Расщепление - нуклеиновая кислота
Cтраница 1
Расщепление нуклеиновых кислот под влиянием специфических ферментов - эндо - и экзонуклеаз - сопровождается разрывом фосфо-диэфирной связи и образованием продуктов различной величины, которые могут быть разделены методами электрофореза и хроматографии. Это широко используется при анализе последовательности нук-леотидов в молекулах РНК и ДНК. Особое значение при развитии генной инженерии получило расщепление ДНК специфическими эндо-нуклеазами ( рестриктазами), позволяющее получать отрезки ДНК определенной длины и нуклеотидного состава. [1]
Характер продуктов расщепления нуклеиновых кислот при их облучении указывает на разрыв водородных связей, что можно представить как окисление. То же можно сказать и об облучении биологически важных соединений, содержащих сульфгидрильные группы, в которых SH-группы переходят в S - S-гругаш. [2]
Собственно хроматографическому анализу предшествует расщепление нуклеиновых кислот, которое можно проводить химическим или ферментативным путем. Продуктами расщепления являются: а) пуриновые и иири-мидиновые основания, б) мононуклеотиды, в) нуклеозиды. [3]
НУКЛЕАЗЫ, ферменты, вызывающие в организме расщепление нуклеиновых кислот на мононуклеотиды, отщепление от монопуклеотидов фосфорной к-ты с образованием нуклеозидов и расщепление нуклеозидов на пеитозу, пуриновые и пиримиднновые основания. [4]
Применяемые для определения нуклеотидной последовательности РНК методы сводятся к контролируемому расщеплению нуклеиновых кислот различными ферментами и последующему разделению продуктов гидролиза. [5]
 |
Взаимосвязь первичных и вторичных метаболитов ( по HJJ. Блинову 452. [6] |
Реакции первичного обмена сходны для всех живых организмов - это образование и расщепление нуклеиновых кислот и оснований, белков и их предшественников, а также углеводов, липидов, трикарбоно-вых кислот, витаминов. [7]
Выше при рассмотрении природы промежуточных продуктов, обусловливающих непрямое действие излучения, указывалось, что о наличии окислительных реакций при биологическом действии излучений можно судить по продуктам расщепления нуклеиновых кислот при их облучении, по изменению вязкости растворов ДНК и других соединений, в основе чего лежат разрывы водородных связей. Причинами рассмотренного в этом разделе снижения оптической плотности растворов пири-мидиновых и пуриновых оснований и некоторых аминокислот при облучении также являются окислительно-восстановительные процессы. Для растворов пуриновых оснований это доказывается расчетами на основании спектроскопических данных, а также с помощью хроматографического анализа. [8]
Правильность структуры V для ДНК и РНК, предложенной впервые Тоддом и Брауном185, подтверждается и более новыми данными, в частности идентичностью синтетических олигонуклеоти-дов с 3 - 5 -фосфодиэфирными связями и продуктов расщепления нуклеиновых кислот. [9]
Нуклеиновыми кислотами принято называть фосфорсодержащие биополимеры, построенные из остатков нуклеозидов - N-гли-козидов пентоз, производных гетероциклических оснований ряда пурина или пиримидина; остатки нуклеозидов соединены в полимерной цепи фосфодиэфирными связями. При расщеплении нуклеиновых кислот образуются с высоким выходом нуклеозиды или их фосфорные эфиры - нуклеотиды. [10]
Пути распада нуклеиновых кислот выяснены лишь в самых общих чертах. При расщеплении нуклеиновых кислот в организмах, так же как и при распаде сложных углеводов, белков и других соединений, должно выделяться большое количество энергии, значительная доля которой может быть запасена в виде макроэргических соединений и использоваться организмом. Однако, на каких этапах распада нуклеиновых кислот выделяется энергия и в каком количестве, еще не ясно. [11]
Распад нуклеиновых кислот до более простых соединений происходит в несколько стадий и катализируется рядом ферментов. Ферменты, катализирующие расщепление нуклеиновых кислот, содержатся в растениях и при определенных физиологических условиях распад нуклеиновых кислот идет довольно быстро. [12]
Микробиологический синтез нуклеотидов отличается от классических ферментационных процессов необходимостью наличия в среде метаболических предшественников синтезируемых продуктов. Помимо микробиологического синтеза нуклеотидов и их производных происходят ферментативные превращения одних нуклеотидов в другие, энзиматическое расщепление нуклеиновых кислот с дальнейшим фракционированием полученных продуктов гидролиза. [13]
При определенных условиях расщепления ри Do нуклеиновых кислот образуются циклические фосфаты, представляющие собой ди-эфиры ортофосфорной кислоты с 2 - и З - гидроксильными группами рибозы. Циклофосфаты типа ( а) N ( 3, 5) р не образуются при расщеплении нуклеиновых кислот. [14]
Анализ продуктов расщепления позволяет сделать предварительные выводы о принципе строения нуклеиновых кислот. При гидролизе в мягких условиях ферментами из панкреатической железы образуются мононуклеотиды, каждый из которых представляет собой молекулу продукта расщепления нуклеиновой кислоты. Мононуклеотид можно затем расщепить действием разбавленной соляной кислоты на пуриновое или пиримидиновое основание и соединение сахара с фосфорной кислотой. Фермент, выделяемый железами кишечного тракта - нуклеотидаза вызывает распад моно-нуклеотида на фосфорную кислоту и соединение сахара с пуриновым или пиримидиновым основанием. Из этих данных видно, что связь между фосфорной кислотой и основанием осуществляется через молекулу сахара, а через молекулу фосфорной кислоты происходит соединение мононуклеотидов в макромолекулу. [15]
Страницы: 1 2