Современный аминокислотный анализатор
Cтраница 1
Чувствительность современных аминокислотных анализаторов предъявляет исключительно высокие требования к чистоте реактивов, используемых для приготовления элюентов, а также ( особенно) воды. Вода должна быть только что деионизована и перегнана в кварцевом дистилляторе. Однако для анализов на субнаномолярном уровне и этого оказывается недостаточно. [1]
В газовой хроматографии высокий эффект разделения достигается применением капиллярной техники, в особенности введением стеклянных капилляров. Современные аминокислотные анализаторы автоматизированы таким образом, что процесс анализа занимает немного времени. Градиентное элюирование осуществляется дозирующими устройствами. Высокочувствительная детекторная система делает возможной точную работу с нано - и пикограммовыми количествами. [2]
 |
Хроматографичес-кая элюция материала из пятна. [3] |
ТСХ модифицированных ароматическими заместителями аминокислот в последние годы предпочитают вести на пластинках с полиамидным покрытием, поэтому из обзора Нидервизера процитируем только методы фракционирования немодифицированных аминокислот. Разумеется, ни по чувствительности и воспроизводимости результатов, ни тем более по точности количественных определений ТСХ аминокислот не может конкурировать с современными аминокислотными анализаторами. Однако существует немало ситуаций, когда возможности ТСХ оказываются вполне адекватными поставленной задаче: определение аминокислотного состава, сопоставление родственных полипептидов, выявление генетических различий, проявляющихся в замене каких-либо аминокислот, клинические анализы физиологических жидкостей и др. На рис. 160 показана приведенная в цитируемом обзоре картина распределения пятен после двумерной ТСХ модельной смеси аминокислот на пластинках с си-ликагелевым покрытием. [4]
Реакция окрашивания идет по описанной схеме для всех аминокислот, кроме пролина, который является иминокислотой. Однако пролин тоже реагирует с нингидриновым реактивом, образуя достаточно окрашенный продукт с неявно выраженным максимумом поглощения при 440 нм. В связи с этим современные аминокислотные анализаторы оснащаются денситометрами, регистрирующими поглощение раствора ( после реакционной спирали) одновременно на двух длинах волн: 570 и 440 нм. [5]
Наиболее популярные ионообменники на основе полистирола выпускаются под торговыми названиями Dowex ( фирма Dow Chemical Со) и Amberlyte ( фирма Rohm and Haas) и перепродаются большинством фирм, торгующих биохимическими реактивами. Хороню промытые и отсеянные обменники типа Dowex для аналитических целей поставляет фирма Bio-Rad под наименованием Bio-Rad AG. Повышенные требования, предъявляемые к ионообменникам для современных аминокислотных анализаторов, привели к разработке специальных полистирольных смол ( Aminex, Durrum и др.) с малым разбросом размеров около номинальных значений порядка 10 - 20 мкм. [6]
Первая модель устройства с одной петлей для ручного ввода образца уже была разработана [18], поэтому не составляло труда преобразовать ее в блок для автоматического ввода большого числа образцов. Теперь рабочая программа, заложенная в программирующее устройство, стала включать и управление автосамплером. В последующих разделах дано описание неавтоматического базового анализатора и анализатора Technicon, а затем совсем коротко приведены основные характеристики современных аминокислотных анализаторов. [7]
Страницы: 1