Cтраница 1
Разделение пигментов с помощью одномерной хро-матограммы позволяет определить либо хлорофиллы, либо каротиноиды. Поэтому, когда необходимо установить содержание всех компонентов пигментной системы пластид в небольшом количестве растительного материала, применяют двухмерную хроматограмму. В этой случае последовательно разгоняют пигменты на бумаге сначала в одном направлении, а затем в направлении, перпендикулярном первому. [1]
Для разделения пигментов необходимо наиболее полно использовать их физические свойства, например растворимость. Так, простые красные азопигменты типа Толуидинового красного чрезвычайно растворимы в хлороформе, а более сложные азосоединения таким свойством не обладают. Это позволяет провести эффективное разделение смесей. Различие в растворимости лежит также в основе анализа окрашенных пленок, применяемых в автомобильной промышленности. Обычно смесь желтых пигментов включает Кубовый желтый 20 и некоторые азометины. Пленку вначале обрабатывают хлороформом для экстракции Кубового желтого 20, а затем экстрагируют азометин ДМФ. [2]
Роллинс [50] разработал методику разделения пигментов листьев на тонком слое силикагеля элюированием смесью бензол-ацетон ( 7: 3), специально предназначенную для демонстрации студентам. [3]
Ситовый метод заключается в разделении пигмента на фракции путем просеивания через специальные стандартные сита с ячейками определенного размера. Поскольку наименьший размер ячеек применяемых обычно в технике сит составляет примерно 40 мкм, то ситовый анализ может характеризовать только гранулометрический состав грубодисперсных или гранулированных порошков. Известны также сита с размером ячеек до 5 мкм ( их получают методом электроосаждения) [ 14, с. [4]
В основе классического адсорбционного метода разделения пигментов М. С. Цвета лежит неодинаковая свя-зываемость их адсорбентом. Если смесь пигментов листа пропустить через колонку с пористым материалом, то отдельные пигменты будут располагаться на разных уровнях колонки, давая своеобразный спектр распределения, соответствующий их адсорбционному сродству. [5]
Новые работы, в которых для разделения пигментов применяли чувствительный метод тонкослойной хроматографии, показали, что в превращениях ксантофиллов на свету участвует не лютеин, а зе-аксантин. [6]
Классическими примерами адсорбционной хроматографии органических веществ являются цветовское разделение пигментов зеленых листьев, разделение каротинов, очистка антрацена, разделение и анализ углеводородов, разделение нитросоединений. [7]
Наблюдайте, как по мере передвижения жидкости происходит разделение пигментов, не одинаково сорбируемых клетчаткой. Внизу на бумаге появляются зеленые полосы лучше сорбируемого хлорофилла, выше - желтые пятна каротина и ксантофилла. [8]
Хроматографический анализ известен с 1903 г., когда русский ботаник М. С. Цвет осуществил разделение пигментов хлорофилла листьев ( желтого и зеленого) с помощью адсорбентов. В настоящее время существует много разновидностей хроматографического анализа, различающихся как методикой проведения, так и аппаратурным оформлением. Сущность хроматографического метода - разделение компонентов исследуемой смеси путем распределения их между двумя фазами - неподвижной и подвижной, причем подвижная фаза постоянно проходит через неподвижную. Неподвижная фаза может быть твердой или жидкой, подвижная - жидкой или газообразной. [9]
Материалы и оборудование: 1) листья растений; 2) стеклянная трубка для разделения пигментов листа; 3) колба для отсасывания; 4) насос; 5) коническая колба; 6) воронка обычная; 7) делительная воронка; 8) фарфоровая ступка с пестиком; 9) кварцевый песок; 10) стеклянный фильтр № 2; 11) пипетка на 25 мл; 12) мерный цилиндр на 25 мл; 13) мензурка на 10 мл; 14) сахароза; 15) бензин; бензол; ацетон; 16) сернокислый натрий ( свежепрокаленный); 17) поваренная соль. [10]
Этот важный экспериментальный факт был положен им в основу дальнейших поисков новых эффективных методов разделения пигментов. [11]
Для определения флуоресценции спиртовую вытяжку пигментов или раствор хлорофилла в бензине, полученный при разделении пигментов по Краусу, помещают на темную бумагу у источника освещения и рассматривают в отраженном свете. [12]
В этой работе он указывает, что им были испытаны два способа использования различий в адсорбируемости для разделения пигментов - в статических и в динамических условиях. Цвет показал, что динамический способ наиболее эффективен. По этому методу раствор, содержащий смесь пигментов, пропускается через слой адсорбента. Вследствие различий в адсорбируемости отдельных пигментов последние располагаются в колонке адсорбента в виде отдельных, различно окрашенных зон; при промывании колонки чистым растворителем зоны, передвигаясь вниз колонки с различной скоростью, все более и более обособляются, и, наконец, происходит их полное разделение, когда каждая из зон будет содержать только один пигмент. В дальнейшем можно механически разделить колонку на части и из каждой выделить адсорбированное вещество в чистом виде. [13]
![]() |
Схема хроматографического анализа. [14] |
Хроматографический метод разделения открыт и исследован в 1903 г. русским ученым М. С. Цветом, который использовал его для разделения пигментов, выделенных из зеленых листьев растения. Наблюдая процесс разделения смеси различных пигментов, на колонке, заполненной мелом, М. С. Цвет назвал этот, процесс хроматографией, что означает цветозапись. [15]