Раствор - элюент
Cтраница 1
Растворы элюентов ( для хроматографа и поглотительных сосудов) должны быть отфильтрованы через стеклянные фильтры с диаметром не более 3 мкм. [1]
ПОСКОЛЬКУ можно подобрать раствор элюента, ионы которого не будут давать сигнала, и программировать его силу для улучшения разделения. Возможности селективных детекторов меньше, чем универсальных, поскольку первые реагируют на ограниченное число анализируемых ионов; однако их способность регистрировать сигнал требуемого иона в присутствии многих других может быть очень ценной. [2]
Для статической хроматографии такое освобождение должно быть полным уже при одном суспендировании сорбента с веществом в растворе конкурентного элюента. Для осуществления динамической хроматографии на колонке достаточно, чтобы равновесие сорбции искомого вещества заметно сдвинулось в пользу жидкой фазы. [3]
Вопрос о природе селективности разделения есть основной вопрос любого физико-химического исследования в хроматографии, особенно в жидкостной хроматографии, где селективность во многом определяется структурой раствора элюента и взаимодействием элюента с адсорбатом и адсорбентом. Проблему регулирования селективности при разработке хроматографических методик можно обозначить очень просто: каким образом составить оптимальную хроматографическую систему, используя 2 - 3 коммерческих адсорбента и набор стандартных для ВЭЖХ растворителей. [4]
Сначала смолу в колонке переводят в форму иона, имеющего коэффициент селективности меньший, чем коэффициенты селективности ионов разделяемой смеси. Пропускают раствор элюента, последний содержит ион, имеющий больший коэффициент селективности. [5]
Напомним, что в ионообменной хроматографии связывание вещества с сорбентом обусловлено ( главным образом) электростатическими силами притяжения разноименно заряженных ноногенных групп матрицы и вещества. Если в раствор элюента при ионообменной хроматографии ввести молекулы лиганда, обладающие аффинным сродством к хроматографируемому веществу, то это может привести к ослаблению ионного взаимодействия и элюции вещества с ионообменника. Ослабление может быть обусловлено непосредственным блокированием участвующих во взаимодействии с обменни-комионогенных групп вещества ( особенно, если растворенный лиганд сам несет заряд, одноименный с зарядом сорбента) или такими изменениями конфигурации молекул вещества при образовании аффинного комплекса с лигандом, которые уменьшают степень экспониро-ванности его иопогенных групп. [6]
 |
Сборник фракции. [7] |
По загружении колонки иони-том рекомендуют пропустить через нее воду или раствор элюента для того, чтобы проверить возможную скорость протекания раствора через колонку. После этого колонка готова к работе. [8]
 |
Аппаратура, используемая в ионообменном методе. [9] |
Трехвалентные положительные ионы актинидов или лаптапидов в водном растворе участвуют в реакции простого обмена, когда органический полимер перемешивается с раствором. Затем актинидный или лантанидный элемент может быть смыт со смолы пропусканием через ее столбик раствора элюента, который обычно содержит реагент, образующий комплексные ионы с ионами актинидов или лан-танидов. [10]
Уже упоминалось, что в сильном ионообменнике все ионогенные группы ионизированы и несут электрический заряд, а в слабом - ионизирована только вполне определенная ( зависящая от рН) часть этих групп. Но даже и в сильном обменнике в каждый данный момент времени далеко не все ионизированные группы доступны для электрического взаимодействия с ионами и молекулами вещества. В растворе элюента внутри гранул находятся контрионы, блокирующие электрические заряды этих групп. Как минимум, это - протоны, гидроксилы или другие исходные контрионы самого иоиообменника. К ним присоединяются ионы буфера и соли, которую обычно именно для этой цели вносят в элюент. При сближении под действием взаимного притяжения контриона и иона образуется ионная пара. Вне ее электрическое поле исчезает, поскольку происходит наложениз полей двух единичных зарядов противоположного знака. [11]
Другое ограничение касается взаимодействий со слишком низкими K. Следовательно, элюирование белка должно зависеть от кинетических факторов и не может быть проведено за реальное время опыта. Добавление растворимого лиганда к раствору элюента не должно оказывать влияния на элюирование белка, поскольку диссоциация - мономолекулярный процесс. Такими кинетическими эффектами объясняются наблюдаемые иногда неудачи при элюировании некоторых ферментов с аффинных сорбентов буферными растворами, содержащими сильные ингибиторы. В некоторых случаях белковый пик настолько уширяется, что его нельзя обнаружить. Метод пригоден главным образом для случаев, когда доступны сорбенты, содержащие лиганды со средней силой связывания. В таких случаях система полностью обратима в пределах времени проведения хроматографического опыта. [12]
 |
Сборник фракции. [13] |
Исследуемый раствор, содержащий подлежащие разделению ионы, вводят в верхнюю часть слоя ионита с помощью пипетки, микропипетки или шприца. Приоткрыв кран, опускают осторожно уровень жидкости до верхней границы ионита. Затем в колонку добавляют небольшие порции воды ( или элюента) для смывания со стенок колонки исследуемого раствора и просачивания его через ионит, каждый раз уровень жидкости опускают до верхнего уровня ионита. Затем, не взмучивая ионит, осторожно вводят раствор элюента и начинают элюцию, пропуская элюируюгций раствор с определенной скоростью. При этом важно, чтобы раствор проходил через колонку равномерно по всему поперечному сечению. [14]
Хроматографическое разделение редкоземельных элементов ( РЗЭ), при котором в качестве элюента применяется аммонийная соль этиленди-амшггетрауксусной кислоты [ 1 - 7J, является наиболее эффективным для препаративной практики. В этом случае используют две колонки с катио-нитовой смолой. Вначале, первую из них, называемую коллекторной колонкой, полностью насыщают разделяемыми ионами, пропуская раствор, содержащий смесь хлоридов или нитратов РЗЭ. Смолу во второй - делительной колонке, переводят в медную форму, обрабатывая раствором сульфата меди. Затем, после промывки водой, колонки соединяют последовательно и пропускают через них раствор элюента. При правильно выбранных условиях процесса ионы РЗЭ, начиная с более тяжелых, поочередно выходят с фильтратом, который собирают небольшими порциями. В них содержатся или чистые РЗЭ или смеси элементов с ближайшими порядковыми номерами. [15]
Страницы: 1