Cтраница 1
Реактивация изопропилфосфорилированной холинэстеразы протекает достаточно медленно, чтобы можно было ею пренебречь практически в любых условиях. [1]
Лечение пораженных основано главным образом на реактивации холинэстеразы, хотя GB действует и на другие ферменты. В качестве реактиваторов применяют производные гидроксйламина типа МИНА, ДИНА, 2 - ПАМ, никотингидроксамовой кислоты, которые в слабощелочной среде, свойственной организму, легко реагируют не только с самим GB, но и с фосфо-ннлированной холинэстеразой, освобождая ее от остатка GB - изопропилового эфира метилфосфоновой кислоты. Реактивация также эффективна при своевременном ее проведении, потому что постаревшая фосфони-лированная холинэстераза ( после гидролиза ее по изо-нропоксягруппе) с трудом поддается возвращению в активное состояние. [2]
Лечение пораженных основано главным образом на реактивации холинэстеразы, хотя GB действует и на другие ферменты. В качестве реактиваторов применяют производные гидроксиламина типа МИНА, ДИНА, 2 - ПАМ, никотингидроксамовой кислоты, которые в слабощелочной среде, свойственной организму, легко реагируют не только с самим GВ, но и с фосфо-нилированной холинэстеразой, освобождая ее от остатка GB - изопропилового эфира метилфосфоновой кислоты. Реактивация также эффективна при своевременном ее проведении, потому что постаревшая фосфони-лированная холинэстераза ( после гидролиза ее по изо-пропоксигруппе) с трудом поддается возвращению в активное состояние. [3]
Авторы пришли к выводу, что наблюдавшийся эффект зависит от реактивации угнетенной холинэстеразы под действием физиологических метаболитов, накапливающихся при введении гексахлор-циклогексана. Этот вывод был основан прежде всего на исключении четырех других возможных механизмов, одним из которых была гипотеза ферментативного разрушения ядов, подобная изложенной выше. [4]
Влиянием старения можно объяснить данные Дейвисона [34] о том, что спонтанная реактивация холинэстеразы крысы in vivo после отравления ФОС, никогда не была полной; этот процесс вначале протекает быстро, но затем при достижении 60 % превращения останавливается. Сам Дейвисон объяснил это наличием двух типов истийной холинэстеразы, однако теперь кажется более вероятным, что существует один тип фермента, но он может находиться в двух фосфорилированных формах. Дейвисон, правда, привел доказательства существования фракции истинной холинэстеразы, резистентной к пепсину, которая способна лишь к медленной реактивации после фосфорилирования. Но и это можно объяснить тем, что пепсин изменяет свойства фермента в том смысле, что при угнетении он оказывается способным образовывать только форму II фосфо-рилированной холинэстеразы. [5]
На основании этого авторы высказали предположение, что если такие реакции протекают обычно при реактивации холинэстеразы оксимами ( in vivo и in vitro), то наблюдаемый реактивирующий эффект меньше максимально возможного. [6]
В случае госпитализации больного лечение преследует три цели: устранение эффектов от избыточного накопления в организме ацетилхолина; реактивация холинэстеразы; симптоматическая терапия. [7]
Установлено, что для нитрофенилфосфонатов константы скорости щелочного гидролиза и ингибирования холинэстераз в общем подчиняются уравнению Гаммета. Тенденция к линейной зависимости наблюдается также для константы скорости реактивации холинэстеразы, предварительно инги-бированной нитрофенилфосфонатами. В обоих случаях не удалось обнаружить линейной зависимости для нитрофеннл-фосфатов. [8]
На основе уже упомянутых работ Вильсона о реак-тивизации гидроксиламином холинэстеразы, ингибиро-ванной ТЭПФ, и распространения этих реакций гидро-ксиламина на ДПФ, зарин и им родственные соединения Яндорф и Вагнер-Яурегг с сотрудниками в США исследовали многочисленные гидроксамовые кислоты для выяснения возможности их взаимодействия с ингибиторами холинэстеразы. Исследователи смогли показать, что некоторые гидроксамовые кислоты обладают способностью к реактивации холинэстеразы, которая блокирована зарином и родственными ему соединениями. Эти вещества в известном смысле действуют как профилактические средства. [9]
На основе приведенных здесь и других не обсуждавшихся результатов испытаний исследователи этой области пришли к убеждению, что ингибирование холин-эстеразы органическими эфирами фосфорной кислоты представляет только часть комплексного действия органических эфиров фосфорной кислоты на теплокровные организмы. Очевидно, ряд ферментов участвует в процессах расщепления эфиров холина, но в данном случае наиболее важно ингибирование и реактивация холинэстеразы. [10]
Разбирается возможность защиты холинэстераз от фосфорорганиче-ских ингибиторов с помощью соединений, содержащих в своем составе четвертичный атом азота. В разделе об обратимости ингиби-рованных холинэстераз рассматривается спонтанная реактивация, а также действие различных химических реактиваторов. Автор подробно освещает вопрос об изменении со временем способности к реактивации ингибированных холинэстераз. Обсуждается механизм возможных происходящих за это время биохимических изменений. Представляют интерес данные о сродстве различных фос-форорганическйх ингибиторов к истинным и ложным холинэсте-разам. [11]
Первый метод ( если применяются гомогенаты) встретил возражения в связи с возможностью возникновения артефактов, главным образом в результате перераспределения составных частей ткани при гомогенизации. Вероятно, в более поздние сроки избыток параоксона разрушался тканевыми ферментами. Однако Блебер и Кризи [26] считают, что процедура Кевица ведет к спонтанной реактивации угнетенной холинэстеразы и поэтому полученные им результаты являются артефактом. [12]
Эта активация менее выражена в случае диизопропилфоСфорилфермента из-за пространственных затруднений, создаваемых разветвленной алкильной группой, при установлении связи с анионным центром. Впоследствии Грин и Смит [48] показали, что 2 - ПАМ действительно взаимодействует с анионным центром диэтил-фосфорилхолинэстеразы: присутствие таких катионов, как NH и холин, резко снижало скорость реактивации холинэстеразы эритроцитов, угнетенной ТЭПФ, с помощью 2 - ПАМ, но не оказывало влияние на реактивацию изонитрозоацетоном. [13]
Они установили, что в случае холинэстеразы эритроцитов человека величина k составляет 22 1 моль-1 для зарина и 7 моль-1 для ТЭПФ. Было также изучено влияние изменения температуры и рН на реактивирующую способность этих веществ. Эти же авторы привели данные об эффективности некоторых оксимов и гидро-ксамовых кислот при реактивации холинэстеразы эритроцитов, угнетенных различными ингибиторами. [14]
Как указывалось выше, ФОС угнетают холинэстеразу необратимо. Действительно, диализ, разбавление и отмывание не способны восстановить активность фосфори-лированной холинэстеразы. Но если оставить заторможенный фермент на некоторое время, то он медленно превращается снова в активный препарат, причем скорость этого превращения зависит от характера фермента и от природы алкильных заместителей в молекуле ФОС. Примеры приведены на рис. 8 ( стр. Из рисунка видно, что реактивация диметилфосфорилированной холинэстеразы протекает достаточно быстро, и с этим фактором можно считаться даже при обычных экспериментальных условиях. При тех же самых условиях восстановление активности диэтилфосфорили-рованной холинэстеразы невелико [5], но оно становится заметным при более длительной инкубации. [15]