Cтраница 2
Сравнение частот ближайших соседей и нуклеотидных составов ДНК-затравки и ДНК-продукта ясно указывает на матричную роль затравки. Однако из приведенных выше данных не следует, что молекулы продукта и затравки полностью идентичны. Действительно, по крайней мере в условиях реакции in vitro, структуры продукта и затравки, по-видимому, неодинаковы. Как было отмечено выше, физические свойства ДНК-продукта близки, но не идентичны физическим свойствам ДНК-затравки. [16]
Во втором, более распространенном случае, в воде заранее присутствуют частицы твердой фазы, играющие роль затравки. [17]
Наконец, в 1951 г. описано41 расщепление S-карбоксиметил - с / / - гомоцистеина ( XX); роль затравки при этом играл добавленный к раствору бруцин. Выпадающий осадок имел удельное вращение-5 1 и, против ожидания, не содержал бруцина. [18]
К синтезированному в зараженной клетке вирус-специфическому терминальному белку ( точнее - к его более крупному предшественнику) ковалентно присоединяется нуклео-тид, и этот нуклеотид-белковый комплекс выполняет роль затравки. Синтез новой цепи может начаться на любом конце генома, так как в силу наличия инвертированных концевых повторов оба конца Молекулы аденовирусной ДНК идентичны. Синтез дочерней цепи сопровождается вытеснением одной из родительских цепей. После полного вытеснения этой цепи высвобождается ее З - конец, к которому присоединяется новая нуклеотид-белковая затравка. [19]
К синтезированному в зараженной клетке вирус-специфическому терминальному белку ( точнее - к его более крупному предшественнику) ковалентно присоединяется нуклео-тид, и этот нуклеотид-белковый комплекс выполняет роль затравки. Синтез новой цепи может начаться на любом конце генома, так как в силу наличия инвертированных концевых повторов оба конца молекулы аденовирусной ДНК идентичны. Синтез дочерней цепи сопровождается вытеснением одной из родительских цепей. После полного вытеснения этой цепи высвобождается ее З - конец, к которому присоединяется новая нуклеотид-белковая затравка. Синтез комплементарной цепи происходит теперь на однонитевой матрице, т.е. по репарационному типу. [20]
К синтезированному в зараженной клетке вирус-специфическому терминальному белку ( точнее - к его более крупному предшественнику) ковалентно присоединяется нуклео-тид, и этот нуклеотид-белковый комплекс выполняет роль затравки. Синтез новой цепи может начаться на любом конце генома, так как в силу наличия инвертированных концевых повторов оба конца Молекулы аденовирусной ДНК идентичны. Синтез дочерней цепи сопровождается вытеснением одной из родительских цепей. После полного вытеснения этой цепи высвобождается ее З - конец, к которому присоединяется новая нуклеотид-белковая затравка. [21]
![]() |
Схема репликации генома аденовируса. [22] |
После попадания вирусного генома в клетку его З - концевой сегмент образует как бы Т - образную двухнитевую структуру ( из-за соответствующего расположения самокомплементарных последовательностей); эта структура и выполняет роль затравки. [23]
При синтезе нерастворимых 3 - ( 1 - 3) - 0-глюканов или ( 3 - ( 1 - - - 4) - глюканов фермент фракции частиц играет, вероятно, роль затравки: он является молекулой, присоединяющей к себе первое глюкозное звено от молекулы нуклеотида. [24]
При изучении условий действия полимеразы из зобной железы теленка было показано, что, прежде чем ДНК начинает действовать как затравка, водородные связи между полинуклеотидными цепями разрываются и что в действительности роль затравки могут выполнять только однотяжные цепи или ( что, по-видимому, более точно) однотяжные участки. Так, неактивная ДНК-затравка легко превращается в активную затравку при тепловой денатурации. [25]
![]() |
Кристаллизатор с мешалкой и охлаждающими змеевиками. [26] |
Чтобы избежать возникновения слишком большого числа центров кристаллизации и увеличить тем самым размер получаемых кристаллов, охлаждающую воду в рубашку обычно подают не сразу после заполнения кристаллизатора горячим раствором, а лишь спустя некоторое время после образования первичных зародышей, выполняющих в дальнейшем роль затравки. [27]
Совокупность этих и аналогичных данных позволяет сформулировать три важных вывода: 1) в молекулах ДНК встречаются все 16 динуклеотид-ных последовательностей, но частота, с которой они встречаются, существенно зависит от источника ДНК; 2) частота, с которой отдельные динуклеотид-ные последовательности встречаются в ДНК-продукте, практически не отличается от соответствующих частот для ДНК-затравки, что служит еще одним доказательством матричной роли затравки в ДНК-полимеразиой реакции; 3) в результате ДНК-полимеразной реакции образуется продукт, в котором цепи ориентированы противоположно ( антипараллелъно), что согласуется с моделью структуры ДНК, предложенной Уотсоном и Криком. [28]
Важная роль затравки осадком была установлена Байером в 1887 г. Он указал на необходимость применения в виде затравки свежеосажденного гидроксида алюминия или соединений, с ним изоморфных. Роль затравки заключается в инициировании и ускорении разложения алюминатного раствора. [30]