Cтраница 2
Стоит только любую из этих схем повернуть на 90 по часовой стрелке, и обратное зеркальное изображение пот лученной после такого поворота таблицы будет представ - лять собой вертикальный вариант соответствующего ( исг ходного) горизонтального варианта TOBL же таблицы. [16]
В щели вносят кусочки фильтровальной бумаги, смоченной раствором исследуемого вещества, и проводят одномерный или двумерный электрофорез в горизонтальных или вертикальных установках. Преимущество горизонтального варианта - простота исполнения, вертикального - большая разрешающая сила. [17]
Если на бумагу нанесены полиамидные смолы и разделение происходит по ионообменному механизму, то в качестве элюента применяют воду или смеси воды с полярными органическими соединениями. При использовании чистой бумаги элюентом может быть любая жидкость, способная к перемещению по бумаге, чаще всего смесь воды и органических соединений. Критерием при выборе элюента может служить растворимость в нем определяемого вещества. В качестве относительного универсального элюента для БХ можно рекомендовать систему, представляющую собой верхний слой смеси уксусная кислота - н-бутанол - вода ( 1: 4: 5) после расслоения. На рис. 1.19 представлены два вида хроматографии в зависимости от направления движения элюента. На рис. 1.19, а изображен восходящий вариант разделения, при котором лист бумаги опускают в элюент на глубину 5 мм и подвижная фаза поднимается по бумаге за счет капиллярных сил. Эффективность разделения этого метода ограничена, поскольку элюент не поднимается выше чем на 20 - 22 5 см из-за действия силы тяжести. Для проведения нисходящего метода ( рис. 1.19, б) требуется несколько более сложное оборудование, в том числе емкость для элюента, укдепленная в верхней части камеры для разделения, а также стержень для предотвращения сифонного эффекта. В этом методе силы тяготения помогают, а не мешают разделению. Rf, так как длина пути разделения не ограничена и элюент может даже стекать с нижнего края листа бумаги. Лист бумаги можно размещать и горизонтально как в линейном, так и в круговом вариантах. В линейную горизонтальную систему элюент подают с помощью бюретки или фитиля на один из краев бумажной полосы. В круговом варианте пробу и элюент подают в центр хромато-граммы. Одним из преимуществ горизонтального варианта является относительная компактность оборудования, позволяющая помещать систему целиком в сушильный шкаф, термостат или холодильник. Двумерное разделение проводят так же, как и в ТСХ: после лроведения процесса в одном направлении хроматограмму высушивают и разделение проводят новой системой растворителей в направлении под прямым углом к первому. [18]