаги, хроматографирование само собой прекращается. [1]

Хроматограммы чаще всего элюируют по восходящему варианту. Для закрепленных слоев обычно используют высокие узкие камеры, занимающие мало места; насыпные слои элюируют в плоских камерах. В качестве последних годятся чашки Петри с пришлифованным к крышке верхним краем. Некоторые специальные варианты элюирования приведены в разд. На рис. 13 схематически изображено проявление закрепленных и незакрепленных ( насыпных) слоев в самом обычном варианте. [2]

Прибор для восходящей одномерной хроматографии на бумаге. [3]

Нисходящая хроматография применяется реже, и ее методическое оформление подобно восходящему варианту, только элюент движется сверху вниз. [4]

Разделение в БХ основано на том же принципе, что и в ТСХ, так как хроматографическая бумага может быть импрег-нирована твердыми адсорбентами. По восходящему варианту полоска бумаги нижним краем опускается в растворитель, налитый на дно камеры. Поскольку в этом случае растворитель не поднимается выше чем на 20 - 22 5 см, эффективность разделения ограничена. При нисходящем способе растворитель помещают в верхней части камеры в специальном сосуде. Путь растворителя не ограничен; он может даже стекать с нижнего края листа бумаги. Иногда используют вариант круговой хроматограммы, при котором на хроматограмме получают не пятна, а концентрические круги. Для получения такой хроматограммы из бумаги вырезают круг и в центр его подают пробу и растворитель. Методы качественного и количественного анализа БХ и ТСХ аналогичны, однако при локализации зон необходимо более тщательно подбирать проявляющие реактивы, поскольку хроматографическая бумага может содержать примеси. При методе БХ камера для разделения должна иметь несколько больший объем, чем при ТСХ. Хроматографическая бумага выпускается различных марок в зависимости от способа обработки, плотности и толщины. Сорта бумаги, обеспечивающие быстрое прохождение растворителя, сокращают время анализа, но дают нечеткое разделение; обратное явление наблюдается для бумаг с медленным прохождением растворителя. [5]

Таким образом, копия выдана в обратном порядке. Если поразмыслить, то станет понятно, что это неизбежно. Действительно, восходящий вариант должен начать построение списка с первых членов еще до того, как ему станут известны последние. Нисходящий вариант откладывает построение до тех пор, пока не станет известным последний член. [6]

Если на бумагу нанесены полиамидные смолы и разделение происходит по ионообменному механизму, то в качестве элюента применяют воду или смеси воды с полярными органическими соединениями. При использовании чистой бумаги элюентом может быть любая жидкость, способная к перемещению по бумаге, чаще всего смесь воды и органических соединений. Критерием при выборе элюента может служить растворимость в нем определяемого вещества. В качестве относительного универсального элюента для БХ можно рекомендовать систему, представляющую собой верхний слой смеси уксусная кислота - н-бутанол - вода ( 1: 4: 5) после расслоения. На рис. 1.19 представлены два вида хроматографии в зависимости от направления движения элюента. На рис. 1.19, а изображен восходящий вариант разделения, при котором лист бумаги опускают в элюент на глубину 5 мм и подвижная фаза поднимается по бумаге за счет капиллярных сил. Эффективность разделения этого метода ограничена, поскольку элюент не поднимается выше чем на 20 - 22 5 см из-за действия силы тяжести. Для проведения нисходящего метода ( рис. 1.19, б) требуется несколько более сложное оборудование, в том числе емкость для элюента, укдепленная в верхней части камеры для разделения, а также стержень для предотвращения сифонного эффекта. В этом методе силы тяготения помогают, а не мешают разделению. Rf, так как длина пути разделения не ограничена и элюент может даже стекать с нижнего края листа бумаги. Лист бумаги можно размещать и горизонтально как в линейном, так и в круговом вариантах. В линейную горизонтальную систему элюент подают с помощью бюретки или фитиля на один из краев бумажной полосы. В круговом варианте пробу и элюент подают в центр хромато-граммы. Одним из преимуществ горизонтального варианта является относительная компактность оборудования, позволяющая помещать систему целиком в сушильный шкаф, термостат или холодильник. Двумерное разделение проводят так же, как и в ТСХ: после лроведения процесса в одном направлении хроматограмму высушивают и разделение проводят новой системой растворителей в направлении под прямым углом к первому. [7]

Страницы: 1