Разделение - полисахарид
Cтраница 1
Разделение полисахаридов на группы одигосахаридов и высших полиоз оправдано не только с позиций оценки их молекулярной массы и указанных различий свойств, но и с позиции техники их исследования. Если при изучении олигосахаридов применяются обычные классические методы органической химии, то при исследовании высших полиоз помимо названных методов используются и приемы работы с высокополимерами. [1]
Для разделения полисахаридов ( а и р-амилозы) используют в качестве адсорбента вату. [2]
Ниже приведена методика разделения полисахаридов и качественного и количественного определения их состава применительно к электрофорезу на бумаге. [3]
В последние годы появились приборы, позволяющие проводить разделение полисахаридов методом хроматографии иод высоким давлением. [4]
Гель-проникающая хроматография является, вероятно, наиболее часто используемым методом [13], так как это самый простой метод разделения полисахаридов, имеющих большой диапазон молекулярных масс. Одновременно он позволяет определять молекулярные массы полисахаридов. Когда применимы мягкие условия определения, этот метод особенно полезен для нестабильных биологических материалов. [5]
В первой работе в этой области [4] было показано, что основные ионообменники целлюлозы, такие, как DEAE-целлюлоза, являются более подходящими для разделения полисахаридов, чем ионообменные смолы, которые использовали ранее [5], вследствие более обширной активной поверхности DEAE-целлю-лозы. Углеводы кислого характера хорошо адсорбируются при нейтральном значении рН, а углеводы нейтрального характера - только в щелочной среде. [6]
 |
Труб - гтпи необходимости результат. [7] |
В осадке и активном иле углеводы представлены полисахаридами. Метод основан на разделении полисахаридов по степени их гидролиза кислотами и определении редуцируемого сахара по Бертрану. [8]
В осадке и в активном иле углеводы представлены полисахаридами. Метод анализа основан на разделении полисахаридов по степени их гидролизуемости с кислотами и определении редуцируемого сахара по Бертрану. [9]
Кислые полисахариды могут присутствовать в неочищенном препарате липополисахарида, полученном экстракцией смесью вода - фенол. В этом случае на стадии ультрацентрифугирования они вместе с нуклеиновой кислотой остаются в супернатанте. Разделение кислых полисахаридов и нуклеиновых кислот основано на том, что в отличие от комплекса с нуклеиновыми кислотами комплекс цетавлона с кислыми полисахаридами растворим в 0 3 М растворе хлористого натрия. Супернатант, содержащий кислые полисахариды и нуклеиновую кислоту, растворяют в таком количестве 0 5 М раствора хлористого натрия, чтобы получился 2 % - ный раствор. К этому раствору добавляют 2 % - ный водный раствор цетавлона до прекращения выпадения осадка. Осадок комплекса цетавлона с нуклеиновыми кислотами отделяют центрифугированием. При разбавлении супернатанта водой осаждается комплекс цетавлона с кислыми полисахаридами. Этот осадок растворяют в 1 М растворе хлористого натрия ( 1 г влажного осадка на 100 мл раствора), диализуют 72 ч против воды и содержащий кислые полисахариды раствор лиофилизуют. Модифицированная методика, сходная с приведенной выше, была использована [13] для выделения и очистки кислых полисахаридов из Serratia marcescens. [10]
Другим большим разделом химии углеводов является химия полисахаридов. Полисахариды представляют собой полимеры моносахаридов, точнее продукты их поликонденсации, и их молекулы образуют цепи, состоящие из моносахаридных звеньев, связанных друг с другом через атом кислорода. Полисахариды - типичные высокомолекулярные вещества, и этот раздел химии углеводов по принципиальным и методическим подходам сходен с другими разделами химии полимеров. В частности, уже само понятие индивидуального вещества в данном случае теряет смысл и часто заменяется понятием фракции, содержащей идентичное по строению, но различающееся по молекулярному весу семейство полимергомо-логов. Это накладывает свой отпечаток на методы выделения и разделения полисахаридов. Далее, понятие структуры полисахарида и методы ее установления также сходны с соответствующими понятиями и методами высокомолекулярной химии. [11]
Наиболее характерной особенностью полиоз является многообразие типов связей между элементарными звеньями в макромолекулах. Такие связи встречаются и в полиозах, но этот тип связи не является ни единственным, ни основным. В полиозах могут содержаться все возможные связи между 1 - м атомом углерода одного звена и 2 - м, 3 - м, 4 - м и 6 - м атомами углерода соседнего звена, причем в одной и той же макромолекуле могут быть связи различных типов. Нередки случаи, когда одно звено соединяется одновременно с 3 - 4 звеньями, и в результате макромолекулы имеют сильно разветвленную форму. Принцип классификации полиоз на основании химического состава и строения элементарного звена позволяет наиболее целесообразно распределить все полиозы в группы по характерным и вполне определенным признакам. Бесспорно, что при распределении индивидуальных полисахаридов по группам встречается ряд трудностей, однако эти затруднения обусловлены не дефектами вышеприведенной классификации, а исключительно недостаточной изученностью полиоз. В частности, в ряде случаев трудно решить вопрос о том, является ли данное вещество смесью индивидуальных полисахаридов или представляет собой смешанный полисахарид, макромолекула которого состоит из остатков нескольких моноз. Обычные физические методы разделения полисахаридов не всегда дают достоверные результаты, так как некоторые из них могут обладать одинаковыми или очень близкими физическими свойствами. [12]
Преимуществом колоночной хроматографии является возможность количественного фракционирования больших количеств веществ без превращения их в какие-либо производные. Однако хорошее разделение часто возможно лишь при малых скоростях элюирования, поэтому были разработаны новые виды колоночной хроматографии. Методы аффинной и адсорбционной хроматографии основаны на избирательной адсорбции молекул на нерастворимом адсорбенте, который содержит группы ( молекулы), специфически взаимодействующие с молекулами подлежащих очистке соединений, например ингибиторы ( для очистки ферментов) или антитела ( для очистки антигенов); в настоящее время эти методы нашли широкое применение и для разделения углеводов. Невзаимодействующие с адсорбентом примеси удаляются, а связанный с адсорбентом сахар затем десорбируют способом, не приводящим к его разрушению. Десорбцию можно осуществить, изменяя рН, ионную силу среды или применяя соответствующий ингибитор взаимодействия, удерживающего вещество на адсорбенте. Для разделения ряда полисахаридов были использованы иммобилизованные формы ( см. разд. А [40], являющегося фитогемагглютинином ( лектином), который специфически взаимодействует с разветвленными полисахаридами определенного строения; в настоящее время применяют и другие иммобилизованные фитогемагглютинины. Колоночная хроматография на носителях, покрытых полиароматическими соединениями [41], также находит применение для разделения полисахаридов. [13]
Страницы: 1