Cтраница 1
Стандартный раствор белка, например сывороточного альбумина, содержащий 10 мг в 1 мл. [1]
Стандартный раствор белка, например сывороточного альбумина, содержащий 1 мг в 1 мл. [2]
Стандартный раствор белка, содержащий 0 25 мг в 1 мл. [3]
Стандартный раствор белка, содержащий 0 05 мг в 1 мл. [4]
Примечание: Сст - концентрация стандартного раствора белка, указанная на флаконе. [5]
На основании результатов определений оптической плотности стандартных растворов белка строят соответствующий график. [6]
Сначала измеряют диаметры преципитационных колец вокруг лунок с разведенными стандартными растворами белка и строят график зависимости этих величин ( в мм) от логарифма концентрации раствора. Измерив диаметры преципитационных колец вокруг лунок исследуемых образцов, с помощью полученной калибровочной кривой определяют концентрации анализируемого белка. [7]
Записывают принцип метода; зарисовывают калибровочный график зависимости оптической плотности от концентрации стандартного раствора белка. Пользуясь этим графиком, рассчитывают содержание белка в испытуемом растворе и записывают результат. [8]
Концентрацию белков рассчитывают по стандартному графику. В 8 градуированных пробирок из микробюретки приливают столько стандартного раствора белка, чтобы в пробирках соответственно содержалось 0 01; 0 02; 0 05; 0 10; 0 15; 0 20; 0 25; 0 30 мг белка. [9]
Устанавливают в штатив шесть сухих пробирок. Первая и вторая пробирки предназначены для контрольных растворов, третья, четвертая и пятая - для стандартного раствора белка, шестая - для испытуемого раствора белка. Схема опыта приведена в таблице. Так как общий объем опытной пробы должен быть равен 1 мл, в том случае, Когда для определения приходится брать меньший объем белкового раствора, добавляют дистиллированной воды до 1 мл. [10]
К 2 мл раствора, содержащего 0 1 - 2 мг белка, добавляют 2 мл & % - ного раствора NaOH и 0 2 мл реактива Бенедикта. Раствор хорошо перемешивают и через 15 мин фотометрируют при 330 нм на спектрофотометре. Предварительно строят калибровочный график по стандартному раствору белка. [11]