Разделение - нуклеиновая кислота
Cтраница 1
Разделение нуклеиновой кислоты и нуклеопротеидов ведут на замещенной целлюлозе с низкой емкостью ( 0 4 - 0 6 мэкв. [1]
Применяют для разделения высокомолекулярных нуклеиновых кислот ( см. также разд. [2]
 |
Разделение т. РНК на метилированном альбумине [ 45. [3] |
Другие методы разделения нуклеиновых кислот, описанные в литературе, не получили широкого распространения. [4]
Эффекты, осложняющие разделение высокомолекулярных нуклеиновых кислот, в еще большей степени проявляются при попытках разделить олигонуклео-тиды. [5]
Эта глава посвящена разделению нуклеиновых кислот и их компонентов с помощью тонкослойной, ионообменной и аффинной хроматографии, а также электрофореза на бумаге и в геле. [6]
Процесс выделения, очистки и разделения нуклеиновых кислот состоит из ряда последовательных этапов. [7]
В настоящее время применяют ряд усовершенствованных методов разделения нуклеиновых кислот на фракции из суммарного препарата, полученного описанным методом. [8]
Этот подход Дере и Гойзен [1 ] использовали для разделения нуклеиновых кислот, а Цан и Шталь [2] и Зиттль и Делла Моника [3] - для разделения белков. [9]
В последнее время разработан метод центрифугирования в градиенте плотности, с успехом использованный для разделения нуклеиновых кислот. По этому методу центрифугируют смешанный раствор высокомолекулярного и низкомолекулярного веществ. При больших угловых скоростях вследствие седиментации низкомолекулярного вещества на разных уровнях устанавливаются различные плотности раствора. [10]
Здесь невозможно в краткой форме описать все применяемые в гель-электрофорезе нуклеиновых кислот приемы; приведем лишь основные ссылки на литературу, где описаны необходимые детали: Методы разделения нуклеиновых кислот и олигонуклеотидов: Gould И. [11]
Так, например, ионообменная хроматография - все еще типичный метод разделения нуклеотидов, однако для разделения оснований ее почти не применяют, отдавая предпочтение тонкослойной или бумажной хроматографии. При разделении нуклеиновых кислот ионитам также предпочитают другие сорбенты, в частности оксиапатит, диатомитовые земли, покрытые слоем метилальбумина. [12]
Действует как ионообменник и как молекулярное сито. Используется для разделения нуклеиновых кислот, нуклеотидов, нуклеопротеидов, вирусов, белков, пептидов, аминокислот, полисахаридов и др. К некоторым белкам более специфична, чем DEAE. [13]
Поэтому методы гель-фильтрации и ионообменной хроматографии не получили широкого распространения при фракционировании нуклеиновых кислот и значительно уступают ультрацентрифугированию и электро-форетическому разделению в геле агарозы, полиакриламидиом геле или их смеси. Поскольку величина отрицательного заряда нуклеиновых кислот и продуктов их расщепления мало зависит от рН, а отношение заряда к молекулярной массе сохраняется практически неизменным, разделение нуклеиновых кислот при электрофорезе определяется не их зарядом, а размером молекул. При наличии маркеров с известной молекулярной массой возможно определение молекулярной массы препаратов нуклеиновых кислот и их фрагментов. [14]
В этой главе будет показано, как инструментальная жидкостная хроматография применяется для аналитического разделения нук-леотидов, нуклеозидов и N-оснований. Аналитическое разделение проводится с пикограммовыми и миллиграммовыми количествами вещества; препаративное разделение - с миллиграммовыми и граммовыми количествами вещества. Разделение нуклеиновых кислот высокого молекулярного веса и олигонуклеотидов методом жидкостной хроматографии проводится обычно в препаративных целях, и поэтому там применяется другая методика. [15]
Страницы: 1 2