Пятна - вещество
Cтраница 1
Пятна веществ обнаруживают по характерной окраске. [1]
Вообще если на пластинке сразу после начала анализа появляются пятна вещества, то это вещество следует отнести к примесям, не входящим в состав образца. [2]
В соответствии с уравнениями ( 54 а б), максимальная разрешающая способность обеспечивается, когда пятна веществ с очень малым Rr ( - 0) переносятся как можно дальше ( при cRr 1), т.е. до самого конца разделяющего участка. При максимальном использовании длины разделяющего участка обеспечивается максимальное число переходов из фазы в фазу. Практические ограничения связаны с большими затратами времени ( возможно, даже в несколько дней) на перемещение веществ от Rr и 0 к cRr 1 и с тем, что число тарелок N не остается постоянным во время элюирования, а медленно и устойчиво снижается. [3]
Когда фронт растворителя пройдет 10 - 15 см, пластинку вынимают, отмечают положение фронта и открывают пятна хроматографировавшихся веществ, как указано в соответствующей частной статье. Опрыскивание незакрепленного слоя сорбента проводят немедленно после завершения процесса хроматографирования, не допуская высыхания хроматограммы. [4]
Поэтому в действительности изотерма адсорбции не линейна; она представляет кривую, изображенную на рис. 2, а пятна веществ на хроматограмме резко очерчены сверху и размыты снизу в виде хвостов, обращенных к стартовой линии. Хвосты тем меньше, чем меньше вещества наносится на стартовую линию. [5]
Раствор испытуемой смеси наносится нэ пластинку тонким капилляром на расстоянии 1 - 2 см друг от друга. Пятна веществ по возможности должны быть небольшими ( диаметр от 2 до 3 мм) и находиться не ближе 1 5 - 2 см от краев пластинки. [6]
После поднятия фронта растворителя на высоту 10 - 11 см пластинку вынимают, высушивают в вытяжном шкафу 3 - 5 мин. При этом пятна коэкстрактивных веществ окрашиваются в желтый цвет. [7]
При облучении пластинок фильтрованным УФ-светом пятна веществ обнаруживаются по их флуоресценции. Этот метод особенно пригоден для обнаружения фенольных веществ, аминокислот и их производных. [8]
Практически на хроматограмме происходит диффузия пятен и равновесие между сорбцией и десорбцией устанавливается не сразу. Поэтому в действительности изотерма адсорбции нелинейна, а пятна веществ на хроматограмме резко очерчены сверху и размыты снизу в виде хвостов, обращенных к стартовой линии. Хвосты тем меньше, чем меньше вещества нанесено на стартовую линию. [9]
 |
Станки для нанесения незакрепленного слоя сорбента.| Хроматографические кюветы с пластинкой. [10] |
При хроматографировании бесцветных веществ после окончания процесса пластинку сушат на воздухе, а затем помещают в атмосферу легкоадсорбируемого вещества, например паров иода. При этом чистый сорбент на пластинке окрашивается, а пятна вещества остаются бесцветными. [11]
Для того чтобы иметь возможность определить, относится ли пятно на пластинке к парам неподвижной фазы, нужно нанести небольшое количество раствора неподвижной фазы на стартовую точку пластинки с тонким слоем сорбента. Вообще если на пластинке сразу после начала анализа появляются пятна вещества, то это вещество следует отнести к примесям, не входящим в состав образца. [12]
В общих чертах метод представляет собой следующее: незначительное количество раствора исследуемого вещества наносят пят-натии на определенное место ( линию старта) нижнего конца полосы специальной фильтровальной бумаги, затем эти полосы подвешивают в камерах так, чтобы их нижние концы, у которых нанесены капли веществ, были погружены в насыщенный водой, но не смешивающийся с ней растворитель. Подвижная фаза ( растворитель) поглощается бумагой и передвигается кверху, проходя через пятна вещества. Вещества, в зависимости от их распределения между подвижной и неподвижной фазами, в данном случае влажной целлюлозой, передвигаются с различной скоростью вместе с растворителем. Через какое-то время, как только фронт растворителя почти достигнет верхнего среза бумаги, бумажную полосу вы - / нимают из камеры, отмечают положение фронта растворителя и при помощи цветной реакции проявляют ( делают видимыми) пятна вещества. [13]
Препаратшшое разделение смесей веществ пронодят как на закрепленном, так и на незакрепленном слое сор-беша. Для разделения на закрепленном слое обычно применяют флуоресцирующие слои. Пятна веществ обнаруживают в ТуФ - евсте, отмечают, выскабливают, и вещество вымывают с сорбента подходящим растворителем. Хро-матографировапне проводят несколько раз, и растворы, полученные при вымывании одинаковых пятен, объединяют. После удаления растворителя выделяются индивидуальные соединения. В этом случае отдельные соединения обнаруживаются в УФ-свете в виде полос, которые отмечают и обрабатывают затем, как описано выше. [14]
ИУК и близкие к ней соединения, имеющиеся на хроматограмме, флуоресцируют фиолетово-малиновым светом. Хотя пятна веществ в ультрафиолетовом свете выделяются отчетливо и их можно характеризовать как по величине Rf, так и по цвету флуоресценции, однако для их идентификации этого недостаточно. [15]
Страницы: 1 2