Cтраница 1
Электрофоретическое разделение возможно лишь тогда, когда ионы различаются по их подвижности. Эффективный заряд представляет собой заряд иона за вычетом части заряда окружающего противоположно заряженного двойного электрического слоя. При перемещении ион притягивает эту часть двойного электрического слоя и передвигается из-за этого более медленно. Это явление называется электрофоретическим эффектом, который наиболее сильно проявляется в тонких диффузных двойных слоях вокруг ионов. Этот характеристический двойной электрический слой может быть рассчитан по теории Дебая-Хюккеля. Он обратно пропорционален корню квадратному из концентрации электролита. Отсюда следует, что эффективный заряд иона и, соответственно, скорость перемещения при увеличении ионной силы уменьшаются. [1]
Электрофоретическое разделение проводят в течение 60 - 90 мин при напряженности электрического поля 4 - 5 В / см или силе тока 5 мА на трубку. [2]
Электрофоретическое разделение проводят в ССЦ на хро-матографической бумаге ( ленинградская быстрая) в условиях, описанных выше. [3]
Электрофоретическое разделение проводили круглосуточно в течение 1 месяца. [4]
Электрофоретическое разделение в ячейке Тизелиуса применяется для определения гомогенности полисахаридов и определения числа компонентов в смесях полисахаридов. [5]
Электрофоретическое разделение НЬА и HbS по методу подвижной границы показывает, что разница между зарядами этих молекул составляет один элементарный заряд на половину молекулы. Вполне возможно, что эта разница обусловлена заменой всего лишь одной аминокислоты в а - или р-цепи. Для того чтобы дать точный ответ, нужно было бы иметь данные полного анализа аминокислотной последовательности в обеих цепях. Однако установить участок, в котором два вида молекул гемоглобина различаются по аминокислотному составу, можно и без полного определения последовательности аминокислот. Протео-литический фермент трипсин гидролизует пептидные связи, в образовании которых участвуют карбоксильные группы остатков лизина и аргинина. И лизин, и аргинин имеют сравнительно длинные неразветвленные боковые цепи с положительным зарядом на конце. В каждой половине молекулы гемоглобина на 287 аминокислотных остатков приходится около 26 остатков лизина и аргинина. Таким образом, трипсиновый гидролизат половины молекулы гемоглобина должен содержать около 28 пептидов ( поскольку в каждой половине имеются две различные цепочки), каждый из которых содержит в среднем немногим больше 10 остатков. В действительности при таком гидролизе отщепляется устойчивое ядро, содержащее около четверти аминокислотного состава половины молекулы. Анализ состава этого ядра, отделенного центрифугированием от прочих пептидов, показывает, что в НЬА и в HbS оно имеет одинаковый аминокислотный состав и, вероятно, одинаковую последовательность аминокислотных остатков. [6]
Электрофоретическое разделение сыворотки на бумаге проводится обычно в течение 6 - 24 часов при градиенте потенциала от 3 до 8 вольт на 1 см пути тока. [7]
Электрофоретическое разделение красителей на бумаге основано на их подвижности в электрическом поле. [8]
Электрофоретическое разделение протеинов влаги было впервые предпринято у животных в 1948 г. Sallman и Moore методом свободного электрофореза. Были получены нреаль-бумины, альбумины, альфа, бета - и гамма-глобулины. [9]
Электрофоретическое разделение гуминовых кислот торфа приводит к возрастанию порогов осаждения по мере движения вещества от стартовой линии к аноду. Некоторое уменьшение величины порога осаждения наблюдается лишь в 9 - й фракции, отвечающей максимальному значению оптической плотности. [10]
Электрофоретическому разделению можно подвергать и сложные белки - нуклеопротеиды, глюко - и липопротеиды, а также другие смеси веществ, частицы которых имеют достаточный электрический заряд. [11]
Электрофоретическому разделению веществ мешает их диффузия. В некоторых случаях гели выполняют роль сит. Например, в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата атрия разделение предварительно дентурированных белков происходит в соответствии с размерами их молекул. При проведении электрофореза в градиентном геле разделяемые вещества мигрируют в направлении уменьшения диаметра пор геля, и поэтому с увеличением расстояния от старта задерживаются все более мелкие молекулы. [12]
Методы электрофоретического разделения в полиакриламидном и агарозополиакриламидном гелях широко используются в настоящее время для фракционирования нуклеиновых кислот. Преимуществом этих методов является их простота и возможность контролировать величину пор геля. При наличии маркеров с известной молекулярной массой или коэффициентом седиментации очи могут быть использованы для характеристики относительной молекулярной массы выделенных препаратов нуклеиновых кислот. [13]
Техника электрофоретического разделения в тонких слоях в принципе не является новинкой, так как уже в 1946 г. Консден, Гордон и Мартин [36] применили слой силикагеля для разделения этим методом аминокислот и пептидов. Впоследствии на основе этого принципа было разработано много модификаций, и ассортимент применяемых носителей значительно расширился. [14]
Для электрофоретического разделения использовалась ленинградская медленнофильтрующая хроматографическая бумага № 4 фабрики им. [15]