Раствор - лизин
Cтраница 1
Раствор лизина фильтруют, переносят в круглодонную колбу на 100 мл и концентрируют при низкой температуре до не очень густого сиропа. Прибор смывается несколькими каплями воды, и к сиропу добавляют около 10 мл абсолютного спирта. При этом раствор часто становится мутным. Затем к охлажденному карбонату лизина прибавляют избыток очищенной пикриновой кислоты в растворе абсолютного спирта. Обычно пикрат лизина начинает тотчас же выкристаллизовываться. Его оставляют стоять на ночь при Оэ, а затем отфильтровывают в тигле со стеклянным фильтром 4 и промывают холодным абсолютным спиртом и эфиром. [1]
Какое значение рН среды может иметь раствор лизина. [2]
В 2 пробирки вносят по 0 5 мл раствора лизина, что соответствует 0 05 мэкв. В обе пробирки добавляют с помощью капилляра по одной капле триэтиламина и реакционные смеси инкубируют при 37 С в течение 30 - 45 мин, периодически встряхивая. После инкубации реакционные смеси исследуют методом бумажной или тонкослойной хроматографии. [3]
Осадок комплекса нуклеиновая кислота - СТА растворяют в 0 2 М растворе лизина и обрабатывают фосфатазой для удаления концевого фосфата. [4]
Так, например, Тейл и Родуэлл 144 ] обнаружили, что клетки Streptococcus faecalis, суспендированные в растворах лизина, накапливают лизин; в этих условиях концентрация лизина внутри клеток достигает значительно более высокого уровня, чем в окружающей жидкости. [5]
Затем колонкл тщательно промывают до бесцветной промывной воды и осуществляют элющгю. Элюция лизина с катионита производится 0 5 - 5 0 % - ным раствором аммиака до отсутствия следов лизина в последних порциях стекающего элюата. В элюат переходит 80 - 90 % сорбированного лизина, получают 1 - 2 % - ный раствор лизина. [6]
Затем колонки тщательно промывают до бесцветной промывной воды и осуществляют элюцию. Элюция лизина с катионита производится 0 5 - 5 0 % - ным раствором аммиака до отсутствия следов лизина в последних порциях стекающего элюата. В элюат переходит 80 - 90 % сорбированного лизина, получают 1 - 2 % - ный раствор лизина. [7]
 |
Технологическая схема ионообменного выделения i-лизина из ферментативного раствора. [8] |
Освобожденный от биомассы ферментативный раствор подают в ионообменную установку 6 со скоростью 0 08 - 0 12 см / с. Сорбция проводится в псевдоожиженном слое катионита КУ-2 или КБ-4П-2. Ферментативный раствор лизина прекращают подавать после насыщения первых двух колонн лизином. [9]
Одновременно с анализом экстракта испытуемой пробы проводят анализ различных количеств стандартного раствора L-лизина гидрохлорида, чтобы получить данные для калибровочной кривой. Каждый анализ делают в трех повторностях. В первые три пробирки вливают по 5 мл воды, во вторые - по 1 мл раствора лизина ( 10 мкг / мл) и по 4 мл воды, в третьи - по 2 мл раствора лизина и по 3 мл воды, в четвертые - по 3 мл раствора лизина и по 2 мл воды и в пятые - по 4 мл раствора лизина и по 1 мл воды. Во все пробирки вливают по 5 мл основной среды. Таким же образом вместо стандартного раствора лизина разливают экстракт испытуемой пробы. Все пробирки закрывают ватными пробками и стерилизуют в автоклаве в течение 20 мин. Затем пробирки охлаждают на воздухе, в каждую вносят по 1 капле посевного материала, закрывают пробками и ставят в термостат при 37 С. [10]
Одновременно с анализом экстракта испытуемой пробы проводят анализ различных количеств стандартного раствора L-лизина гидрохлорида, чтобы получить данные для калибровочной кривой. Каждый анализ делают в трех повторностях. В первые три пробирки вливают по 5 мл воды, во вторые - по 1 мл раствора лизина ( 10 мкг / мл) и по 4 мл воды, в третьи - по 2 мл раствора лизина и по 3 мл воды, в четвертые - по 3 мл раствора лизина и по 2 мл воды и в пятые - по 4 мл раствора лизина и по 1 мл воды. Во все пробирки вливают по 5 мл основной среды. Таким же образом вместо стандартного раствора лизина разливают экстракт испытуемой пробы. Все пробирки закрывают ватными пробками и стерилизуют в автоклаве в течение 20 мин. Затем пробирки охлаждают на воздухе, в каждую вносят по 1 капле посевного материала, закрывают пробками и ставят в термостат при 37 С. [11]
Одновременно с анализом экстракта испытуемой пробы проводят анализ различных количеств стандартного раствора L-лизина гидрохлорида, чтобы получить данные для калибровочной кривой. Каждый анализ делают в трех повторностях. В первые три пробирки вливают по 5 мл воды, во вторые - по 1 мл раствора лизина ( 10 мкг / мл) и по 4 мл воды, в третьи - по 2 мл раствора лизина и по 3 мл воды, в четвертые - по 3 мл раствора лизина и по 2 мл воды и в пятые - по 4 мл раствора лизина и по 1 мл воды. Во все пробирки вливают по 5 мл основной среды. Таким же образом вместо стандартного раствора лизина разливают экстракт испытуемой пробы. Все пробирки закрывают ватными пробками и стерилизуют в автоклаве в течение 20 мин. Затем пробирки охлаждают на воздухе, в каждую вносят по 1 капле посевного материала, закрывают пробками и ставят в термостат при 37 С. [12]
Одновременно с анализом экстракта испытуемой пробы проводят анализ различных количеств стандартного раствора L-лизина гидрохлорида, чтобы получить данные для калибровочной кривой. Каждый анализ делают в трех повторностях. В первые три пробирки вливают по 5 мл воды, во вторые - по 1 мл раствора лизина ( 10 мкг / мл) и по 4 мл воды, в третьи - по 2 мл раствора лизина и по 3 мл воды, в четвертые - по 3 мл раствора лизина и по 2 мл воды и в пятые - по 4 мл раствора лизина и по 1 мл воды. Во все пробирки вливают по 5 мл основной среды. Таким же образом вместо стандартного раствора лизина разливают экстракт испытуемой пробы. Все пробирки закрывают ватными пробками и стерилизуют в автоклаве в течение 20 мин. Затем пробирки охлаждают на воздухе, в каждую вносят по 1 капле посевного материала, закрывают пробками и ставят в термостат при 37 С. [13]
Все водные растворы соединяют вместе и экстрагируют смесью амилового спирта и эфира. Последнюю вытяжку, извлекают небольшим количеством разбавленной серной кислоты. Раствор сульфата лизина переносят в центрифужный стакан на 250 мл и доводят рН до 5 по конго и лакмусу. Затем добавляют нескольке граммов ВаСОз и перемешивают до тех пор, пока, реакция не станет щелочной по лакмусу. Осадок отделяют и промывают. Фильтрат концентрируют в вакууме до 200 мл, предварительно добавив около 1 г ВаСОз и немного каприлового спирта. Осадок фильтруют, промывают и концентрируют раствор углекислого лизина при низкой температуре до 30 - 50 мл. [14]
К раствору добавляют еще 2 - 4 мл серной кислоты ( 1: 3) и переносят его в Центрифужный стакан на 250 мл. Прибор смывается 3 - 4 раза небольшими порциями воды. Конечный объем жидкости не должен превышать 40 мл. Смесь тотчас же помещают в ледяную воду и перемешивают в течение короткого времени. Фосфорновольфрамовокислый лизин начинает почти немедленно кристаллизоваться. Раствор оставляют стоять во льду в течение 30 - 45 мин. Осадок центрифугируют и тщательно промывают 3 - 4 раза 2 % раствором фосфорновольфрамовой кислоты в 2 - 5 % серной кислоте. Объем раствора фосфорновольфрамовокислого лизина не должен превышать 150 мл. [15]
Страницы: 1