Cтраница 4
Перед употреблением наполнитель прокаливают при 600е в течение 8 час. Колонку ( 1 2 X 35 см) наполняют суспензией хайфлоу-суперсела ( 6 г), используя для ее приготовления стационарную фазу ( 3 г) системы растворителей, применяемой при хроматографировании, и уплотняют при помощи стального поршня. Перед нанесением исследуемого раствора позволяют жидкости вытечь из колонки до обнажения поверхности наполнителя. Хроматографирование проводят под небольшим положительным давлением ( 3 - 5 см. рпг. Если фракция элюата будет в дальнейшем хроматографироваться на другой колонке, то необходимо предварительно удалить гликоль при 50 в вакууме ( 0 01 мм рт. ст.) в течение нескольких минут. Обычно фракции элюата выпаривают в вакууме ( водоструйный насос) при 30 - 40, остаток растворяют в хлороформе и определяют величины экстинкции при 350 ммк. Для этаноламина и аланинола строят калибровочные кривые, другие ДНФ-производные определяют по кривой, построенной для аланинола, учитывая при этом различие молекулярных весов. [46]
Из полученных данных Броде сделал следующие обобщения: I) Возрастание молекулярного веса обычно сопровождается падением частоты полосы поглощения. Это падение является грубо пропорциональным возрастанию молекулярного веса, но меняется в зависимости от положения заместителя. Введение в л-положение МОг -, СНз-групп или галоидов вызывает появление максимальных по величине полос поглощения во всех растворителях. Введение атомов галоидов в о-положения вызывает у дизамещенных сильное падение размеров полос поглощения во всех растворителях. В дизамещенных продуктах возрастание или падение размеров полос поглощения связано математической зависимостью с эффектами, вызываемыми замещающими группами в отдельности. В л -, о-диза-мещенных соединениях л-заместитель, невидимому, оказывает более сильное влияние на частоту полосы поглощения в спирте, а о-заме-ститель более влияет на экстинкцию полосы поглощения. В соляной кислоте и в едком натре наблюдается слабая зависимость между положением заместителя и его Влиянием. Во всех растворителях экстинкция полосы поглощения бромпроизводного равна или незначительно больше, чем у хлорпроизводного, независимо от положения галоида в молекуле. Основные полосы поглощения этих соединений в едком натре, невидимому, состоят из двух наложенных друг на друга полос, которые, вероятно, вызываются двумя формами колебаний молекул, находящихся в равновесии. Определение состава соединенных полос дает возможность судить о Влиянии положения заместителей на это равновесие. Хлорпроизводные существуют в четырех равновесных уровнях, а бромпроизводные - в шести. Суммы экстинкций компонент основной полосы поглощения в едком натре мало зависят от положений заместителей, тогда как величины экстинкций отдельных положений заметно отличаются друг от друга. [47]